解放军总医院科技创新苗圃基金(10KMZ04)
- 作品数：8 被引量：17H指数：3
- 相关作者：郭英华刘长庭郭娜苏龙翔何建国更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院北京协和医学院中国医学科学院阜外心血管医院更多>>
- 发文基金：解放军总医院科技创新苗圃基金国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- G-SCF联合HGF-MSCs治疗肺动脉高压大鼠的疗效研究
- 2013年
- 目的探讨重组粒细胞集落刺激因子(G-SCF)联合携带肝细胞生长因子(HGF)基因的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对野百合碱诱导的实验性肺动脉高压(PAH)大鼠的治疗效果。方法取3周龄雄性SD大鼠骨髓,经贴壁筛选法体外培养并纯化MSCs,利用腺病毒(Ad)介导的基因转染方法,将HGF基因导入MSCs。将50只SD大鼠随机分为5组(每组10只):PAH组,采用腹腔注射野百合碱(60mg/kg)复制PAH模型后,经颈内静脉移植1ml低糖伊戈尔培养基(L-DMEM);MSCs组,复制PAH模型后,移植5×106/L的空腺病毒载体转染的MSCs细胞悬液1ml;G-CSF组,经腹腔注射G-SCF[100μg/(kg.d)],连续5d;HGF组,移植5×106/L携带HGF基因的MSCs细胞悬液1ml;HGF+G-CSF组,移植5×106/L携带HGF基因的MSCs细胞悬液1ml并且经腹腔注射G-SCF[100μg/(kg.d),连续5d。21d后,观察各组血流动力学指标、右心室(RV)与左心室(LV)重量比值(RV/LV比值)、血管密度及血浆中内皮素-1(ET-1)的表达情况。结果 PAH大鼠治疗21d后,实验各组间全身动脉血压无明显差异;HGF+G-SCF组及HGF组中平均肺动脉压较其他各组显著下降(P<0.05);HGF组及HGF+G-SCF组RV/LV比值显著低于其他3组(P<0.05);HGF+G-SCF组血管密度高于其他各组,但差异无统计学意义(P>0.05);HGF组及HGF+G-SCF组血浆中ET-1的含量显著低于PAH组(P<0.05)。结论 G-SCF联合HGF-MSCs移植可有效减轻野百合碱诱导的大鼠PAH的进程,明显改善心功能及血流动力学指标,这些效应可能是通过增加肺血管数量及减少缩血管因子来实现的。
- 郭娜郭英华苏龙翔刘长庭
- 关键词：肺动脉高压重组粒细胞集落刺激因子血流动力学指标
- 粒细胞集落刺激因子联合携带肝细胞生长因子基因的BMSCs移植对心肌梗死大鼠血管重建的影响被引量：8
- 2011年
- 目的研究粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)联合携带肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因的BMSCs移植对心肌梗死大鼠血管重建的影响,初步探讨作用机制。方法取3周龄雄性SD大鼠骨髓分离培养BMSCs,取第3代BMSCs以携带HGF基因的5型复制缺陷型腺病毒(Ad-HGF)感染。成年雄性SD大鼠44只,体重200～250 g,结扎左冠状动脉建立心肌梗死模型。造模4周后心脏超声检查,以左室短轴缩短率(shorting fraction,FS)<30%作为造模成功标准。取其中12只大鼠,于梗死心肌边缘注射0.1 mL Ad-HGF感染的BMSCs(5×107个/mL),2、7、14 d后用Western blot方法检测大鼠体内HGF蛋白的表达。将其余32只大鼠随机分为4组,每组8只:对照组注射0.1 mL生理盐水;G-CSF组注射0.1 mL生理盐水并于腹腔注射G-CSF 100μg(/kg.d)共5 d;HGF组注射0.1 mL Ad-HGF感染的BMSCs(5×107个/mL);联合治疗组注射0.1 mL Ad-HGF感染的BMSCs(5×107个/mL)并于腹腔注射G-CSF 100μg/(kg.d)共5 d。细胞移植后2周,行心功能和血流动力学检测,然后处死大鼠取心肌组织行免疫荧光双染后激光共聚焦显微镜下评价血管生成情况,Western blot检测VEGF蛋白表达。结果感染Ad-HGF的BMSCs移植2、7 d时在大鼠体内表达HGF蛋白。