广东省自然科学基金(4009408)
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
- 相关作者：刘珊英李焱林天歆林燕华魏菁更多>>
- 相关机构：中山大学附属第二医院中山大学佛山市中医院更多>>
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- TNF-α对肾脏近端小管上皮细胞caspase-3的调控作用及其机制被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对大鼠原代肾小管上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)激活与表达的调控以及核因子-κB(NF-κB)在其中的作用。方法:体外分离与培养大鼠肾小管上皮细胞,以TNF-α(10μg/L)按不同时间给予刺激,Western blotting检测caspase-3及其活化裂解片段cleaved caspase-3,以及I-κBα和磷酸化I-κBα(pI-κBα)蛋白水平。分别以TNF-α(10μg/L)处理24h、NF-κB特异性抑制剂Bay11-7082(5μmol/L)处理25h、Bay11-7082(5μmol/L)预处理1h后加入TNF-α(10μg/L)刺激24h,检测caspase-3及cleaved caspase-3的变化。结果:TNF-α刺激6至24h,cleaved caspase-3与caspase-3的相对比值显著高于对照组;而caspase-3蛋白水平在TNF-α刺激后6h无明显增高,12h低于对照组,24h回升;Bay11-7082处理组和Bay11-7082+TNF-α处理组的caspase-3蛋白表达与活化水平显著低于TNF-α处理组和对照组。结论:TNF-α促进大鼠原代肾小管上皮细胞caspase-3的激活与表达,这一过程与NF-κB的激活有关。
- 刘珊英李焱潘秋辉魏菁范新兰苏芳林燕华林天歆
- 关键词：肿瘤坏死因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3NF-ΚB肾小管上皮细胞
- 低剂量脂多糖对NIT-1β细胞凋亡、增殖和分泌功能的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察脂多糖对小鼠胰岛NIT-1β细胞株凋亡、增殖和分泌功能的影响。方法以1μg／ml脂多糖孵育NIT-1细胞0～120h，Hochest33342和膜联蛋白V／碘化丙啶染色检测细胞凋亡，CCK-8（cell counting kit-8）和5-溴脱氧尿核苷（BrdU）检测细胞增殖，放射免疫法检测细胞内胰岛素含量、胰岛素基础分泌和葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS），Western印迹检测胰岛素受体底物2（IRS-2）的酪氨酸磷酸化水平。结果脂多糖作用120h对细胞凋亡无明显影响。脂多糖作用24、48h促进细胞增殖（P〈0．05或P〈0．01）；作用72h对细胞增殖无明显影响；作用96、120h抑制细胞增殖（均P〈0．01）。脂多糖作用48h以后明显抑制细胞的基础胰岛素分泌（均P〈0．01），对细胞内胰岛素含量和GSIS无明显影响。脂多糖作用120h，IRS-2的酪氨酸磷酸化水平明显下降（0．45±0．08对0．22±0．06，P〈0．05）。脂多糖作用60min后，NF—κB抑制物（IKBa）磷酸化水平开始明显升高；IκBα磷酸化抑制剂Bay11-7082预处理1h后，脂多糖刺激的IκBα磷酸化和细胞增殖均受抑制（均P〈0．01）。结论低剂量脂多糖参与调节NIT-1细胞的增殖和胰岛素基础分泌，其机制可能与其激活NF—κB和抑制IRS-2酪氨酸磷酸化有关。
- 梁绮君李焱刘珊英梁颖严励傅祖植
- 关键词：脂多糖增殖
