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黄芪对铜绿假单胞菌毒力因子调控表达及菌体运动的影响被引量：9: 2014年; [目的]观察黄芪对铜绿假单胞菌相关毒力因子表达及菌体运动的影响,探讨黄芪对铜绿假单胞菌的作用机制。[方法]不同浓度黄芪与对数生长期铜绿假单胞菌共培养,弹性蛋白-刚果红降解实验检测细菌分泌的弹性蛋白酶活性,紫外分光光度法测定绿脓菌素分泌量,结晶紫染色法观察生物被膜形成量,在含黄芪琼脂平板中检测菌体集群运动与泳动能力。[结果]黄芪在终浓度25、12.5、6.25 g/L条件下对弹性蛋白酶、绿脓菌素表达有显著抑制,并能抑制生物被膜形成。在低于12.5 g/L时对细菌增殖无显著影响。细菌在12.5 g/L条件下泳动能力与集群运动均受到显著影响。[结论]黄芪对铜绿假单胞菌增殖和毒力因子表达的抑制程度不一致,提示黄芪抑菌可能通过多种途径发挥抑菌功能,并可能在低浓度下便对密度感应系统造成显著抑制。; 叶丽华夏飞李欣江必武王平; 关键词：弹性蛋白酶绿脓菌素生物被膜

黄连提取物及小檗碱对铜绿假单胞菌密度感应系统的影响被引量：8: 2015年; 目的观察黄连提取物和小檗碱对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)生物学特性的影响,探讨其可能机制。方法铜绿假单胞菌与不同浓度(25.00、12.50、6.25、3.12、1.56、0.78、0.39mg/mL)的黄连提取物共同培养,刚果红降解试验检测弹性蛋白酶表达活性;氯仿盐酸法测定绿脓菌素分泌量;结晶紫染色法观察生物被膜起始量;苔黑酚法Ⅲ测定鼠李糖脂含量;实时荧光定量法检测密度感应基因lasR、rhlR和弹性蛋白酶lasB的表达。结果随着实验浓度的增加,氯仿和乙酸乙酯提取物、小檗碱均能够不同程度抑制细菌增殖、毒力因子产生、生物被膜形成,以及鼠李糖脂分泌。各组lasR和rhlR基因转录随实验浓度增加而逐渐增强,lasB基因转录随之显著降低。结论在面对生存压力条件下,铜绿假单胞菌可能通过增强密度感应系统基因lasR和rhlR的表达,降低毒力因子表达等生物学功能以增加群体存活率。; 王平夏飞贺立群胡茫; 关键词：黄连提取物小檗碱铜绿假单胞菌生物学特性密度感应系统

黄连对铜绿假单胞菌生物学特性的影响及机制被引量：11: 2013年; 目的:观察黄连对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)生物学特性(毒力因子、生物被膜、菌体运动)的影响,探讨黄连对铜绿假单胞菌的影响及机制。方法:铜绿假单胞菌与不同浓度的黄连共同培养,刚果红降解试验检测弹性蛋白表达活性;氯仿盐酸法测定绿脓菌素分泌量;结晶紫染色法观察生物被膜起始量;利用黄连琼脂平板检测菌体集群运动(swarming)与泳动(swimming)。结果:黄连在12.5mg/ml和6.25mg/ml浓度下对绿脓菌素分泌有显著抑制,生物被膜在25mg/ml至6.25mg/ml时受到显著抑制;各组弹性蛋白酶表达均水平较正常对照组显著降低。细菌在12.5mg/ml与6.25mg/ml条件下泳动能力与集群运动均明显弱于正常对照。结论:黄连对铜绿假单胞菌多种生物学特性产生抑制作用,能够对受密度感应系统高度调控的弹性蛋白酶产生显著抑制,提示黄连抑菌机制包括对抑制密度感应系统产生抑制效应,黄连可能是铜绿假单胞菌密度感应抑制剂。; 王平夏飞叶丽华李欣江必武; 关键词：黄连铜绿假单胞菌生物学特性

