国家自然科学基金(30973204) 作品数:12 被引量:140 H指数:6 相关作者: 杨孜 王伽略 王晓晔 孙晓乐 武淑英 更多>> 相关机构: 北京大学第三医院 首都医科大学附属北京世纪坛医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
子痫前期对滋养细胞脂肪酸氧化的影响及其与p38MAPK信号通路的相关性 被引量:2 2013年 目的 探讨重度子痫前期对胎盘滋养细胞线粒体长链脂肪酸氧化酶——长链三羟基酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)表达的影响及其与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的相关性.方法 体外培养胎盘滋养细胞,分别用早发型重度子痫前期、晚发型重度子痫前期、重度子痫前期伴发HELLP综合征及正常妊娠妇女的血清刺激胎盘滋养细胞(分别命名为早发组、晚发组、HELLP组、正常对照组),每组再分别加入DMEM/F12培养基、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶抑制剂(NADPH-Ⅰ)和p38MAPK抑制剂(p38-Ⅰ)处理细胞.采用实时荧光定量PCR技术和蛋白印迹法检测各组滋养细胞LCHAD mRNA和蛋白的表达.结果 (1)LCHAD mRNA的表达:正常对照组+培养基、早发组+培养基、早发组+ NADPH-Ⅰ、早发组+p38-Ⅰ、晚发组+培养基、晚发组+NADPH-Ⅰ、晚发组+p38-Ⅰ、HELLP组+培养基、HELLP组+NADPH-Ⅰ、HELLP组+p38-Ⅰ滋养细胞LCHAD mRNA的相对表达量分别为1.00±0.03、0.14±0.08、0.95±0.20、1.43±1.02、0.37±0.18、1.51 ±0.36、1.60±0.31、0.10 ±0.04、0.49 ±0.10、0.44±0.21.早发组+培养基、晚发组+培养基、HELLP组+培养基与正常对照组+培养基比较,LCHAD mRNA的相对表达量均明显降低,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与正常对照组比较,晚发组+ NADPH-Ⅰ、晚发组+p38-Ⅰ LCHADmRNA的相对表达量均有明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),而HELLP组LCHAD mRNA的相对表达量均有明显降低,差异也有统计学意义(P<0.05).(2) LCHAD蛋白的表达:正常对照组+培养基、早发组+培养基、早发组+ NADPH-Ⅰ、早发组+p38-Ⅰ、晚发组+培养基、晚发组+NADPH-Ⅰ、晚发组+ p38-Ⅰ、HELLP组+培养基、HELLP组+NADPH-Ⅰ、HELLP组+p38-Ⅰ组LCHAD蛋白的相对表达量分别为19.4±2.2、10.7±1.1、17.9±3.3、19.1 ±2.9、16.4±2 孙晓乐 杨孜 王威 王晓晔 王伽略 武淑英关键词:滋养层 NADPH P38丝裂原活化蛋白激酶类 脂肪酸氧化 早发型子痫前期临床与基础研究并进相得益彰 被引量:23 2010年 杨孜关键词:重度子痫前期 早发型 妊娠中期 游离脂肪酸对滋养细胞线粒体长链脂肪酸氧化酶表达的影响 被引量:6 2012年 目的探讨不同链长游离脂肪酸对人滋养细胞线粒体脂肪酸β氧化循环中长链三羟基酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)基因和蛋白表达变化的影响。方法体外无血清培养人绒毛滋养细胞,将细胞分为五组,每组用不同链长脂肪酸孵育细胞,分别为无游离脂肪酸(F-FFA)、短链脂肪酸(SC—FFA)、中链脂肪酸(MC—FFA)、长链脂肪酸(LC—FFA)、极长链脂肪酸(VLC-FFA)。采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测各组LCHAD基因和蛋白的表达变化。结果与F-FFA、SC—FFA、MC—FFA3组比较,LC—FFA组LCHAD基因和蛋白明显降低(P〈0.05),VLC—FFA组LCHAD基因明显升高(P〈0.05),而蛋白表达差异无统计学意义(P〉0.05)。F-FFA、SC—FFA、MC—FFA3组之间LCHAD基因和蛋白表达差异无统计学意义(P〉0.05)。与LC—FFA组比较,VLC-FFA组LCHAD基因和蛋白明显升高(P〈0.05)。结论游离脂肪酸对人滋养细胞线粒体脂肪酸B氧化循环LCHAD的基因蛋白表达变化存在影响;LC—FFA刺激下的胎盘滋养细胞中存在LC-FFA线粒体β-氧化代谢障碍。VLC-FFA与脂肪酸β-氧化代谢存在一定的相关性,其相互作用机制还有待进一步研究。短链、中链脂肪酸未显示对线粒体脂肪酸β-氧化代谢的影响。 孙晓乐 杨孜 王晓晔 王伽略 武淑英关键词:游离脂肪酸 脂肪酸氧化 滋养细胞 重度子痫前期与长链脂肪酸氧化酶基因蛋白表达异常的相关性 被引量:11 2011年 目的探讨重度子痫前期与参与长链脂肪酸氧化的长链三羟基酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)mRNA和蛋白表达异常的相关性。