国家自然科学基金(81170294)
- 作品数：13 被引量：56H指数：5
- 相关作者：范粉灵田红燕王军张松林刘亚更多>>
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- 微小RNA-133b对心肌纤维化的影响被引量：5
- 2019年
- 目的研究微小RNA-133b(miR-133b)对心肌纤维化的影响。方法选取人心肌成纤维细胞(CFs),采用CCK8检测过表达及敲低miR-133b时细胞增殖情况,qRT-PCR及Westernblot检测结缔组织生长因子(CTGF)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)及Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)的表达水平;生物学软件预测miR-133b的靶基因,双荧光素酶报告实验证实miR-133b与靶基因的直接调控作用。结果qRT-PCR检测结果显示,转染miR-133bmimic后miR-133b的表达水平明显高于阴性对照组(t=26.219,P=0.000),转染miR-133binhibitor后miR-133b的表达水平明显低于阴性对照组(t=6.738,P=0.003)。转染CFs21、45、69、93和117h后,与阴性对照组相比,miR-133bmimic组CFs增殖能力明显降低,而miR-133binhibitor组CFs增殖水平明显上升(P均<0.05)。与阴性对照组相比,过表达miR-133b后,CTGF(t=9.213,P=0.001;t=8.195,P=0.001)、α-SMA(t=6.511,P=0.003;t=4.434,P=0.011)、collagenⅠ(t=3.172,P=0.034;t=4.053,P=0.015)及collagenⅢ(t=6.404,P=0.003;t=5.319,P=0.006)的mRNA和蛋白表达水平均明显下调;敲低miR-133b后,CTGF(t=9.439,P=0.001;t=14.100,P=0.000)、α-SMA(t=4.519,P=0.011;t=4.377,P=0.012)、collagenⅠ(t=5.966,P=0.004;t=5.514,P=0.005)及collagenⅢ(t=4.622,P=0.010;t=4.996,P=0.008)的mRNA和蛋白表达水平均明显上升。共转染miR-133bmimic和WT3’UTR表达载体细胞的相对荧光素酶活性明显低于共转染mimiccontrol和WT3’UTR表达载体的细胞(t=5.654,P=0.005),共转染miR-133bmimic和MUT3’UTR表达载体细胞的相对荧光素酶活性与共转染mimiccontrol和MUT3’UTR表达载体的细胞差异无统计学意义(t=0.380,P=0.724)。结论miR-133b可能是通过靶向抑制CTGF来影响CFs的活化增殖,从而改善心肌纤维化。
- 张松林范粉灵魏峰王军张玉顺
- 关键词：心肌纤维化结缔组织生长因子
- NRG-1对缺氧复氧心肌细胞凋亡及氧化损伤的影响被引量：5
- 2018年
- 目的:探讨神经调节蛋白1(NRG-1)对缺氧复氧环境下的心肌细胞凋亡及氧化损伤影响及机制。方法:以心肌细胞(HCM)为研究对象,构建缺氧复氧心肌细胞模型,在缺氧前加入0.8 mg/L的NRG-1。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,二硝基苯肼显色法检测上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量,二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法检测活性氧簇(ROS)水平,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平,Western blot检测蛋白激酶B(Akt)、磷酸化的Akt(p-Akt^(Thr308))、cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:心肌细胞缺氧复氧后细胞吸光度(A)从0.66±0.03降低至0.36±0.04,细胞凋亡率从(4.62±0.97)%升高至(29.07±3.43)%,ROS水平从69.29±7.96升高至280.84±20.52,LDH、MDA水平也升高,SOD、p-Akt/Akt水平均下降。而NRG-1处理后的细胞吸光度(A)从0.36±0.04升高至0.47±0.05,细胞凋亡率从(29.07±3.43)%下降至(19.76±3.41)%,ROS水平从280.84±20.52下降至128.23±12.32,LDH、MDA水平也下降,SOD、p-Akt^(Thr308)/Akt水平均升高。结论:NRG-1能够部分抑制缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡和氧化损伤,影响心肌细胞中p-Akt/Akt的水平。
