公益性行业(农业)科研专项(200903019) 作品数:15 被引量:63 H指数:5 相关作者: 刘庆忠 魏海蓉 孙庆田 徐丽 宗晓娟 更多>> 相关机构: 山东省果树研究所 烟台市农业科学研究院 大连市农业科学研究院 更多>> 发文基金: 公益性行业(农业)科研专项 山东省农业良种工程项目 引进国际先进农业科技计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
李矮缩病毒外壳蛋白基因克隆及原核表达研究 被引量:5 2012年 为制备李矮缩病毒(prunusdwarfvims,PDv)抗血清,克隆PDV外壳蛋O(ce)基因,构建原核表达载体,优化蛋白表达条件。以阳性感病甜樱桃叶片为试验材料,提取总RNA,根据PDVCP基因(L28145.1)设计特异引物,RT-PCR方法扩增,克隆、测序,构建原核表达载体pET30a-PDVCP,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株表达。PDV凹基因(GenBank登录号:JF333587.1)全长657bp,编码217个氨基酸。与GenBank其他PDV分离物CP基因核苷酸序列的同源性为89.2%-93.9%,推导的氨基酸序列同源性为97%-99%。根据完整CP基因核苷酸序列构建系统进化树显示:12个PDV分离物可分为3组,泰安分离物与巴西、土耳其等分离物属于I组。成功构建原核表达载体pET30a.PDVCP,并在体外条件下诱导表达出融合蛋白。转pET30a.如Ⅵ≯载体的大肠杆菌BL21(DE3)菌株表达分子量约24kDa的重组蛋白。该重组蛋白在30℃,1.0mmol/LIPTG、诱导4h表达量最大。 陈立伟 宗晓娟 王文文 王甲威 魏海蓉 徐丽 严雪瑞 刘庆忠关键词:外壳蛋白 基因克隆 原核表达 大果中熟甜樱桃新品种‘福星’的选育 被引量:3 2014年 ‘福星’是以‘萨米脱’、‘斯帕克里’为亲本杂交选育的大果型、中熟优良甜樱桃新品种。果实肾形,果皮浓红色,平均单果质量11.8 g,可溶性固形物含量16.9%,可食率94.7%,果肉硬脆,甜酸,鲜食品质上,抗性强,耐贮运,早实丰产性好,综合性状优良。在烟台地区成熟期6月10日左右,熟期同‘萨米脱’。 张福兴 刘美英 孙庆田 张序 李淑平 李延菊 田长平 姜学玲关键词:甜樱桃 大果 SYBR Green I实时荧光RT-PCR技术在甜樱桃病毒定量分析中的应用 为了说明SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR(Real-timequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction)技术在甜樱桃病毒粒子定量分析中的应用前景... 宗晓娟 王文文 王甲威 魏海蓉 徐丽 陈新 严雪瑞 刘庆忠关键词:李属坏死环斑病毒 实时定量RT-PCR 文献传递 核果类果树遗传转化及检测技术研究进展 2013年 综述了近年来国内外常见核果类果树遗传转化的研究进展,概述了目前果树遗传转化的主要方法,阐述了核果类果树遗传转化植株的主要鉴定方法,指出了当前研究中存在的一些问题,探讨了转基因研究未来的发展方向。 王文文 孟艳玲 宗晓娟 王甲威 魏海蓉 崔海金 刘庆忠关键词:核果类果树 甜樱桃流胶病研究综述 被引量:6 2015年 樱桃流胶病是危害甜樱桃的三大病害之一,在樱桃产区普遍发生,一般园片发病株率为10%~30%,严重的园片达50%以上.该病主要危害枝干,引起流胶,轻者树势衰弱,重者死枝、死树,成为制约樱桃产业发展的主要障碍因素. 