方法通过体外无血清培养胎盘滋养细胞,然后分为4组,分别用正常妊娠孕妇(NP组)、早发型重度子痫前期(E—PE组)、晚发型重度子痫前期(L—PE组)、重度子痫前期伴发HELLP综合征(HELLP组)患者血清刺激胎盘滋养细胞。采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测各组LCHAD基因和蛋白的表达。结果(1)LCHAD的mRNA表达变化:NP、E—PE、L-PE及HELLP组LCHADmRNA相对表达量分别为1.00±0.00、3.08±0.22、1.62±0.23、3.36±0.18。与NP组比较,E—PE、L-PE及HELLP组LCHAD的mRNA相对表达量均明显降低(P〈0.05);与L.PE组相比较,E.PE、HELLP组LCHAD的mRNA相对表达量也有明显降低(P〈0.05);而E—PE与HELLP组两组间LCHAD的mRNA表达差异无统计学意义(P〉0.05)。(2)LCHAD蛋白表达变化:NP、E—PE、L—PE及HELLP组LCHAD/β-肌动蛋白比率分别为4.94±0.02、2.93±0.13、4.14±0.06、2.80±0.09。与NP组比较,E-PE、L—PE及HELLP组LCHAD蛋白表达均明显降低(P〈0.05);E.PE、HELLP组LCHAD蛋白表达比L-PE组都有明显降低,差异有统计学意义(P〈0.05);而E—PE与HELLP组两组间差异无统计学意义(P〉0.05)。结论重度子痫前期对胎盘滋养细胞中LCHAD的基因蛋白表达异常存在一定的影响,其中以早发型重度子痫前期和HELLP综合征的影响更为明显。脂肪酸氧化与子痫前期发生发展的相互影响和作用机制值得深入探讨。 孙晓乐 杨孜 王伽略 孙敏娜 武淑英 王晓晔关键词:先兆子痫 脂肪酸氧化 Effect of high-fat diet on liver and placenta fatty infiltration in early onset preeclampsia-like mouse model 被引量:5 2012年 Background Preeclampsia, especially early onset of preeclampsia (PE), is a common and serious disorder with high maternal and perinatal morbidity and mortality. Dietary factor is one of the most important factors which may affect the occurrence and development of the disease. The aim of this study is to investigate the effects of dietary factors on pathological changes of liver and placenta in preeclampsia-like mouse model by establishing the model at multiple stages of gestation. Methods Wild-type (WT) mice were injected subcutaneously with nitric oxide synthase (NOS) inhibitor L-arginine methyl ester (L-NAME, 50 mg·kg^-1·d^-1) to establish PE-like model (L-NAME group) at early-, mid-, and late- pregnant periods respectively; simultaneously, the control mice were injected with normal saline (NS group). All the groups were divided into subgroups, standard chow group (SC), and high-fat diet group (HF). ApoE^-/- pregnant mice served as a control group. Systolic blood pressure (SBP), urine protein, and histopathologic changes of placenta and liver in all groups were observed and statistically analyzed. Results In WT and apoE^-/- L-NAME subgroups, blood pressure and urine protein were significantly higher than those in all the gestational age matched NS groups (P 〈0.05). Compared to other groups, remarkable liver fatty infiltration and lipid storage in placenta were found in early- and mid-L-NAME subgroups in apoE^-/- mice (P 