- 肿瘤坏死因子-α对原代大鼠肾近端小管上皮细胞Toll样受体2表达的调控及机制被引量：1
- 2009年
- 目的探讨肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）对原代大鼠肾近端小管上皮细胞Toll样受体2（tolllike receptor2,TLR2）表达的调控以及核因子-κB（nuclearfactor-κB,NF-κB）在其中的作用。方法体外分离与培养原代大鼠肾近端小管上皮细胞,以TNF-α按不同时间给予刺激,Western blot检测TLR2,I-κBα,磷酸化I-κBα（pI-κBα）,GAPDH蛋白水平。分别以TNF-α、NF-κB特异性抑制剂Bay11-7082处理25h、Bay11-7082预处理1h后加入TNF-α刺激24h,检测TLR2表达的变化。结果TNF-α刺激6~24h,TLR2高于基线水平;Bay11-7082处理组和Bay11-7082＋TNF-α处理组的TLR2蛋白表达水平高于对照组。Bay11-7082＋TNF-α处理组与单独TNF-α处理组TLR2蛋白表达水平无差异。TNF-α刺激后5~120min,pI-κBα蛋白水平升高。结论TNF-α促进原代大鼠肾近端小管上皮细胞TLR2蛋白表达,NF-κB对TLR2的表达可能起负调节作用。
- 刘珊英李焱常建星范新兰黄琼傅玉如林燕华林天歆
- 关键词：肿瘤坏死因子-ΑTOLL样受体2核因子-ΚB
- 低剂量LPS激活NF-κB促进胰岛β细胞株NIT-1增殖被引量：3
- 2009年
- 目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对小鼠胰岛β细胞增殖的影响及NF-κB信号途径的调节作用。方法不同剂量LPS按不同时间刺激小鼠胰岛β细胞株NIT-1细胞,并使用NF-κB特异性抑制剂Bay11-7082(5μmol·L-1)进行干预。使用cell counting kit-8(CCK-8)试剂检测细胞增殖,Western blot检测NIT-1细胞磷酸化I-κBα(pI-κBα)和总I-κBα蛋白水平。结果LPS在0.1、0.5、1.0、5.0mg·L-1刺激72h对NIT-1细胞增殖有促进作用,在5.0mg·L-1浓度时促进作用减弱,在10.0mg·L-1浓度时对NIT-1细胞增殖无明显影响;NF-κB特异性抑制剂Bay11-7082可阻断LPS对NIT-1细胞增殖的促进作用;LPS刺激后60～120min,NIT-1细胞磷酸化I-κBα相对于总I-κBα蛋白水平增高;Bay11-7082阻断LPS诱导的NIT-1细胞I-κBα蛋白磷酸化。结论低剂量LPS促进NIT-1细胞增殖,NF-κB激活可能参与其过程。
- 刘珊英李焱梁绮君甘小玲梁颖梁蔚文林燕华林天歆
- 关键词：脂多糖核因子-ΚB胰岛Β细胞NIT-1
- B7-H1阻断对未成熟树突状细胞免疫功能的影响被引量：7
- 2005年
- 目的探讨B7-H1阻断对未成熟树突状细胞(DCs)的免疫刺激活性的影响。方法以细胞因子GM-CSF和IL-4体外诱导人单核细胞来源的树突状细胞,流式细胞仪检测在诱导过程中B7-H1的表达,并以B7-H1单抗阻断处理,分别以流式细胞仪、MTT法、ELISA、ELISPOT法检测B7-H1阻断对DCs的成熟和内吞能力、刺激淋巴细胞增殖、IL-12的分泌、诱导淋巴细胞分化的影响。结果DCs在诱导过程中B7-H1表达逐渐增强,第7d时的阳性表达率为54.12%,以TNF-α诱导成熟后阳性表达率为83.64%;B7-H1阻断对DCs成熟和内吞能力无影响,但可使未成熟DCs刺激淋巴细胞增殖的能力和IL-12的分泌明显增强,并诱导淋巴细胞向分泌IFN-γ的Th1/Tc1的分化。结论B7-H1阻断可增强未成熟DCs的免疫刺激活性,利用B7-H1阻断的DCs瘤苗激发抗肿瘤免疫的方案值得进一步探讨。
- 李东印闵军褚忠华万云乐邵静魏菁刘珊英郑利民区庆嘉
- 关键词：树突细胞B7-H1
