国家自然科学基金(81170273)
- 作品数：12 被引量：20H指数：2
- 相关作者：武军驻宋健刘艳红王京伟许冰冰更多>>
- 相关机构：武汉大学安徽三联学院四川省医学科学院(四川省人民医院)更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家大学生创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 动脉粥样硬化进程中单核/巨噬细胞IL-1、IL-6的表达被引量：9
- 2015年
- 目的探索脂多糖的作用下单核/巨噬细胞产生的炎症因子与急性冠脉综合征病程的内在关联。方法体外培养人急性单核细胞白血病细胞(THP-1),实验组加脂多糖,对照组空白,按一定的时间间隔取一定体积培养液,用ELISA检测IL-1β、IL-6、IL-1α浓度,观测其变化情况及何时达到峰值。并对出现峰值最早的IL-1β进行实时定量PCR检测。结果 ELISA显示,随着培养时间的延长,浓度也发生相应的改变,IL-1β在3时达到峰值,IL-6在16时达到峰值,IL-1α在18时达到峰值。实验组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论脂多糖影响巨噬细胞IL-1β、IL-6、IL-1α的表达;达到峰值的时间不同,说明IL-1α、IL-1β、IL-6可能在不同的时间起主导作用。
- 刘艳红
- 关键词：白介素-1Β白介素-6白介素-1Α脂多糖动脉粥样硬化
- 低密度脂蛋白诱导Raw264.7巨噬细胞后脂质筏中脂类物质组分的变化被引量：2
- 2016年
- 目的研究Raw264.7细胞经低密度脂蛋白(LDL)诱导后脂质筏中脂类物质组分是否发生变化。方法蔗糖梯度超速离心得到对照组和实验组细胞中的脂质筏,气相色谱质谱(GC-MS)分析脂质筏中脂肪酸的变化;化学衍生脂质筏标志物-单唾液酸四己糖神经节苷脂(Ganglioside 1,GM1),高效液相色谱(HPLC)分析GM1的变化;胆固醇试剂盒检测脂质筏中胆固醇含量的变化。结果与对照组相比,经LDL诱导的Raw264.7细胞脂质筏中的单不饱和脂肪酸(MUFAs)组分中十六烯酸、油酸、二十四烯酸显著升高;多不饱和脂肪酸(PUFAs)组分中亚油酸、花生四烯酸和二十碳三烯酸显著降低;饱和脂肪酸组分中棕榈酸和硬脂酸显著升高,十四烷酸和二十烷酸含量无变化;GM1含量和胆固醇含量均显著增高,有统计学意义。说明LDL改变了细胞脂质筏的脂质微环境。结论 Raw264.7细胞脂质筏中的脂类物质可能与LDL氧化有关,有利于我们进一步研究LDL氧化过程中脂类物质的作用及其与蛋白质的相互作用。
- 许冰冰叶云高晓燕宋健赵瑾超王贵玲武军驻
- 关键词：低密度脂蛋白脂肪酸胆固醇神经节苷脂
- 检测血浆D-二聚体改善低密度脂蛋白预测冠心病的准确性被引量：1
- 2017年
- 目的探讨血浆D-二聚体(D-D)协助低密度脂蛋白(LDL)预测冠心病的可能性。方法选取武汉大学人民医院2015年1~12月住院治疗经心血管造影确诊的冠心病患者400例,平均年龄(62.90±5.70)岁;非冠心病体检者55例,平均年龄(50.40±7.60)岁。使用SIEMENS ADVIA-2400全自动生化分析仪测定LDL水平,SYSMEX CA7000血凝仪测定D-D水平,ROC曲线分析两者与冠心病之间的关系。结果 ROC曲线显示50~70岁患者中LDL诊断冠心病有60%的特异性和77%的灵敏度,而D-D水平不能有效诊断冠心病;当考虑以D-D水平弥补LDL水平诊断的不足可以提高诊断质量,尤其以0.2 mg/L的D-D水平为判断标准时,诊断的特异性可达76.9%,灵敏度可达84.6%。结论血浆D-D水平的检测可以改善LDL水平对冠心病预测的准确性。
- 刘艳红
- 关键词：D-二聚体低密度脂蛋白冠心病ROC曲线
- 冠心病患者血浆D-二聚体与低密度脂蛋白水平的相关性探讨被引量：2
- 2015年