- 王军范粉灵张松林王星烨薛建颖
- 关键词：心肌细胞缺氧复氧凋亡神经调节蛋白1
- 沙格雷酯下调肺动脉高压大鼠右室TRPC1、TRPC6通道及calcineurinA/NFATc3表达被引量：1
- 2018年
- 目的研究5-HT_(2A)受体拮抗剂沙格雷酯对肺动脉高压大鼠的右室TRPC1,TRPC6通道及calcineurin A/NFATc3表达的影响。方法 18只大鼠分为对照组、肺动脉高压组和沙格雷酯组,每组6只。对照组给予生理盐水腹腔注射和生理盐水灌胃,肺动脉高压组给予野百合碱腹腔注射及生理盐水灌胃,沙格雷酯组给予野百合碱腹腔注射及沙格雷酯灌胃。干预4周时采用RT-PCR和Western blot检测右室TRPC1、TRPC6通道和calcineurin A/NFATc3的mRNA和蛋白表达,并对三组间结果进行比较。结果与对照组相比,肺动脉高压组大鼠右室心肌中TRPC1、TRPC6通道、calcineurin A/NFATc3的mRNA和蛋白表达升高(P<0.05);与肺动脉高压组相比,沙格雷酯组大鼠右室心肌TRPC6通道、calcineurin A/NFATc3的mRNA表达降低,TRPC1、TRPC6通道、calcineurin A/NFATc3的蛋白表达降低(P<0.05)。结论肺动脉高压大鼠右室心肌的TRPC1、TRPC6通道、calcineurin A/NFATc3表达上调,沙格雷酯可逆转这些蛋白和基因的表达水平。
- 韩俊丽田红燕刘亚范粉灵
- 关键词：沙格雷酯肺动脉高压右心衰竭5-HT
- 贝前列素钠对低氧性肺动脉高压大鼠的作用及对肺动脉平滑肌氧敏感性K_V通道表达的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨贝前列素钠(BPS)对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠的疗效,及其对肺动脉平滑肌氧敏感性KV通道表达的影响。方法采用在低压低氧舱内每日饲养8h的方法建立HPH大鼠模型;BPS干预组每日给予BPS灌胃[300μg/(kg·d)],对照组和模型组给予生理盐水灌胃;4周后测定平均肺动脉压力(mPAP),计算右心肥厚指数(RVHI),肺组织切片HE染色评价肺动脉壁增厚程度,Real-time PCR和Western blot检测肺小动脉平滑肌KV1.2、KV1.5、KV2.1mRNA和蛋白表达水平。结果连续4周低压低氧成功诱导HPH大鼠模型;与模型组相比,BPS干预后mPAP和RVHI降低[mPAP:(13.48±2.18)mmHg vs.(23.87±2.23)mmHg vs.(17.09±1.20)mmHg;RVHI:0.28±0.02 vs.0.46±0.03 vs.0.36±0.04;P<0.05];肺小动脉重构改善(中膜面积百分比:35.72±6.58 vs.68.52±5.64 vs.46.58±8.43,P<0.05),肺动脉平滑肌KV1.2、KV1.5、KV2.1mRNA和蛋白表达水平升高(蛋白相对表达量:KV1.2,0.78±0.10 vs.0.15±0.03 vs.0.57±0.13;KV1.5,0.61±0.10 vs.0.31±0.05 vs.0.59±0.13;KV2.1,0.29±0.05 vs.0.10±0.02 vs.0.28±0.07;P<0.05)。结论 BPS可改善HPH大鼠的肺动脉高压,并上调肺动脉平滑肌KV1.2、KV1.5、KV2.1的表达。
- 田华耿洁邓纪钊范粉灵田红燕
- 关键词：低氧性肺动脉高压肺动脉平滑肌细胞
- 比索洛尔对大动脉水平左向右分流大鼠窦房结HCN2、HCN4通道mRNA表达及固有心率的影响
- 2013年
