国家自然科学基金(30973275) 作品数:40 被引量:269 H指数:9 相关作者: 刘平 苏胜 葛红岩 张丽娟 王朝 更多>> 相关机构: 哈尔滨医科大学 海南省农垦三亚医院 海南省三亚市人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 “十一五”国家科技支撑计划 黑龙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
RGDRGD肽对人晶状体上皮细胞黏附与增生作用的影响 被引量:1 2011年 背景RGD肽是一类含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸的小分子多肽,其在抑制肿瘤细胞黏附、转移和肿瘤新生血管的生成中起重要作用。研究证实RGD肽能够抑制晶状体上皮细胞(LECs)的黏附和增生,RGDRGD肽串联起来作用增强。目的研究RGDRGD肽对体外培养的人LECs黏附与增生的影响,并与RGD肽的作用进行比较。方法将在体外分离培养的LECs中分别加入250、500、1000mg/L的RGDRGD肽和RGD肽作为实验组,仅加入细胞培养液作为对照组。将LECs以2×10。/ml密度接种到含有纤维连接蛋白(FN)和I型胶原蛋白预孵化的96孔培养板中,培养1h后用MTT比色法检测RGDRGD肽与RGD肽对细胞黏附率的影响。将LECs接种于培养板,分别加入250、500、1000、2000mg/L的RGDRGD肽和RGD肽培养24、48、72h,检测RGDRGD肽和RGD肽对LECs增生的影响。结果RGDRGD肽对人LECs黏附率的抑制呈明显的剂量依赖性,随着其质量浓度的增加,对细胞黏附的抑制作用越强,500mg/L的RGDRGD肽比RGD肽抑制人LECs黏附的作用更强(P〈0.01)。RGDRGD肽对人LECs增生的抑制呈明显的时间剂量依赖性,1000mg/L的RGDRGD肽作用48h比RGD肽对人LECs增生的抑制作用更强(P〈0.01)。结论RGDRGD肽抑制LECs黏附与增生的作用强于RGD肽,为进一步临床应用提供了理论依据。 葛红岩 石妍 杨帆 王希莹 刘平关键词:晶状体上皮细胞 后囊膜混浊 中心性渗出性脉络膜视网膜病变的FFA与OCT对比分析 被引量:3 2015年 目的探讨中心性渗出性脉络膜视网膜病变(CEC)脉络膜新生血管(CNV)的荧光素眼底血管造影(FFA)和相干光断层扫描(OCT)图像特征。方法对33例(33只眼)CEC患者进行FFA及OCT检查,并对两种不同的图像检查结果进行对比分析。结果 33只眼中,典型CNV21只眼,FFA表现为边界清晰的片状高荧光,OCT显示CNV多呈圆形或类圆形强反射,在视网膜神经上皮下间隙生长;隐匿型CNV11只眼,FFA表现为边界不清的片状强荧光,OCT显示CNV呈不规则增强的反射信号,位于视网膜色素上皮层平面。结论 FFA和OCT在对CEC的诊断上各具优势,两者结合可以更有效地诊断CEC。 庄海容 刘平 胡学政关键词:中心性渗出性脉络膜视网膜病变 荧光素眼底血管造影 相干光断层扫描 白藜芦醇对过氧化氢诱导人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用 被引量:4 2013年 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)对过氧化氢(H2O2)诱导人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)氧化损伤的保护作用。方法 HLEC传代培养24h后,分别加入不同浓度(5μmol·L-1、10μmol·L-1、20μmol·L-1、40μmol·L-1)RES预处理12h后,加入100μmol·L-1H2O2继续孵育24h,倒置相差显微镜观察细胞形态改变,MTT比色法检测RES对H2O2诱导的HLEC活力的影响,流式细胞仪检测HLEC细胞凋亡率,比色法检测凋亡相关因子caspses-3及caspase-9的表达。结果氧化损伤可以诱导HLEC形态改变,RES处理后,细胞形态逐渐得到改善。MTT结果显示RES对HLEC活性无抑制作用,RES(5μmol·L-1、10μmol·L-1、20μmol·L-1、40μmol·L-1)孵育24h后细胞存活率分别为(101.30±4.49)%、(100.31±3.53)%、(101.71±3.33)%、(99.30±3.00)%,与对照组(99.67±2.67)%比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05);模型组HLEC经氧化损伤处理后,细胞存活率(34.33±3.71)%明显下降,用20μmol·L-1及40μmol·L-1RES处理后,HLEC存活率分别提高到(57.33±5.61)%和(72.67±6.98)%,与模型组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。