- 目的探讨冠心病患者血浆D-二聚体(D-dimer,D-D)与低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL)水平之间的关系。方法经心血管造影确诊的冠心病患者150例,平均年龄(63.40±5.70)岁;体检者150例,平均年龄(47.40±7.60)岁;健康志愿者30例,平均年龄(20.30±3.50)岁。SIEMENS ADVIA-2400全自动生化分析仪测定LDL水平,>3.12 mmol/L为阳性;SYSMEX CA7000血凝仪测定D-D水平,>0.6 mg/L为阳性。结果 LDL与D-D水平呈正相关(r=0.237,P<0.05);冠心病组与体检组和健康对照组相比,LDL水平明显升高,差异均具有显著统计学意义(P<0.01);D-D水平同时明显升高(P<0.05)。冠心病患者中LDL水平的阳性率为75.3%;而D-D水平的阳性率为97.3%。体检组中LDL水平的阳性率为18%;LDL阳性体检者中D-D水平的阳性率为48.1%;LDL阴性体检者中D-D水平的阳性率为1.63%。结论 D-D的检测可以提高LDL水平对冠心病预测的准确性。
- 刘艳红陈进
- 关键词：D-二聚体低密度脂蛋白冠心病
- LDL诱导THP-1细胞炎性因子FOS、TNF-α、IL-1β的顺序表达被引量：1
- 2015年
- 目的探讨LDL诱导THP-1细胞内炎性因子FOS、TNF-α、IL-1β表达及3种炎性因子的关系,为早期诊断动脉粥样硬化提供依据。方法采用实时荧光定量PCR检测LDL刺激的THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA的表达,TNF-α抑制剂刺激THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA的表达及TNF-α抑制剂对LDL诱导的THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA表达影响;采用流式细胞仪检测TNF-α抑制剂刺激的THP-1细胞凋亡情况。结果 LDL刺激THP-1细胞FOS m RNA的表达0.5 h达到高峰(P<0.05),TNF-αm RNA的表达1 h开始上升并达到最高(P<0.05),IL-1βm RNA的表达1 h开始上升(P<0.05);TNF-α抑制剂不促进细胞凋亡,100μg/ml时凋亡率最低。TNF-α抑制剂刺激细胞FOS m RNA 2 h表达下降(P<0.05),TNF-αm RNA 1 h表达上升(P<0.05),2 h表达下降(P<0.05),IL-1βm RNA 1 h表达下降(P<0.05);LDL诱导细胞1 h后加入TNF-α抑制剂刺激细胞FOS m RNA 1 h表达下降(P<0.05),TNF-αm RNA 0.5 h表达下降(P<0.05),IL-1βm RNA 0.5 h表达下降(P<0.05)。结论 LDL能够促进THP-1细胞内FOS、TNF-α、IL-1β的表达,且它们之间有一定的表达顺序,TNF-α能促进IL-1β的表达。
- 叶云许冰冰宋健高晓燕武军驻
- 关键词：炎性因子低密度脂蛋白单核细胞
- TLR4-TLR10-CD36的识别和炎症信号转导可能参与细胞内天然低密度脂蛋白氧化被引量：1
- 2019年
- 目的探究低密度脂蛋白(LDL)氧化的可能分子机制。方法天然LDL(100 mg/L)诱导人单核细胞系THP-1细胞0、1、3、5 h。用诱导不同时间点的单核细胞进行表达谱芯片实验,筛选与LDL氧化相关的基因。在mRNA水平和蛋白质水平上分别用实时定量PCR和Western blot进一步验证部分微阵列结果。利用DAVID数据库进行基因聚类、生物学功能以及与脂质和氧化相关的信号传导途径分析。结果LDL诱导THP-1后,细胞内大量生物膜相关基因的表达发生变化,提示脂质氧化的发生定位在生物膜上。LDL诱导3 h后细胞内脂质氧化相关基因的表达发生变化,提示脂质氧化已经开始。差异表达基因的功能注释分析发现,Toll样受体(TLR)信号通路、凋亡、内吞、细胞周期、脂质筏、脂质结合、定位、转运、细胞黏附、金属离子稳态、氧化还原等生物学通路得到不同程度的富集。天然LDL诱导THP-1不同时间点炎症因子的mRNA以及蛋白水平的表达均受到了抑制,如肿瘤坏死因子α、白细胞介素33、c-FOS等基因的表达随着LDL孵育时间的延长,其表达量逐渐降低。结论本研究提示,天然LDL的氧化可能与TLR4-TLR10-CD36的识别和炎症信号转导有关。
- 刘艳红王京伟武军驻
- 关键词：低密度脂蛋白单核细胞CDNA阵列
- 不同低密度脂蛋白氧化模型中维生素E的抗氧化效率差异
- 2014年