张福兴 董向丽 潘凤荣 孙庆田关键词:甜樱桃 流胶病 发病株率 病害 产区 枝干 山东地区樱桃绿环斑驳病毒(CGRMV)的RT-PCR检测及外壳蛋白基因的克隆 被引量:3 2012年 为调查我省甜樱桃感染樱桃绿环斑驳病毒(Cherry Green Ring Mottle Virus,CGRMV)情况,本研究以甜樱桃(Prunus avium L.)品种"红灯"叶片总RNA为模板,根据CGRMV基因组序列设计特异引物,对山东地区37份甜樱桃"红灯"样品进行RT-PCR检测,共检测出19份阳性样品。利用CGRMV外壳蛋白基因序列引物,从阳性植物样本中分离到约800 bp的目的片段,克隆测序,序列分析显示该片段全长807 bp,编码268个氨基酸,与GenBank中已登录的CGRMV分离物的外壳蛋白基因序列一致性为87%~97%,氨基酸序列相似性为95%~99%。该结果表明山东地区甜樱桃生产园中感染CGRMV的病例较为普遍。 王文文 宗晓娟 陈立伟 王甲威 魏海蓉 徐丽 孟艳玲 严雪瑞 刘庆忠关键词:甜樱桃 RT-PCR检测 外壳蛋白 基因克隆 剖析樱桃三大病害——根癌、根颈腐烂、流胶 被引量:5 2017年 自古就有“樱桃好吃树难栽”的说法.此说法流传甚广.与樱桃生产中的三大病害——根癌、根颈腐烂、流胶密不可分,这三种病害中。病因最明确的是樱桃根癌病.是由土壤中的根癌土壤杆菌引起;根颈腐烂病,烟台市农科院大樱桃所目前分离到5种真菌:樱桃流胶病,不同的学者分离到的病菌不同,真菌、细菌并存,生理、病理交织在一起。本文参考国内最新研究进展.结合自己多年试验研究情况.对三大病害进行剖析。 李淑平 张鹏刚 李晶 孙庆田 张福兴关键词:根癌土壤杆菌 根颈腐烂病 病害 桃生产 拟南芥转化体筛选中Basta喷洒时期和浓度试验 被引量:3 2013年 为了更加方便有效地利用Basta来筛选带草铵磷(PPT)抗性Bar基因的转基因拟南芥,对不同时期喷洒不同浓度Basta的效果进行了研究。结果表明:拟南芥转化体刚长出2片真叶时对Basta比较敏感,此时开始喷施效果比较好;PPT含量为13.5%的情况下,稀释2 000~4 000倍喷施效果好,此时既可有效筛选出阳性苗,又不会抑制阳性苗的生长;第一次喷施后6天左右移栽阳性苗较好,此时可以明显区分出阳性苗,且移栽后缓苗快、长势好。 张庆霞 魏海蓉 陈新 徐丽 刘庆忠关键词:拟南芥 喷洒 甜樱桃的秋季管理 2013年 秋季正值甜樱桃根系生长高峰期,也是甜樱桃树体积累贮藏营养的关键时期。因此,秋季管好甜樱桃对树体安全越冬及翌年的产量和果实品质都很重要。1深翻改土深翻扩穴的时期最好在9月下旬至10月中旬结合秋施基肥进行。此时深翻,气温仍较高,有利于有机肥的分解;根系处于活动期,断根容易愈合,形成新根数量多,能增强对养分和水分的吸收能力;有利于冬季积蓄雨雪,增加土壤含水量;深翻还可以消灭部分越冬害虫。 张序 颜廷永 魏传禄关键词:秋季管理 甜樱桃 深翻改土 土壤含水量 贮藏营养 安全越冬 我国甜樱桃种植区划研究 被引量:26 2016年 为保证我国甜樱桃产业健康有序发展,结合国家公益性行业(农业)科研专项"樱桃产业主要障碍因素攻关研究"(200903019)的实施,项目组开展了全国甜樱桃种植区划研究,提出了适应我国气候特点的甜樱桃栽培区划指标体系,形成了全国甜樱桃区划意见,旨在为产业后续发展、政府决策提供理论依据。1区划指标的依据根据我国农业生态条件对甜樱桃生长、 张福兴 孙庆田 孙玉刚 刘庆忠 张开春 潘凤荣 蔡宇良 李明关键词:种植区划 甜樱桃 栽培区划 生态条件 区划指标