广东省社会发展攻关项目(2003C30104)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 相关作者：刘冬李世敏张丽君梁世中吴亚丽更多>>
- 相关机构：深圳职业技术学院华南理工大学更多>>
- 发文基金：广东省社会发展攻关项目深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学更多>>
- 玉米蛋白酶解产物氨基酸组成的测定被引量：3
- 2004年
- 利用反相高效液相色谱法对玉米黄粉蛋白酶解产物的氨基酸组成进行了测定,发现酶解产物中含有大量的Phe(Phenylalanine,苯丙氨酸),Leu(Leucine,亮氨酸)等必需氨基酸和Pro(Proline,脯氨酸),他们可以添加到食品中来补充必需的氨基酸和降低高血压患者的血压,对综合开发利用这一丰富的农副产品具有重要的意义。
- 黄国清李世敏刘冬郭勇
- 关键词：氨基酸高效液相色谱
- 重组降血压肽基因工程菌破碎方法研究被引量：7
- 2006年
- 对重组降血压肽基因工程菌细胞采用反复冻融法和超声波破碎法分别进行了破碎研究,并通过结晶紫染色镜检和亲和柱层析2种方法对所得细胞破碎效率进行了比较.结果表明,重组降血压肽基因工程菌最佳破碎方法为反复冻融7次,在此条件下,GST(谷胱甘肽转移酶)融合蛋白通过亲和层析柱后的吸附率可达80%以上.
- 刘冬吴亚丽张丽君李世敏梁世中
- 关键词：重组大肠杆菌细胞破碎降血压肽
- 重组降血压肽在大肠杆菌中的高效表达被引量：2
- 2006年
- 目的利用基因工程技术在大肠杆菌中高效表达降血压肽,为大规模生产降血压肽奠定基础。方法分析降血压肽结构和功能之间的关系,人工合成具有较高活性的降血压肽基因序列,并进一步串联融合为6拷贝降血压肽,克隆至表达载体pGEX-4T-2上并转化宿主菌BL21中,重组菌经诱导培养、亲和色谱以及凝血酶酶切分离纯化得降血压肽。结果融合蛋白质的表达量为1.1 g/L,纯化得到的目的降血压肽含量达0.14 g/L,抑制活性达到85%。结论串联的6拷贝降血压七肽可在大肠杆菌中高效表达。
- 张丽君刘冬李世敏唐语谦
- 关键词：降血压肽大肠杆菌
- 重组降血压肽在大肠杆菌中的高效表达被引量：1
- 2006年
- 目的获得具有高活性的重组降血压多肽。方法人工合成高活性降血压肽单体,经酶切位点串联,克隆至表达载体,并转化宿主菌BL21进行诱导表达。结果经酶切、PCR和测序均证明,串联的基因ACEIP已成功克隆至pGEX-4T-2表达载体中,融合蛋白GST-ACEIP的表达水平达24·6%,表达产物的融合蛋白和多肽含量分别为1·1g/L和0·14g/L,其抑制活性达85%。结论已成功制备出高活性的重组降血压多肽,为进一步开发降血压药物奠定基础。
- 李世敏刘冬张丽君梁世中
- 关键词：降血压肽大肠杆菌
- 降血压肽对人脐静脉内皮细胞增殖及内皮素表达的影响(英文)被引量：3
- 2006年
- 背景:降血压肽是一类能够降低人体血压的多肽,可通过抑制人体血管紧张素Ⅱ的生成而达到降低血压的作用。目的:在细胞分子水平探讨降血压肽对人脐静脉内皮细胞生长及内皮素表达的影响,为进一步将降血压肽开发为降压保健食品提供实验依据。设计:重复测量设计。单位:华南理工大学生命科学与工程学院,深圳职业技术学院应用生物技术系。材料:实验于2004-09/2005-03在深圳职业技术学院应用生物技术研究所完成。降血压肽由深圳职业技术学院应用生物技术研究所制备,在一定条件下抑制血管紧张素转移酶活性一半时所需要的抑制剂浓度为15μmol/L。传至4代的人脐静脉内皮细胞用于实验,随机分为7组:空白对照组、降血压肽150mg/L组、降血压肽300mg/L组、降血压肽600mg/L组、卡托普利阳性对照组、去甲肾上腺素阴性对照组、降血压肽+去甲肾上腺素组。方法:①脐静脉内皮细胞按一般细胞培养方法进行,培养液为M199+体积分数为0.15的小牛血清+青霉素10000U/mL+链霉素100mg/L。细胞长满致融合状态后,按1∶2比例传代,传至第4代的细胞用于实验。②空白对照组含体积分数为0.15小牛血清的M199;降血压肽150,300,600mg/L组在此基础上加入降血压肽至终浓度分别为150,300,600mg/L;卡托普利阳性对照组在此基础上加入卡托普利至终浓度为10-5mol/L;去甲肾上腺素阴性对照组在此基础上加入去甲肾上腺素终浓度为100μg/L;降血压肽+去甲肾上腺素组在此基础上加入降血压肽至终浓度300mg/L,去甲肾上腺素至终浓度100μg/L。③采用细胞计数法测定各组细胞生长状况,放免法测定不同培养时间各组细胞培养液中内皮素含量,反转录聚合酶链式反应法测定内皮素mRNA的表达,免疫组化测定细胞内皮素蛋白的表达。主要观察指标:①降血压肽对内皮细胞增殖、分泌内皮素的影响。②降血压肽对内�
- 刘冬张丽君李世敏刘芳梁世中
- 关键词：肽类脐静脉内皮内皮缩血管肽-1
