福建省科技计划重点项目(2010N0003)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：许明黄志伟程祖锌黄昕颖何海华更多>>
- 相关机构：福建农林大学福建省农业科学院更多>>
- 发文基金：福建省科技计划重点项目福建省科技攻关计划引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 菠菜硝酸还原酶基因的克隆与原核表达被引量：2
- 2012年
- 利用RT-PCR技术从低富集硝酸盐的菠菜品种中克隆得到硝酸还原酶(NR)基因,并进行了同源性分析;构建该基因的原核表达载体pET-NR,转入大肠埃希菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导表达,为深入研究并揭示菠菜的硝酸盐富集机制奠定了基础。结果表明:获得的NR基因包含完整的开放阅读框(2 781 bp),编码926个氨基酸,与菠菜、甜菜NR核苷酸序列的同源性分别为99%、80%,与其氨基酸序列的相同性分别为99%、86%。SDS-PAGE电泳显示重组菌经IPTG诱导表达出104 ku左右的蛋白质,与预期大小一致。
- 程祖锌何海华黄志伟许明黄昕颖郑金贵
- 关键词：菠菜硝酸还原酶基因克隆原核表达
- 木豆山地栽培技术被引量：1
- 2012年
- 介绍了在山地环境条件下木豆种植管理技术要点,包括选地、播种、肥水管理、病虫害防治、保苗越冬以及收获等技术措施。
- 郑开斌许明李爱萍杨志坚
- 关键词：木豆山地栽培技术
- 籼稻GAD基因的克隆、序列分析及其植物表达载体构建被引量：1
- 2012年
- 【目的】克隆籼稻谷氨酸脱羧酶(GAD)基因的全长cDNA,并进行序列分析和植物表达载体构建,为改良水稻的营养保健品质奠定基础。【方法】根据已知植物GAD基因的保守区域设计引物,以高GABA籼稻品系"新-9-4"的胚芽为材料,利用RT-PCR和RACE技术克隆GAD基因的全长cDNA;扩增其编码序列,构建双T-DNA植物表达载体。【结果】扩增获得长1962bp的籼稻GAD基因全长cDNA(OsiGAD),包含1479bp的开放阅读框,编码492个氨基酸。OsiGAD与已报道的水稻GAD基因OsGAD1、OsGAD2、OsGAD3的核苷酸序列同源性分别为67.1%、69.4%、98.3%,推导氨基酸序列的同源性分别为77.6%、70.1%、100.0%。OsiGAD蛋白序列具有磷酸吡哆醛结合位点和与钙调蛋白结合的C端延伸区域;构建了其具有水稻胚乳特异表达特性的双T-DNA植物高效表达载体pCDMAR-OsiGAD-hpt,选择标记基因和OsiGAD基因分别位于此载体的两个不同T-DNA区。【结论】克隆获得的籼稻GAD基因OsiGAD长1962bp,并成功构建了其双T-DNA植物高效表达载体。
- 黄志伟许明林忠辉蔡小玲郑金贵
- 关键词：籼稻