- 目的以大动脉水平左向右分流SD大鼠心衰模型为研究对象,观察固有心率、窦房结起搏电流HCN2及HCN4亚型mRNA在心脏重构过程中的变化,以及选择性β1-受体阻滞剂比索洛尔对它们的影响。方法通过腹腔动静脉造瘘术建立慢性大动脉水平左向右分流心力衰竭模型,并以假手术组动物为对照。共同饲养2月后,随机分别给予安慰剂或比索洛尔。4周后再次行超声心动检查;测定血流动力学改变及固有心率;提取RNA进行实时定量RT-PCR测定各组HCN通道各亚型mRNA的表达水平。结果造模后2月,超声心动图显示,手术组大鼠心脏扩大,左室厚度显著增高,射血分数则显著降低(P<0.01)。比索洛尔干预4周后未能逆转大动脉水平左向右分流引起的心腔扩大(P>0.05),但可改善心脏功能(P<0.05)并提高固有心率(P<0.01)。HCN通道蛋白mRNA检测显示:①大鼠窦房结组织中HCN2表达占优势,HCN4相对较少(79%、21%);②安慰剂组HCN4mRNA水平较假手术组明显下降(0.09±0.02 vs.1.04±0.13,P<0.01),而HCN2mRNA表达在各组间没有统计学差异;③比索洛尔治疗后,HCN4基因mRNA水平明显回升(0.99±0.15 vs.0.09±0.02,P<0.01)。结论①比索洛尔干预在改善心衰大鼠心脏功能的同时,可以降低基础心率、升高固有心率;②大动脉水平左向右分流导致心衰大鼠窦房结HCN4通道mRNA的表达降低,比索洛尔治疗可以逆转该通道的重构。这是其影响固有心率、改善心功能的可能机制。
- 张军波牛小麟吕颖田红燕杜媛黄欣王亭忠席雨涛韩克孙玉晓马爱群
- 关键词：左向右分流比索洛尔窦房结心衰
- 5-羟色胺对大鼠肺动脉外膜成纤维细胞增殖、迁移及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨5-羟色胺(5-HT)对大鼠肺动脉外膜成纤维细胞增殖、迁移和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法分离并培养大鼠肺动脉外膜成纤维细胞。将体外培养的大鼠肺动脉外膜成纤维细胞分为1~6组,2~6组分别加入10^(-9)、10^(-8)、10^(-7)、10^(-6)、10^(-5) mol/L 5-HT,1组加等量DMEM培养基,继续培养24 h。采用MTT法观察各组细胞增殖情况(OD490值),采用Transwell小室实验观察各组细胞迁移能力(穿膜细胞数),采用Western blotting法检测各组细胞α-SMA表达。结果 1~6组细胞OD490值分别为0.72±0.04、0.79±0.04、0.84±0.05、0.87±0.04、0.93±0.03、0.94±0.03,穿膜细胞数分别为(9.2±1.6)、(17.2±1.7)、(26.0±2.9)、(34.4±2.5)、(63.6±6.0)、(50.4±6.0)个。OD490值、穿膜细胞数:5组>4组>3组>2组>1组,P均<0.05;5、6组OD490值、穿膜细胞数比较,P均>0.05。1~6组细胞α-SMA相对表达量分别为1.01±0.21、1.18±0.35、1.91±0.28、2.37±0.42、2.78±0.33、2.13±0.40。细胞α-SMA相对表达量:5组>4组>3组>2组>1组,P均<0.05;6组低于5组,P<0.05。结论 10-9~10-6mol/L 5-HT可呈剂量依赖性促进大鼠肺动脉外膜成纤维细胞增殖、迁移和α-SMA表达。
- 韩新源陈春燕范粉灵解翠李秀红田红燕
- 关键词：血管重构5-羟色胺Α-平滑肌肌动蛋白
- 肺动脉高压大鼠肺动脉中PKC、TGF-β1的表达及5-HT_(2A)受体拮抗剂对其表达的调控被引量：5
- 2013年
- 目的探讨5-HT2A受体参与肺动脉平滑肌细胞增殖的可能机制。方法腹腔注射野百合碱建立肺动脉高压大鼠模型;5-HT2A受体拮抗剂(盐酸沙格雷酯)灌胃3周为干预组;腹腔注射生理盐水为对照组。HE染色观察肺动脉结构的变化;RT-PCR和Western blotting技术检测蛋白激酶C(PKC)和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA及蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组大鼠平均肺动脉压力(mPAP)、右室肥厚指数明显升高(P均<0.05);内皮细胞脱落消失,肺动脉管壁增厚,管腔狭窄;肺动脉中TGF-β1、PKC蛋白及mRNA的表达明显升高。与模型组相比,干预组mPAP、右室肥厚指数明显降低(P<0.05,P<0.01);中膜厚度及管腔狭窄程度也明显改善;肺动脉中TGF-β1、PKC蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 5-HT2A受体拮抗剂可降低肺动脉压力,改善肺动脉高压导致的肺动脉重塑,其作用可能是通过PKC/TGFβ1途径实现的。
- 闫晓丽田红燕刘亚王文平马强张军波孟燕范粉灵
- 关键词：蛋白激酶C肺血管重塑肺动脉高压