心功能及血流动力学检测显示,G-CSF组左室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP)、左室舒张末期压力(left ventricularend-diastolic pressure,LVEDP)、LVSP上升/降低时间(dP/dtmax)、FS与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05);HGF组和联合治疗组与对照组相比,LVEDP显著降低,LVSP、FS和dP/dtmax显著升高(P<0.05);与HGF组相比,联合治疗组的FS和dP/dtmax升高(P<0.05)。免疫荧光双染显示心肌梗死交界区增生细胞是血管内皮细胞。联合治疗组血管密度明显高于其他3组(P<0.05),VEGF蛋白表达较其他3组明显增加(P<0.05)。结论 在大鼠心肌梗死4周时给予G-CSF联合携带HGF基因的BMSCs移植�
- 郭英华刘长庭何建国
- 关键词：BMSCS肝细胞生长因子粒细胞集落刺激因子
- 肝细胞生长因子对缺氧损伤的肺微血管内皮细胞的保护作用被引量：4
- 2013年
- 目的探讨肝细胞生长因子(HGF)对缺氧损伤的人肺微血管内皮细胞(HPMECs)的保护作用,提高肺血管内皮细胞对缺氧的耐受性,增加损伤后的存活率,改善其功能,为防止缺氧导致的肺动脉高压提供实验依据。方法体外培养HPMECs,用物理方法建立缺氧损伤模型。实验分为空白对照组、缺氧损伤组、HGF组、PHA665752组(HGF抑制剂组)。采用免疫荧光法鉴定第7代HPMECs,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,倒置显微镜下计数在不同干扰条件下HPMECs的贴壁细胞数量,Western blot法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达情况。结果缺氧损伤组细胞贴壁率下降,ICAM-1的表达量明显高于空白对照组(P<0.01);HGF组细胞存活率较缺氧损伤组明显提高(P<0.01),细胞贴壁率较缺氧损伤组明显增加(P<0.01),ICAM-1的表达量明显下降(P<0.01);PHA组细胞存活率较缺氧损伤组和HGF组均有明显差异(P<0.01),细胞贴壁率较缺氧损伤组明显下降(P<0.01),ICAM-1的表达明显上升(P<0.01)。结论 HGF可能是通过增加HPMECs的存活率、提高体外培养时细胞的贴壁率、减少ICAM-1表达,减轻缺氧损伤所造成的HPMECs损伤。
- 郭娜郭英华苏龙翔王雅娟刘岩姜学革刘长庭
- 关键词：肝细胞生长因子人肺微血管内皮细胞细胞间黏附分子-1
- 模拟失重对肺微血管内皮细胞屏障功能的影响被引量：5
- 2012年
- 目的研究模拟失重对肺微血管内皮细胞屏障功能的影响,为防御失重所导致的不良影响寻找新的治疗靶点。方法采用回转器模拟失重效应干预肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVEC),回转培养72h,同时设1g对照静置培养组。之后用免疫荧光染色标记细胞骨架肌动蛋白F-actin,并在激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架的改变;光镜下观察单核细胞(THP-1)与PMVEC的黏附作用,并计算黏附率;绿色荧光标记的腺病毒感染细胞,荧光显微镜下观察,并在流式细胞仪检测感染效率。结果回转72h PMVEC胞质内F-actin的表达减少,微丝的拉丝感和方向感明显弱化,排列松散,细胞伸展不好,体积变小;模拟失重抑制PMVEC对单核细胞的黏附,导致黏附率(37.69%±6.5% vs 51.25%±8.2%,P<0.05)下降;模拟失重组的腺病毒感染率更高(84.55%±5.31%vs 66.32%±5.74%,P<0.05),更容易受到腺病毒感染。结论模拟失重可以损伤PMVECs的屏障功能。
- 郭英华郭娜苏龙翔李天志王俊锋刘长庭
- 关键词：模拟微重力肺微血管内皮细胞细胞骨架
- 携带肝细胞生长因子基因的骨髓间充质干细胞移植对肺动脉高压大鼠治疗作用初探
- 2012年
