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编码大鼠Nogo受体mRNA的shRNA重组腺病毒载体的构建和鉴定被引量：6: 2008年; 目的:构建Nogo受体(NgR)特异性shRNA重组腺病毒载体,为应用基因沉默技术从转录后水平进行缺血性脑损伤的基因治疗研究奠定基础.方法:将前期构建的大鼠Nogo受体mRNA的shRNA特异性真核表达载体pGenesil-1-shRNA的表达启动子U6连同shRNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack,酶切及DNA测序鉴定后,将含NgR基因的重组穿梭质粒pAdTrack-U6-shRNA经PmeI线性化后转化入pAdEasy-1感受态细菌.将pAd-U6-shRNA质粒经PacI线性化后转染293细胞,包装重组腺病毒Adeno-U6-shRNA,并进行PCR鉴定、PCR产物测序及病毒滴度测定.结果:结果证实pAdTrack-U6-shRNA及pAd-U6-shRNA质粒构建正确,收获病毒后的PCR及DNA测序结果证明Adeno-U6-shRNA包被成功.结论:成功构建了大鼠Nogo受体mRNA的shRNA重组腺病毒载体Adeno-U6-shRNA,将为应用基因沉默技术研究NgR在缺血性脑损伤后神经再生中的作用奠定基础.; 张沁丽秦新月殷成彭彦; 关键词：NOGO受体腺病毒

重组腺病毒Ad-shRNA-NgR在大鼠缺血脑组织的转染效率研究被引量：2: 2010年; 目的探索用于RNA干扰的重组腺病毒Ad-shRNA-NgR转染大鼠缺血脑组织的适宜滴度。方法将低、中、高3种不同滴度(7.90×109、1.58×1010、3.16×1010pfu/ml)的重组腺病毒通过立体定位手术注射到大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)/再灌注模型大鼠(n=10)脑缺血区,于术后48 h和1周在荧光显微镜下观察各组大鼠脑组织中绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达强度并估算转染效率,通过HE染色检测炎性反应。结果中滴度和高滴度注射组大鼠脑组织腺病毒转染效率相似,为60%～70%,明显高于低滴度注射组(P<0.01)。在各组脑组织切片中,仅高滴度注射组有明显炎症反应,血管周围可见淋巴和巨噬细胞浸润。结论中等滴度(1.58×1010pfu/ml)的腺病毒能高效、稳定、低毒地转染大鼠缺血脑组织,推荐用于脑缺血基因干预治疗的实验研究。; 吴小慧秦新月王敬张沁丽李鑫; 关键词：转染生物学标记药理学

中枢神经系统轴突再生障碍信号分子的研究进展: 2006年; 中枢神经系统损伤后轴突再生失败的关键性因素是微环境的抑制作用,目前已经证实存在于微环境的抑制分子主要是髓磷脂抑制分子,如Nogo-A、髓鞘相关糖蛋白和少突胶质细胞/髓鞘糖蛋白,现阶段对轴突再生抑制分子及其下游信号分子的进一步了解和证实为中枢神经系统损伤的治疗指示了新的思路和方向。本文着重对Nogo-A及其信号转导通路各个层面的研究概况作一综述。; 张沁丽秦新月彭彦; 关键词：轴突再生 NOGO-A

中枢神经系统少突胶质细胞-髓鞘糖蛋白受体的作用及其研究进展被引量：2: 2006年; 中枢神经系统（central nervous system，CNS）损伤后轴突再生困难，一直是临床神经疾病治疗的难点，长期以来，人们通过各种途径寻找其原因并试图攻克这一难关。近年来的研究表明，CNS受损后轴突不能再生可能有几方面的原因：成年神经元损伤后本身的再生能力下降；胶质瘢痕的形成；神经营养因子的缺乏及轴突再生抑制蛋白的作用等。其中关于轴突再生抑制蛋白的研究，成为神经再生研究的热点，; 张淑艳秦新月; 关键词：中枢神经系统少突胶质细胞糖蛋白受体轴突再生髓鞘抑制蛋白

腺病毒介导Nogo受体特异性RNA干扰对大鼠脑缺血再灌注后轴突再生和神经行为的影响被引量：1: 2009年; 目的观察腺病毒介导Nogo受体特异性RNA干扰对大鼠脑缺血再灌注后轴突再生及神经行为的影响。方法采用线栓法制作大鼠缺血再灌注模型，20只大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组和RNAi干预组、阴性对照组。术后24h、9周行CT测量脑梗死体积，术后行神经功能评分，示踪技术观察皮质红核束和皮质脊髓束。结果RNAi治疗后脑梗死体积较缺血再灌注组和阴性对照组没有明显变化（P〉0．05），而RNAi治疗3周后，神经功能有明显地恢复（P〈0．01），RNAi治疗9周后健侧皮质红核束发出侧枝支配病灶侧的数量明显增多（P〈0．01）。结论腺病毒介导NgR特异性RNAi可以增加来源于健侧皮质的轴突侧枝出芽，从而促进神经功能的恢复。; 王敬秦新月张沁丽马秀华吕富荣; 关键词：腺病毒轴突再生 NOGO受体

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国家自然科学基金(30470607)