- 左心耳封堵术与华法林对非瓣膜性房颤病人卒中预防的有效性及安全性对照研究被引量：11
- 2018年
- 目的对比非瓣膜性心房颤动(NVAF)应用华法林(WAR)与左心耳封堵术(LAAO)治疗在卒中预防上的有效性和安全性。方法以2014年1月—2016年6月接受左心耳封堵术治疗的54例NVAF病人为LAAO组,并以同期使用华法林治疗的54例NVAF病人为WAR组。在每位病人出院后1个月、3个月、6个月、12个月时进行随访,观察两组在随访期内卒中预防的有效性和安全性。结果两组出院后1个月、3个月、6个月、12个月随访时均无体循环栓塞、心血管死亡及脑卒中等有效性终点事件发生。LAAO组病人手术均成功植入左心耳封堵器,成功率100.0%;术后出现5例残余分流,分流量依次为2 mm、1 mm、1 mm、3 mm、2 mm,术后3个月随访时残余分流均消失。LAAO组术后无大出血、封堵器表面血栓形成等并发症;仅有4例出现包心积液,及时予以保守对症处理后,于术后3个月随访时消失。术后1年随访中两组均无死亡、心脏压塞、器械相关栓塞等不良事件发生。LAAO组随访3个月后出血事件及1年内总出血事件发生率分别为0.0%、9.3%,均明显低于WAR组的16.7%、27.8%(P<0.05)。术后1年随访期内在出血类型上,两组相比均无统计学意义(P>0.05)。结论 NVAF应用左心耳封堵术治疗在预防卒中方面有效性不劣于华法林,但安全性优于华法林。
- 王军张松林何璐范粉灵张玉顺
- 关键词：非瓣膜性心房颤动华法林卒中预防安全性
- 贝前列素促进野百合碱诱导肺动脉高压大鼠肺动脉细胞凋亡被引量：3
- 2013年
- 目的探讨前列环素对肺动脉细胞凋亡的影响。方法 30只大鼠,随机分为对照组、野百合碱(MCT)组及贝前列素组。MCT组及贝前列素组腹腔注射60 mg/kg MCT,对照组腹腔注射等体积0.9%氯化钠注射液;第2天起,贝前列素组每天200μg/kg贝前列素灌胃。所有大鼠饲养21 d后,观察肺动脉血流动力学及右心肥厚、肺组织HE和TUNEL染色分别观察肺动脉重塑和肺动脉细胞凋亡,实时定量PCR及Western blot观察肺动脉内BAX、BCL-2和PDK mRNA和蛋白水平的改变。结果贝前列素组大鼠的平均肺动脉压力,右心肥厚指数及肺动脉管壁厚度均明显低于MCT组(P<0.05)。贝前列素组大鼠肺动脉细胞凋亡较MCT组增加,肺动脉组织中BAX mRNA和蛋白水平均高于MCT组,而BCL-2与PDK mRNA和蛋白水平均显著降低。结论贝前列素可以通过促进肺动脉细胞凋亡改善野百合碱诱导肺动脉高压大鼠的肺动脉重塑。
- 刘亚田红燕闫晓丽王文平范粉灵
- 关键词：凋亡肺动脉高压贝前列素
- 沙格雷酯对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺动脉TGF-β1/Smads信号通路的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察盐酸沙格雷酯(5-HT_(2A)受体拮抗剂)对野百合碱肺动脉高压模型大鼠肺动脉结构和肺动脉TGF-β1/Smads信号分子表达的影响。方法 SD大鼠随机分为对照组、肺动脉高压模型组(模型组)及沙格雷酯干预组(沙格雷酯组)。其中模型组和沙格雷酯组采用野百合碱单次腹腔注射法建立肺动脉高压大鼠模型;同时,沙格雷酯组再给予盐酸沙格雷酯灌胃。干预21 d时分别测定平均肺动脉压力(m PAP),计算右心肥厚指数,HE染色观察肺动脉结构的变化;采用Mallory三色染色评估肺动脉纤维化程度;Western blot检测肺动脉转化生长因子β1(TGF-β1)及其下游分子磷酸化的Smad3蛋白的表达水平,以评估TGF-β1/Smad3信号通路的活化。结果与对照组相比,干预21 d时模型组大鼠的m PAP、右室肥厚指数明显升高(P<0.05);肺组织HE染色结果显示,模型组肺动脉管壁明显增厚,管腔狭窄,纤维组织增生;肺动脉中TGF-β1、p-Smad3蛋白表达明显升高(P<0.01)。与模型组相比,沙格雷酯组m PAP、右室肥厚指数明显降低(P<0.05);管腔狭窄程度也明显改善,肺动脉管壁纤维化程度减低(P<0.01);肺动脉中TGF-β1、p-Smad3蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论沙格雷酯抑制野百合碱动物模型的肺动脉纤维化及改善肺动脉高压程度,这一作用可能是通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路的活化而实现的。
- 韩新源陈春燕解翠王飞宇李秀红田红燕
- 关键词：沙格雷酯肺动脉高压转化生长因子肺血管重构
