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p16和FHIT基因启动子甲基化与肺癌的关系被引量：3: 2014年; 目的探讨外周血p16和FHIT启动子区甲基化与肺癌的发生关系.方法应用实时荧光定量甲基化特异性PCR方法检测180例肺癌患者和180名健康对照者外周血p16、FHIT基因启动子序列的甲基化率,并对比分析两者的甲基化水平在肺癌患者和健康人群中存在的差异.探讨各个临床病理特征是否对两者的基因启动子的甲基化率产生影响,分析两者的甲基化水平以及性别、年龄和吸烟史等因素与发生肺癌的危险相关性.结果肺癌组p16和FHIT基因的甲基化水平高于对照组（p16：Z=-2.560,P=0.010;FHIT：Z=-2.797,P=0.005）.p16和FHIT基因的甲基化水平与性别、年龄、吸烟史、肺癌的组织类型及临床分期均无明显关联（p16：Z=-1.121,P=0.262,Z=-0.304,P=0.761,Z=-0.082,P=0.935,x2=0.582,P=0.748,Z=-1.605,P=0.108;FHIT：Z=-0.169,P =0.886,Z=-0.411,P=0.681,Z=-1.095,P=0.273,x2=2.97,P=0.227,Z=-1.189,P=0.234）.单因素logistic回归分析结果显示性别对肺癌的危险性无影响（OR=1.274,P=0.297）,年龄、吸烟、p16和FHIT甲基化水平对肺癌的危险性有影响（OR值分别为1.952、1.888、1.598、1.830,P值分别为0.002、0.003、0.027、0.005）.多因素logistic回归分析结果显示FHIT随着其甲基化水平升高,患肺癌的危险性明显增加（OR =1.867,P=0.006）;p16随着其甲基化水平升高,患肺癌的危险性增加可能性很大（OR=1.477,P=0.086）.联合2个基因甲基化检测可提高对肺癌诊断的价值（AUC=0.832,P＜0.01）.结论外周血p16和FHIT基因启动子甲基化和肺癌有关;联合2个基因检测比单个基因检测对肺癌诊断价值高;p16和FHIT基因启动子甲基化水平检测有望成为肺癌筛查、早期诊断的指标.; 周安燕田蕊吴拥军邝红萍陆青王静; 关键词：P16基因 FHIT基因甲基化肺癌

支气管超声下经引导鞘管肺活检术对肺外周病变的诊断价值被引量：2: 2015年; 目的探讨支气管超声下经引导鞘管肺活检术(endobronchial ultrasound transbronchial lung biopsy with guidesheath,EBUS-GS-TBLB)在肺外周病变(peripheral pulmonary lesion,PPL)诊断中的价值。方法回顾性分析30例行EBUS-GS-TBLB检查PPL患者的临床资料,与组织病理检查及临床诊断结果进行对照,计算EBUS-GS-TBLB诊断符合率,并比较不同直径病灶、不同病灶与超声探头位置关系者诊断率。结果组织病理检查证实30例中恶性病变22例,良性病变8例;患者均完成EBUS-GS-TBLB检查,检查时间(20±10)min,每例患者PPL取得活检标本(4.3±0.7)个,均未发生气胸、大咯血等并发症;EBUS-GS-TBLB诊断PPL的符合率为66.7%(20/30),其中恶性病变为77.3%(17/22),良性病变为37.5%(3/8);直径>20mm病灶诊断率(83.3%)高于直径≤20mm病灶(41.7%)(P<0.05);操作中病灶完全包绕探头者诊断率(87.5%)明显高于病灶边缘临近探头者(42.9%)(P<0.05)。结论 EBUS-GS-TBLB是诊断PPL的一种安全、有效的方法,病灶直径及超声下病灶位置与探头关系可影响诊断结果。; 王焕勤王静; 关键词：经支气管肺活检

超声支气管镜下淋巴结针吸活检术的麻醉效果比较被引量：2: 2020年; 目的比较经超声支气管镜引导淋巴结针吸活检术(EBUS-TBNA)不同麻醉方式的效果。方法2017年1月—2019年1月,在本院接受EBUS-TBNA检查的病人中,随机选取40例局部麻醉病人纳入局麻组,另随机选取40例全凭静脉麻醉病人纳入全麻组。观察两组病人针吸术中生命体征,评估两组麻醉效果,对比取材效果,统计术中、术后两组病人不良反应发生率。结果两组病人术中生命体征指标均在正常范围内,全麻组病人心率(HR)、血氧饱和度(SpO2)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)均优于局麻组,差异均有统计学意义(t=2.156~3.998,P<0.05);全麻组病人麻醉优良率为97.50%,局麻组为65.00%,全麻组麻醉优良率与麻醉效果均优于局麻组(χ2=13.867,Z=-4.573,P<0.05);全麻组取材满意率为85.00%,局麻组为60.00%,全麻组取材效果优于局麻组,差异有统计学意义(Z=-2.690,P<0.05);全麻组病人支气管镜进入不良反应发生率均低于局麻组,差异有统计学意义(χ2=4.211~21.587,P<0.05)。结论全身麻醉下行EBUS-TBNA,病人术中生命体征平稳、取材和麻醉效果良好且不良反应少。; 刘慧锦赵伟新邓翔; 关键词：支气管镜检查腔内超声检查前哨淋巴结活组织检查

