山西省回国留学人员科研经费资助项目(20097)
- 作品数：5 被引量：7H指数：1
- 相关作者：杨林花陈剑芳张耀方秦秀玉刘秀娥更多>>
- 相关机构：山西医科大学第二医院山西大学更多>>
- 发文基金：山西省回国留学人员科研经费资助项目卫生部卫生公益性行业科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 凝血因子Ⅸ无义突变真核表达载体的构建及其在COS-7细胞的表达被引量：1
- 2010年
- 本研究以含有fⅨ cDNA的pcDNA3.1质粒为模板构建4种包含不同类型无义突变的fⅨ真核表达载体并进行鉴定,实现其在COS-7细胞中的表达。采用以PCR为基础的定点突变法体外构建fⅨ基因无义突变体,并通过DNA序列分析进一步鉴定证实;应用脂质体转化技术将野生型、突变型fⅨ表达载体分别瞬时转染COS-7细胞,采用实时定量PCR鉴定fⅨ mRNA在各组的相对表达水平。结果表明,4个突变型质粒除相应位点的无义突变外,未见其它突变,提示无义突变载体构建成功。实时定量PCR鉴定表明,各突变组真核表达载体已成功转染COS-7细胞株并能转录为mRNA。结论:采用以PCR为基础的定点突变法可在体外构建fⅨ真核表达载体,并可在COS-7细胞中表达,其转录过程中不引发mRNA降解,这为进一步研究无义突变引起FⅨ功能丧失及表达量降低的机制和治疗研究提供了物质基础。
- 聂欣杨林花柴宝峰申泉张媛张耀方陈剑芳
- 关键词：凝血因子IX真核表达载体血友病B
- 血友病A患者内含子22和内含子1倒位的检测及其意义被引量：1
- 2012年
- 目的:通过检测血友病A患者凝血因子Ⅷ基因内含子22、内含子1倒位的发生率,改进并完善血友病患者内含子22倒位、1倒位的实验室检测方法,并探讨其与FⅧ抑制物产生的相关性。方法:选取130例经一期法检测FⅧ:C确诊的血友病A患者,采用Bethesda方法进行FⅧ抑制物检测。采用双管多重PCR扩增技术进行内含子1倒位检测,采用长距离PCR技术进行内含子22倒位检测。结果:130例血友病A患者中发生1倒位2例(1.5%),2例均为重型血友病A患者,占91例重型血友病A患者的2.2%。71例HA患者内含子22倒位阳性患者18例(23.9%),其中34例重型血友病A患者中22倒位阳性16例,占重型血友病A的47.1%。结论:FⅧ基因内含子倒位检测方法简便、易操作,适合临床开展先证者筛查,对于HA患者倒位基因携带者及家系成员调查具有重要的意义。
- 秦秀玉杨林花刘秀娥赵华张睿娟梁弘正陈剑芳
- 关键词：血友病A
- 无义突变在血友病的研究进展被引量：4
- 2010年
- 张耀方杨林花
- 关键词：血友病无义突变基因诊断基因治疗
- 人类白细胞抗原-DQA1区基因多态性与血友病A患者凝血因子Ⅷ抑制物的相关性研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨人类白细胞抗原(HLA)-DQA1区基因多态性与血友病A患者凝血因子Ⅷ(FⅧ)抑制物发生的相关性。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物技术(PCR-SSP),对130例HA患者和90名健康对照者的HLA-DQA1区基因多态性进行检测。采用Bethesda法检测HA患者FⅧ抑制物活性。结果 130例HA患者中,检出6例FⅧ抑制物阳性患者(全部为重型),占重型患者的6.8%;对所检测FⅧ抑制物阳性患者HLA-DQA1区的各等位基因,占全部HA患者的等位基因阳性率及其在重型HA患者的等位基因阳性率作比较,差异无统计学意义(P值均>0.05)。结论尚不能证明该区各等位基因与抑制物发生具有相关性。
- 梁弘正杨林花刘秀娥张睿娟赵华秦秀玉陈剑芳
- 关键词：血友病A基因多态性
- 翻译通读药物及其在血友病治疗中的作用
- 2010年
- 无义突变是人类遗传性疾病的重要病因.翻译通读治疗通过促进阅读框中无义密码子通读而产生全长蛋白质,这为治疗包括血友病在内的多种无义突变引起的遗传性疾病带来了希望.本文将对基因翻译通读治疗药物的作用机制及其在血友病治疗中的作用进行综述.
- 聂欣杨林花
- 关键词：无义突变血友病