流式细胞计数结果显示:对照组HLEC凋亡率为(1.99±0.17)%,经H2O2处理后,模型组HLEC凋亡率为(51.73±4.97)%,20μmol·L-1、40μmol·L-1RES处理后,HLEC凋亡率分别为(34.43±3.67)%、(26.55±2.07)%,与模型组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。此外,RES还可以减少H2O2所致HLEC内caspses-3及caspase-9的表达。结论 RES可以明显抑制HLEC凋亡,其抑制凋亡的作用可能是其防止和延缓白内障发生发展的细胞学基础,从而为寻求有效的防治白内障药物提供可靠的实验依据。 陈英 廖敏华 郑江娉 刘平关键词:白藜芦醇 人晶状体上皮细胞 凋亡 白藜芦醇对紫外线诱导人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用 被引量:4 2013年 目的:探讨白藜芦醇对紫外线诱导人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用。方法:人晶状体上皮细胞系传代培养,紫外线诱导细胞发生凋亡,20μmol/L白藜芦醇预处理细胞后,观察各项指标改变:流式细胞仪检测细胞凋亡率,比色法检测凋亡相关因子caspase-3及caspase-9的表达,透射电镜观察超微结构变化。结果:流式细胞仪检测发现,白藜芦醇可以抑制紫外线照射诱导的细胞凋亡,阳性对照组中caspase-3及caspase-9含量显著高于同时段阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组中caspase-3及caspase-9含量均低于同时段阳性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,伴随白藜芦醇作用时间的延长,透射电镜下人晶状体上皮细胞损伤的程度减轻。结论:白藜芦醇可以抑制紫外线诱导的晶状体上皮细胞的凋亡,对辐射性白内障具有预防作用,从而为寻求有效的防治白内障药物提供可靠的实验依据。 陈雪芳 刘忠鑫 陈炳荣 刘平 郑轶关键词:白藜芦醇 紫外线 晶状体上皮细胞 凋亡 高度近视患者白内障术后黄斑区光学相干断层扫描观察 被引量:3 2011年 目的观察高度近视患者白内障超声乳化术后黄斑区光学相干断层扫描(optical coherencetomography,OCT)图像特征。方法选择29例(36只眼)行白内障超声乳化吸除术的高度近视患者(屈光度为-6.00 D~-17.25 D),观察术后第3天及1周黄斑部OCT改变。结果 12眼表现为黄斑水肿,视网膜厚度增加;7眼表现为黄斑周围视网膜神经上皮变薄;3眼出现黄斑部中心凹附近局限性视网膜浆液性脱离;两眼出现黄斑全层裂孔;12眼未见明显改变。结论 OCT能直观、清晰地显示高度近视患者黄斑区改变,对于早期明确白内障术后低视力产生的原因及治疗效果观察均具有指导作用。 白洁 赵保文 董丽关键词:高度近视 白内障超声乳化术 光学相干断层扫描 MicroRNA-126(miR-126)对血管调节的分子机制 被引量:3 2014年 脉管系统的结构,维护及重塑的精确调节对于血管的正常发育,组织损伤的应答和肿瘤的生长都是必不可少的。最近,越来越多的研究报道了非编码的RNAs,又叫做microRNAs调节内皮细胞对血管原刺激的应答反应。在体内,维持血管内皮细胞和血管的完整性方面miR-126是一种重要的血管生成信号调节因子。miR-126通过负性调控血管生长因子促进血管发生反应,这些血管因子包括血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。因此,miR-126表达的靶向作用也许对于血管过多或缺乏引起的相关疾病开辟了一种新的治疗方法,这些发现也证实了单一miRNA能够调节血管的完整性及血管生成,为调整血管的形态和功能提供了一个新的靶点。本文就当前miR-126对血管的调节及分子机制进行综述。 齐东华 葛红岩 罗鑫 薛大喜 王朝 刘平关键词:MIR-126 新生血管 靶基因 分子机制 年龄相关性核性白内障晶状体核中不可逆聚集体的定性和定量分析 被引量:4 2013年 目的鉴定分析在年龄相关性核性白内障(age-related nuclear cataract,ARNC)晶状体核中发现的不可逆聚集体的蛋白质组成。