三种临床常用中药对临床铜绿假单胞菌分离株的作用研究被引量：9: 2015年; 目的观察焦栀子、黄芪和黄柏对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)耐药菌株的生长和毒力因子表达的影响,为医院耐药菌株的治疗提供用药依据。方法取不同浓度中药药液与对数生长期的铜绿假单胞菌耐药株共同培养,利用紫外分光光度法检测细菌浓度;弹性蛋白酶降解刚果红蛋白试验检测弹性蛋白酶生成量;偶氮酪蛋白法测定水解蛋白酶生产量。结果黄芪、黄柏分别在选定的25mg/ml时显著抑制耐药菌株的生长。焦栀子、黄柏分别在200mg/ml、25mg/ml显著抑制弹性蛋白酶和蛋白水解酶的生成;黄芪对弹性蛋白酶和蛋白水解酶无抑制作用。结论焦栀子、黄芪和黄柏对铜绿假单胞菌耐药菌株的增殖和毒力因子表达的具有不同程度影响,提示可以通过不同药物间的配伍治疗医源性耐药菌株感染。; 贺立群夏飞王平; 关键词：铜绿假单胞菌细菌耐药中药毒力因子

栀子对铜绿假单胞菌毒力因子抑制作用及机制研究被引量：7: 2014年; 目的 :观察焦栀子、栀子粗提物及京尼平甙对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)毒力因子表达及菌体运动的影响,探讨栀子及主要活性成分对铜绿假单胞菌的作用机制。方法:取不同浓度栀子水提取液、栀子粗提物水溶液及京尼平甙与对数生长期的铜绿假单胞菌共同培养,利用紫外分光光度法检测细菌浓度与绿脓菌素分泌量;弹性蛋白酶降解刚果红蛋白试验检测弹性蛋白酶生成量;结晶紫染色法观察生物被膜起始量;在琼脂平板中检测菌体集群运动(swarming)与泳动(swimming)能力。结果:抑制细菌生长的浓度分别为焦栀子200mg/ml,栀子粗提物25mg/ml,京尼平甙12.5mg/ml。在低于浓度下,弹性蛋白酶、绿脓菌素、生物被膜受到不同程度的抑制。栀子粗提物在12.5mg/ml时泳动未受抑制,集群运动各实验组均未收到影响。结论 :焦栀子、栀子粗提物和京尼平甙对铜绿假单胞菌增殖和毒力因子表达的抑制程度不一致,且粗提物和京尼平甙比焦栀子更具有显著抑制作用,提示京尼平甙可能是抑制细菌毒力因子的主要成分,且在低于抑菌浓度的范围内对密度感应系统产生了抑制。栀子粗提物中其他成分可能有助于细菌的集群运动。; 王平夏飞江必武周晶银涛胡茫; 关键词：栀子毒力因子

HBV复制及其基因分型与HBV相关慢性肝病关系的临床研究被引量：11: 2013年; 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)复制情况及其基因分型与HBV相关慢性肝病病变程度之间的关系。方法对500例HBV相关慢性肝病患者进行乙肝标记物、HBV-DNA定量检测,采用PCR微板核酸杂交-ELISA法检测HBV基因型,观察HBV-DNA基因型分布,同时观察慢性乙型肝炎、肝炎后肝硬化、肝细胞癌中基因型的分布差异。结果基因型以B型和C型为主,分别为47.1%和52.9%。慢性肝炎中以B型为主,肝硬化中以C型占优,而在肝细胞癌中B型和C型所占百分比差异无统计学意义。结论 C型HBV感染与乙肝病情加重、肝硬化发生有一定关系;而B型HBV感染者在慢性肝炎中多见,提示预后相对较好。; 江必武叶丽华王平; 关键词：慢性肝病乙型肝炎病毒基因型

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武汉市卫生局临床医学科研项目(WX12A06)