煤焦沥青职业接触人群DNA甲基化和端粒损伤研究被引量：1: 2015年; 目的研究煤焦沥青职业接触人群p16、FHIT和RASSF1A基因启动子甲基化及端粒损伤情况，探讨煤焦沥青职业接触有效的生物标志。方法选择某碳素厂180例煤焦沥青职业接触工人为接触组，同期在郑州大学第一附属医院进行体检的健康人145例为对照组。用实时荧光定量PCR的方法检测外周血DNA相对端粒长度，实时荧光定量甲基化特异性PCR方法检测外周血DNAp16、RASSF1A和FHIT基因甲基化率，比较两组端粒相对长度和基因甲基化率情况并分析影响因素。结果接触组外周血白细胞DNA端粒相对长度[0．83（0．71～0．90）]低于对照组端粒相对长度[1．13（0．72～1．45）]，差异有统计学意义（Z=-5．395，P〈0．01）。两组p16、FHIT和RASSF1A基因启动子甲基化率的差异无统计学意义（P〉0．05）。经过性别、年龄和是否吸烟的分层分析后发现，在年龄≤40岁时接触组p16基因启动子的甲基化率高于对照组，差异均有统计学意义（Z=-1．914，P=0．011）。结论煤焦沥青职业接触可引起人外周血白细胞DNA端粒长度缩短，对p16、FHIT和RASSF1A基因启动子甲基化率无影响。; 王艳斌段晓冉张育红王思华姚武王诗斌王威吴拥军; 关键词：煤焦沥青 DNA甲基化端粒

牛蒡子苷元与顺铂联合对人肺癌H460细胞系增殖和凋亡的影响被引量：7: 2015年; 目的研究牛蒡子苷元与顺铂联合对人肺癌H460细胞系增殖和凋亡的影响。方法将不同浓度的牛蒡子苷元作用于肺癌H460细胞,应用MTT法测定牛蒡子苷元单独或联合顺铂对H460细胞的影响。应用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。应用蛋白免疫印迹法检测切割型Caspase-3和切割型PARP的表达水平。结果与对照细胞相比较,牛蒡子苷元处理可显著抑制H460细胞增殖,并且这种抑制作用具有剂量依赖性。牛蒡子苷元在10μM时可增强顺铂介导的抑制H460细胞增殖(P<0.05)。牛蒡子苷元处理后显著诱导H460细胞凋亡发生,较对照细胞,牛蒡子苷元处理H460细胞具有更高水平的切割型caspase-3和PARP表达(P<0.05)。2和10μM顺铂处理H460细胞48h后分别诱导(8.4±1.9)%和(15.6±2.3)%细胞发生凋亡。当2μM顺铂和10μM牛蒡子苷元联合后,H460细胞发生凋亡的比率增加为(27.2±3.1)%,这表明牛蒡子苷元可增强顺铂对H460细胞凋亡的诱导作用(P<0.05)。结论牛蒡子苷元通过增强切割型caspase-3和PARP的表达,剂量依赖性地抑制H460细胞增殖和促进其凋亡。与顺铂联合后,牛蒡子苷元增强H460细胞对顺铂诱导的细胞增殖抑制和凋亡促进作用。因而,牛蒡子苷元可能在基于铂制剂抗NSCLC治疗中有临床应用价值。; 王焕勤王静; 关键词：牛蒡子苷元凋亡顺铂非小细胞肺癌

经支气管针吸活检术在纵隔及肺部疾病诊断中的应用价值: 2015年; 目的探讨经支气管针吸活检术(transbronchial needle aspiration,TBNA)在纵隔及肺部疾病诊断中的价值。方法对68例CT提示肺占位或单纯纵隔淋巴结肿大患者行TBNA检查,再以毛刷在穿刺点处刷检,如果可见局部黏膜增厚或充血水肿需另行活检,取得的标本送病理学检查。比较TBNA与活检、刷检组的诊断阳性率,评价TBNA的有效性及安全性,分析其影响因素。结果 68例患者中阳性56例,诊断阳性率为82.4%,高于常规检查组(51.5%)(P<0.05)。隆突下淋巴结组阳性率高于非隆突下淋巴结(96.0%比63.2%)(P<0.05),淋巴结直径≥2 cm组阳性率高于淋巴结直径<2 cm组(92.6%比60.7%)(P<0.05)。22例少量出血,无其他并发症。结论 TBNA对纵隔及肺部疾病的诊断有较大的临床应用价值。; 邓翔王焕勤刘帅买佳王圆方周璐王静; 关键词：经支气管针吸活检术纵隔淋巴结肿大肺占位