方法用强解聚试剂和促溶剂溶解ARNC晶状体核(8例)和年龄匹配的正常晶状体核(8例),提取总蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,在ARNC晶状体样品中发现的相对分子质量高的聚集体进行液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)鉴定分析,确定聚集体的组成成分,并根据Mascot搜索数据估算各成分的相对含量。结果 SDS-PAGE结果显示,与正常晶状体核相比,ARNC样品在相对分子质量≤20000处蛋白含量显著减少(均为P<0.05),但在相对分子质量高(>200000)处蛋白质含量显著增加(均为P<0.01)。在ARNC晶状体内存在不可逆的相对分子质量高的聚集体。LC-MS/MS分析显示,这些聚集体主要来源于各种晶状体蛋白,同时还包括Filensin、Phakinin和碳酰还原酶1。在所有组分中αA-晶状体蛋白含量最高(19.1%)。αA-、αB-、γD-晶状体蛋白和DKFZp434A0627比其他晶状体蛋白更容易聚集。结论晶状体蛋白,尤其是αA-晶状体蛋白在白内障产生和发展过程中发生不可逆的聚集,细胞骨架蛋白1可能参与和加速这一过程。 苏胜 刘平 冷非 关立南 田霈 王朝关键词:晶状体 蛋白质组 糖尿病患者白内障超声乳化手术前后泪膜改变及护理 被引量:22 2013年 目的探讨糖尿病患者白内障超声乳化吸除术后早期泪膜的改变及护理方法。方法选择糖尿病白内障患者33例(46只眼)及老年性白内障患者29例(43只眼),观察分析其术前及术后3日、1周、1个月及3个月的主观感觉,泪膜破裂时间(break up time,BUT),角膜荧光素试验(fluorescein,FI),基础泪液分泌试验(Schimertest,SIt)。结果两组患者术前术后3个月干眼症状差异无显著意义(P<0.05);术后3日、1周、1个月与术前比较,术眼干涩、异物感等主观不适较术前增加,差异具有显著意义(P<0.05);术后3日、1个月、3个月BUT、FI、SIT相比较,差异有显著意义(P<0.05);两组术后3日、1周、1个月,BUT、Fl和SIt与术前相比差异有显著意义(P<0.05),术后3个月与术前相比差异无显著意义(P>0.05)。结论糖尿病患者超声乳化吸除术后早期即可出现泪膜异常改变,尤其表现为泪膜稳定性下降,此类人群为干眼的易患人群。对患者要根据情况采取相应的护理措施,以提高其视觉质量。 曹广红 刘丽娟 刘家莹 解巍巍 吴红男关键词:白内障超声乳化术 泪膜 干眼 护理 表没食子酸酯对高糖诱导的人晶状体上皮细胞氧化应激的影响 被引量:2 2016年 目的:探讨表没食子酸酯(EGCG)对高糖诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)氧化应激的影响。方法:建立高糖诱导的HLEC氧化损伤模型,用不同浓度的EGCG干预,MTT检测细胞活力,倒置显微镜观察细胞形态,Hoechst-PI染色观察细胞凋亡,分光光度计检测上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)的含量。结果:MTT结果显示用10滋mol/L EGCG和100滋mol/L EGCG处理后,HLEC活性分别提高到50.33%依3.52%和63.33%依4.63%,与氧化损伤组(32.67%依3.10%)比较差异具有统计学意义(P<0.05);EGCG干预的高糖条件下的HLEC较好地保持了细胞的形态,凋亡细胞数量减少,细胞内SOD、GSH-Px水平升高,MDA水平下降。结论:EGCG可能通过提高细胞内SOD、GSH-Px含量,降低MDA含量发挥其较强的抗氧化作用,从而为寻求有效的防治白内障药物提供可靠的实验依据。 陈婷 刘平 王嘉翔 单多 车雯 张丽娟关键词:EGCG 高糖 晶状体上皮细胞 氧化应激 银杏内酯B对高糖诱导人晶状体上皮细胞凋亡的影响 被引量:3 2016年 目的:探讨银杏内酯B对高糖诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLECs)凋亡的影响。方法:建立高糖诱导的HLECs模型,用不同浓度的银杏内酯B干预,MTT比色法检测细胞存活率,Hochest33258染色观察凋亡细胞形态,透射电镜观察细胞内超微结构变化,比色法检测凋亡相关因子Caspase-3及Caspase-9的表达。结果:高浓度葡萄糖可抑制HLECs活性,诱导HLECs发生凋亡,引起细胞内Caspase-3及Caspase-9表达水平升高;银杏内酯B能明显抑制高糖诱导的HLECs活力的下降,降低细胞凋亡率,减少高糖所致HLECs细胞内Caspase-3及Caspase-9的表达。结论:银杏内酯B可能通过抑制Caspase-3及Caspase-9的表达而有效抑制了高糖诱导的HLECs凋亡。 王彦红 兰天野 陈婷 刘平 林丽丽关键词:银杏内酯B 高糖 晶状体上皮细胞 凋亡