- 目的探讨维生素E(VE)在不同低密度脂蛋白(LDL)氧化模型中抗氧化效率的差异,并揭示VE在体外抗氧化效率不高的可能原因。方法分别建立LDL主动氧化模型和被动氧化模型,观察LDL与VE共刺激0、12h以及脂多糖(LPS)与VE共刺激0、3 h后细胞内人α防御素(HNP-1)蛋白及其mRNA水平的表达变化,再通过检测羟基化蛋白(PCO)、丙二醛(MDA)来判断VE是否干扰模型的建立。再将两种氧化模型分别设立氧化模型建立前、后加入VE以及VE(-)组,最后检测不同时间点加入VE后MDA、PCO的变化以分析VE在不同模型中的抗氧化效率差异,并观察细胞内氧自由基水平的波动以判断差异产生的可能原因。结果 (1)氧化模型中HNP-1mRNA及其蛋白水平的表达均升高,MDA和PCO的生成量也显著升高(P<0.05)。(2)主动氧化模型中不同时间点加入VE后PCO生成量无明显差异(P>0.05);被动氧化前加VE组氧化产物生成量明显低于被动氧化后加VE组(P<0.05)。不同氧化模型的MDA、PCO生成量在氧化前加VE组和氧化后加VE组降低,且被动氧化模型中下降幅度更加明显,而VE(-)组含量变化趋势相同。(3)不同氧化模型中加入VE,均能够显著提高超氧化物歧化酶(SOD)活性;能够降低自由基水平,且在被动氧化前加VE组自由基水平降低更明显(P>0.05)。结论 VE的抗氧化效率在被动氧化模型中优于主动氧化模型,与VE的加入时间、胞内自由基水平相关。
- 周莉娜吴露许程洁项明伟宋健武军驻
- 关键词：低密度脂蛋白脂多糖氧自由基超氧化物歧化酶
- 低密度脂蛋白诱导巨噬细胞Raw264.7脂质筏的聚集被引量：1
- 2017年
- 目的:探究低密度脂蛋白(LDL)与脂质筏之间的关系。方法:运用荧光漂白恢复技术(FRAP),对LDL刺激的细胞和未经LDL刺激的细胞进行观测;采用密度梯度离心的方法分离脂质筏,对各层中胆固醇含量进行测定,通过Western Blot对脂质筏标志性蛋白flotillin-1,caveolin-1进行分析;β-环糊精孵育后,扫描电子显微镜观测细胞形态。结果:经LDL刺激的Raw264.7细胞表现出荧光漂白恢复时间延长;脂质筏区的胆固醇含量增多,脂质筏区标志性蛋白flotillin-1,caveolin-1增加;β-环糊精孵育后细胞形态发生改变,细胞胆固醇含量降低。结论:LDL能诱导细胞膜上脂质筏的聚集。
- 赵瑾超宋健常旦琪熊宇迪邱骁武军驻
- 关键词：低密度脂蛋白
- FABP5促进RAW264.7细胞氧化LDL的初步研究被引量：1
- 2018年
- 目的:探究RAW264.7细胞中脂肪酸结合蛋白5(FABP5),磷脂酶A2(PLA2),不饱和脂肪酸(UFAs)在低密度脂蛋白(LDL)氧化中的作用。方法:培养RAW264.7细胞,利用UFAs中的不同浓度的油酸(OA)、亚油酸(ALA)、花生四烯酸(AA)刺激后利用Western Blot检测细胞FABP5蛋白质水平;用LDL刺激RAW264.7细胞不同时间,分别用PLA2总活性分光光度法定量检测试剂盒测定细胞内PLA2活性变化,Real-time PCR及Western Blot测定FABP5基因的表达;LDL刺激细胞后分别测定脂质筏和非脂质筏FABP5蛋白质水平,探究FABP5的转位。结果:不同浓度的OA,ALA,AA长时间刺激RAW264.7细胞后,FABP5的蛋白表达量出现不同的变化;LDL短时间刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7后,细胞内PLA2活性升高;LDL刺激RAW264.7细胞较长时间后,FABP5的mRNA和蛋白质水平均较对照组上升;提取脂质筏后发现,LDL刺激15min的巨噬细胞的脂筏中FABP5水平较对照组的升高,而非脂筏部分则出现相反的结果。结论:推测LDL刺激会激活PLA2,而PLA2水解甘油磷脂产生UFAs,这些UFAs招募并结合FABP5,激发氧化应激通路,促进LDL的氧化。
- 王贵玲刘南赵瑾超武军驻
- 关键词：磷脂酶A2脂筏低密度脂蛋白氧化
- 泛素结合结构域与泛素化信号的识别被引量：1
- 2015年
- 泛素化（Ubiquitylation，UB）是目前最为复杂最为多元的翻译后修饰，几乎参与胞内所有的生物学过程。其通过改变底物的分子景观（landscape）、三维结构、位置、活性、影响底物蛋白与其他蛋白的相互作用等方法，从时间和空间上调节底物所参与的生物学过程。而泛素化底物功能的发挥依赖于特异性的泛素结合结构域（Ubiquitin binding domains， UBDs）。UBDs 的表面功能基团特异性识别具有不同修饰类型的泛素化底物，并决定其功能的特异性。已知的20多种UBDs 超家族对泛素化信号网络的有序调节是人们开启泛素化网络的一把钥匙，同时了解 UBD-ubiquitin 的特异性识别是认识泛素化蛋白质组学“ubiquitome”的基础。
- 王京伟
- 关键词：泛素