〈0.05), especially in the early- and mid-HF+L-NAME subgroups in apoE^-/- mice (P 〈0.05). More lipid storage droplets both in liver and placenta were found in ApoE^-/- mice than that of WT groups (P 〈0.05). Morphology histopathologic examination of placentas showed varying degrees of fibrinoid necrosis and villous interstitial edema in early- and mid-L-NAME both in HF and SC of apoE^-/- and WT subgroups compared to NS controls (P 〈0.05). But there was no significant difference between HF and SC subgroups (P 〉0.05), and no SUN Min-na YANG Zi MA Rui-qiong关键词:PLACENTA LIVER 不同链长脂肪酸对胎盘滋养细胞氧化应激和炎症反应的影响 被引量:2 2012年 目的探讨不同链长脂肪酸对胎盘滋养细胞氧化应激和炎症反应的影响。方法体外培养胎盘滋养细胞,将细胞分为5组,每组加入不同链长的脂肪酸孵育细胞,即分别为无游离脂肪酸(FFA—free,FFFA)组、短链脂肪酸(SC—FFA)组、中链脂肪酸(MC—FFA)组、长链脂肪酸(LC—FFA)组、极长链脂肪酸(VLC—FFA)组。每组再分别以DMEM培养基、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂(NADPH—I)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂(p38MAPK—I)孵育细胞。采用实时荧光定量PCR技术和蛋白印迹法检测各组细胞p38MAPK和环氧合酶2(COX-2)mRNA和蛋白的表达变化。结果(1)LC—FFA组+DMEM、VLC—FFA组+DMEM、LC—FFA组+NADPH—I、LC—FFA组+p38MAPK—I、VLC—FFA组+NADPH—I、VLC—FFA组+p38MAPK—I胎盘滋养细胞p38MAPKmRNA的表达量分别为4.56±0.28、22.65±2.40、0.87±0.06、1.02±0.15、19.87±1.93、10.22±0.75,蛋白的表达量分别为0.79±0.02、0.93±0.10、0.43±0.06、0.44±0.19、0.79±0.10、0.81±0.14。LC—FFA组+DMEM、VLC—FFA组+DMEM细胞p38MAPKmRNA和蛋白的表达量升高(P〈0.05)。与LC—FFA组+DMEM比较,LC—FFA组+NADPH-I、LC—FFA组+p38MAPK—I细胞p38MAPKmRNA和蛋白的表达量明显降低(P〈0.05)。与VLC—FFA组+DMEM比较,VLC—FFA组+NADPH—I细胞p38MAPKmRNA和蛋向的表达量差异无统计学意义(P〉0.05);VLC—FFA组+p38MAPK—I细胞p38MAPKmRNA的表达量明显降低(P〈0.05),而蛋白的表达量无差异(P〉0.05)。(2)LC—FFA组+DMEM、VLC—FFA组+DMEM、LC—FFA组+NADPH—I、LC—FFA组+p38MAPK—I、VLC—FFA组+NADPH—I、VLC—FFA组+p38MAPK—I细胞COX-2mRNA的表达量分别为3.97±0.03、39.08±0.63、0.99±0.13、0.98±0.18、20.93±3.70、13.46±2.31,蛋白的表达量分别为1� 孙晓乐 杨孜 王晓晔 王伽略关键词:滋养层 脂肪酸类 非酯化 氧化性应激 早发型子痫前期样改变中脂肪酸氧化与氧化应激的关系 被引量:1 2011年 目的通过建立不同妊娠阶段子痫前期样鼠模型以及饮食改变,研究早发型子痫前期样改变中脂肪酸氧化与氧化应激间的相互关系。方法对C57BL/6J野生型(WT)孕鼠皮下注射左硝基精氨酸甲酯建立早中晚不同孕期时段发病的子痫前期样模型(L—NAME组),设立相应血压正常生理盐水组(Ns组)。将以上各组再分两个亚组:高脂饲料组(HF组)及标准饲料组(SC组),每组6只鼠。分别于孕1d起饲喂。同法选取apoE。孕鼠作为基因型对照。进行动物模型鉴定;于孕中、晚期进行标本采集。采用RT-PCR、Western Blot技术检测胎盘组织中长链三羟基酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)、p47phox、p38MAPK、COX-2基因及蛋白水平变化。结果早、中期WT、apoE^-/- -L—NAME组胎盘内LCHAD基因及蛋白表达明显降低(P〈0.05);早、中期WT—HF+L—NAME组及apoE-/^- -HF+L—NAME组比相应SC组LCHAD基因及蛋白表达也有降低趋势。