- 目的研究携带肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对肺动脉高压大鼠血流动力学指标的变化。方法取3周龄雄性SD大鼠骨髓体外培养并纯化MSCs,利用腺病毒(adenovirus,Ad)介导的基因转染方法,将HGF基因导入MSCs。将SD大鼠30只随机分为3组(n=10):肺动脉高压组(PAH,P组):采用腹腔注射野百合碱(60mg/kg)复制PAH模型后,经颈内静脉移植1ml低糖伊戈尔培养基(L-DMEM);携带空腺病毒载体骨髓间充质干细胞移植组(MSCs,M组):复制PAH模型后,移植5×106/L空腺病毒载体转染的MSCs细胞悬液1ml;腺病毒介导HGF基因转染的骨髓间充质干细胞移植组(HGF,H组):复制PAH模型后,移植5×106/L腺病毒介导HGF基因转染的MSCs细胞悬液1ml。观察各组大鼠血流动力学变化、右心室肥大指数(RV/LV比值)以及血浆中ET-1的水平。结果肺动脉高压大鼠治疗3周后,实验各组动脉血压(BP)无明显差异;H组肺动脉收缩期压力(pulmonary arterysystdic pressure,PASP)和平均肺动脉压(mean pulmonary arterial pressure,mPAP)(37.227 2±5.381 60,25.693 5±1.446 33)均较P组(45.069 0±7.177 97,30.800 2±1.256 15)和M组(44.142 0±6.673 75,30.359 1±1.172 52)显著下降(P<0.05);H组RV/LV比值(42.200 0±8.060 59)较P组(46.858 0±8.241 61)和M组(46.750 0±10.420 14)有所下降,但无统计学差异;H组血浆中ET-1含量(23.862 70±7.426 76)较P组(28.372 0±4.402 75)和M组(31.849 0±7.547 13)均有所下降,但仅较M组有统计学意义(P<0.05)。结论携带HGF基因的骨髓间充质干细胞移植治疗法可在不影响全身血流动力学基础上,显著降低肺动脉高压大鼠的肺动脉收缩压和肺动脉平均压,改善大鼠肺血管的血流动力学,并降低血浆中内皮素-1含量,从而起到保护血管内皮细胞、拮抗血管收缩作用。
- 郭娜郭英华苏龙翔常德刘岩姜学革刘长庭
- 关键词：肺动脉高压肝细胞生长因子骨髓间充质干细胞血流动力学指标ET-1
- 全反式维甲酸对颈动脉内膜损伤后MMP-2和TIMP-2表达的影响
- 2011年
- 目的观察全反式维甲酸(ATRA)对血管损伤后细胞外基质以及TIMP-2和MMP-2表达的影响。方法 36只新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型组和ATRA干预组。分析动脉内膜增生、管腔狭窄和细胞外基质沉积情况,Western blot方法检测肺组织MMP-2和TIMP-2表达。结果内膜损伤后ATRA干预可抑制MMP-2蛋白表达,促进TIMP-2蛋白表达;ATRA干预组的内膜增生程度轻于模型组,血管新生内膜中细胞外基质沉积也明显减少(P<0.05)。结论 ATRA在血管内膜损伤早期能促进TIMP-2表达、抑制MMP-2表达,抑制细胞外基质沉积和平滑肌细胞迁移,抑制内膜过度增生。
- 郭英华刘长庭何建国
- 关键词：全反式维甲酸动脉内膜MMP-2TIMP-2
- 参与干细胞介导心肌修复过程的信号分子
- 2011年
- 骨髓干细胞在治疗心肌梗死方面已经取得了较多进展,为进一步探索更合适的移植时间窗及更好的干细胞植入和促分化的方法,了解参与骨髓动员、归巢、结合、存活、分化和增生的信号分子和信号通路也是非常重要的。本文对参与干细胞介导的心肌修复过程一些重要的信号分子进行综述。
- 郭英华刘长庭
- 关键词：心肌梗死细胞因子骨髓干细胞
- 肝细胞生长因子对肺动脉高压的治疗作用
- 2011年
- 肺动脉高压(pulmonary artery hypertension,PAH)是一种进行性发展的疾病,严重危害患者健康和生命。最近发现肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)具有促进血管内皮细胞增殖、促进血管新生功能,还可有效抑制肺间质重构,明显改善血流动力学和临床症状。特此综述肝细胞生长因子对肺动脉高压的治疗作用。
- 郭娜郭英华刘长庭
- 关键词：肝细胞生长因子肺动脉高压内皮细胞