Survivin基因在牛蒡子苷元增强人肺癌H460细胞化疗敏感性中的作用被引量：3: 2015年; 目的研究Survivin基因在牛蒡子苷元促进肺癌细胞化疗敏感性中的作用。方法应用RT-PCR技术从H460细胞中扩增全长人SurvivincDNA，并将其克隆至pcDNA3．1（＋）表达载体，构建人Survivin基因真核表达质粒。将pcDNA3．1-Survivin重组质粒或空载体分别转染H460细胞，孵育24h后，应用Western blot法检测Survivin过表达情况；转染细胞与牛蒡子苷元单独或联合顺铂处理，应用Annexin-V／PI染色法检测细胞凋亡情况。结果与未转染和转染空载体质粒的H460细胞相比，转染pcDNA3．1-Survivin重组质粒H460细胞Survivin水平显著增加，提高大约10倍。低剂量顺铂对H460细胞Survivin蛋白表达影响不显著，而牛蒡子苷元可显著抑制Survivin蛋白表达水平。当牛蒡子苷元与顺铂联合作用时，Survivin蛋白表达抑制程度更大。与转染空载体质粒相比，转染Survivin表达重组质粒的细胞对牛蒡子苷元单独或联合顺铂诱导的凋亡具有抗性，细胞凋亡比率显著下降。结论牛蒡子苷元抑制人肺癌细胞中Survivin基因表达。牛蒡子苷元促人肺癌细胞顺铂敏感性与抑制Survivin通路有关。; 王焕勤王静; 关键词：牛蒡子苷元化疗敏感性顺铂肺癌

决策树联合生物标志在肺癌辅助诊断中应用被引量：5: 2013年; 目的检测p16、RASSF1A和脆性组氨酸三联体基因（FHIT）甲基化水平及外周血DNA端粒长度,建立并探讨判别分析与决策树2种分类模型在肺癌辅助诊断中的意义。方法采用甲基化特异性PCR、实时荧光定量PCR法测定200名正常对照、200例肺癌患者外周血p16、RASSF1A和FHIT基因甲基化水平和DNA端粒长度,建立决策树、判别分析2种肺癌判别诊断模型。结果肺癌组和对照组中p16、RASSF1A和FHIT 基因启动子甲基化水平（%）分别为0.59（0.16~4.50）与0.36（0.06~4.00）（P=0.008）、27.62（9.09~52.86）与17.17（3.86~50.87）（P=0.038）、3.33（1.86~6.40）与2.85（1.39~5.44）（P=0.002）;端粒长度分别为（0.93＆plusmn;0.32）和（1.16＆plusmn;0.57）（P〈0.001）,4项生物标志在2组间差异均有统计学意义;判别分析、决策树对预测集的预测准确度分别为64%、83%;ROC曲线下面积分别为0.640、0.830,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论数据挖掘工具建立的决策树模型判别诊断肺癌的效果优于判别分析。; 魏小玲谭善娟何其栋王威吴拥军王静吴逸明; 关键词：肺癌生物标志决策树

3种基因启动子甲基化联合端粒损伤构建肺癌筛查决策树模型: 2015年; 目的探讨由外周血白细胞DNA中FHIT、RASSF1A和p16基因启动子甲基化水平以及DNA相对端粒长度4项生物标志建立的决策树模型（Decision tree,DT）在肺癌诊断中的意义。方法通过实时甲基化特异性PCR（Real-time methylation specific PCR）法,测定200例正常对照和200例肺癌患者外周血白细胞DNA中FHIT、RASSF1A和p16基因启动子甲基化水平,实时荧光定量PCR方法测定外周血DNA相对端粒长度,基于上述4种生物标志构建肺癌诊断决策树模型。结果肺癌组和对照组中FHIT、RASSF1A和p16基因启动子甲基化水平分别为3.33（1.86~6.40）和2.85（1.39~5.44）（P=0.002）,27.62（9.09~52.86）和17.17（3.86~50.87）（P=0.038）,0.59（0.16~4.50）和0.36（0.06~4.00）（P=0.008）,端粒相对长度分别为0.93±0.32和1.16±0.57（P〈0.001）,这4项生物标志在两组间差异有统计学意义。基于4项生物标志建立的判别分析和决策树模型对预测集的的ROC曲线下面积（AUC）及95%CI分别为0.670（0.569~0.761）和0.810（0.719~0.882）。结论成功构建基于FHIT、RASSF1A、p16基因启动子甲基化和端粒损伤4种生物标志的肺癌诊断决策树模型。; 王艳斌王威吴拥军; 关键词：DNA甲基化端粒肺癌决策树

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河南省科技攻关计划(112102310102)

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