在早、中期WT及apoE-/^- -L—NAME组显示胎盘中p47phox、COX-2基因及蛋白表达水平明显升高(P〈0.05);WT、apoE^-/-孕鼠中HF+1,-NAME组的p47phox、COX-2基因及蛋白表达水平比相应SC+L—NAME组高(P〈0.05);WT各组与相应apoE^-/-各组间进行基因型比较,apoE^-/-组的p47phox、COX-2的基因及蛋白水平表达较高(P〈0.05)。p38MAPK在各组间表达差异无统计学意义(P〉0.05)。LCHAD与1M7phox、COX-2的基因及蛋白水平表达呈负相关性(P〈0.05);p47phox与COX-2的基因及蛋白水平呈显著正相关性(P〈0.05)。结论不良因素诱发的孕鼠子痫前期样改变,存在脂肪酸氧化代谢关键酶LCHAD障碍,并且发病越早,代谢障碍越明显;WT、apoE^-/-早中期子痫前期样改变孕鼠均显示存在一定的氧化应激与炎症损伤;给予高脂饮食可以加重已发生子痫前期样改变孕鼠1M7phox及COX-2的表达,apoE^-/-孕鼠氧化应激程度� 孙敏娜 杨孜 马瑞琼关键词:子痫前期 氧化应激 妊娠期高血压疾病临床“对应性”问题 被引量:16 2012年 当前,国内外相关各学科疾病的临床指南颁布得越来越多。但是,不论是指南的制定者还是实践者,都已注意到指南的时代局限性,尤其是在医疗实践中,临床指南尚不能解决所有的临床问题,也取代不了临床判断和临床具体操作步骤。临床发现子痫前期可以向前追溯百年以上,但对于早发型子痫前期的认识仅可以向前追溯至20多年前。 杨孜关键词:妊娠期高血压疾病 早发型子痫前期 风险评估 游离脂肪酸对滋养细胞线粒体脂肪酸氧化功能的影响及其与p38MAPK信号通路的相关性 被引量:3 2013年 目的探讨不同链长游离脂肪酸对胎盘滋养细胞中线粒体长链脂肪酸氧化功能影响及其与p38MAPK信号通路的相关性。方法分别以无游离脂肪酸和短、中、长、极长链脂肪酸孵育胎盘滋养细胞(F.FFA、SC-FFA、MC-FFA、LC-FFA、VLC-FFA组)。再分别以DMEM/F12培养基、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH)抑制剂和p38MAPK抑制剂孵育细胞。采用荧光实时定量PCR(ReahimePCR)和蛋白印迹法(Westernblot)检测各组LCHAD基因和蛋白表达变化。结果(1)LCHAD的mRNA表达变化:F.FFA+DMED、SC.FFA+DMEM、MC-FFA+DMEM、LC-FFA+DMEM、LC-FFA+NADPH-I、LC-FFA+p38MAPK-I、VLC-FFA+DMEM、VLC-FFA+NADPH-I、VLC-FFA+p38MAPK-I组LCHADmRNA的△ct值为4.57±0.12、4.36±0.09、4.55±0.10、6.84±0.42、4.45±0.24、5.08±0.36、2.23±0.15、3.90±0.32、3.81±0.40。与F-FFA各组相比较,LC-FFA+DMEM/p38MAPK-I组LCHADmRNA相对表达量明显降低,差异有统计学意义(P〈0.05),而VLC各组均有明显升高,差异有统计学意义(P〈0.05);与LC-FFA+DMEM组相比较,LC-FFA+NADPH-I/p38MAPK-I组LCHADmRNA相对表达量明显升高,差异有统计学意义(P〈0.05);与VLC-FFA+DMEM组相比较,VLC-FFA+NADPH.I/p38MAPK.I组中LCHADmRNA相对表达量明显降低,差异有统计学意义(P〈0.05)。(2)LCHAD蛋白表达变化:F-FFA+DMED、SC-FFA+D1VIE/VI、Mc-FFA+DMEM、LC-FFA+DMEM、LC-FFA+NADPH-I、LC-FFA+p38MAPK-I、VLC-FFA+DMEM、VLC-FFA+NADPH-I、VLC-FFA’p38MAPK-I组LCHAD/B-肌动蛋白比率分别为23.6±13.0、21.2±10.2、19.7±1.9、10.6±2.6、14.0±1.8、14.0±2.8、29.3±1.9、35.8±3.2、35.2±4.5。与F-FFA各组比较,LC-FFA组LCHAD蛋白相对表达量降低,差异有统计学意义(P〈0.05),VLC-FFA+NADPH-I/p38MAPK-I组LCHAD蛋白相对表达量升高,差异有统计学意义(P〈0.05) 孙晓乐 杨孜 王伽略 王威 王晓晔 武淑英关键词:脂肪酸 滋养细胞 NADPH P38MAPK 优质护理服务模式指导下的护理干预措施对凶险性前置胎盘患者的影响 被引量:59 2013年 目的探究与分析优质护理服务模式指导下的护理干预措施对凶险性前置胎盘患者的影响。方法选取2011年10月~2012年10月收治的凶险性前置胎盘患者26例,并随机分为A、B组,每组各13例。A组患者给予优质护理服务模式指导下的护理干预的方法,B组患者给予常规护理方法。比较两组患者护理后凶险性前置胎盘恢复情况、并发症及胎儿情况。结果护理后,A组凶险性前置胎盘患者听说能力、行走能力正常的人数及比例比B组凶险性前置胎盘患者高(P<0.05)。B组凶险性前置胎盘患者护理后并发贫血、血小板减少以及胎儿发生贫血、血小板减少人数及比例比A组凶险性前置胎盘患者高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论经过凶险性前置胎盘介入治疗的患者,如果对其进行优质护理服务模式指导下的护理干预治疗效果显著,值得在临床上推广运用。 张丽 杨孜关键词:护理服务 护理干预