国家教育部博士点基金(20111302130001) 作品数:23 被引量:45 H指数:4 相关作者: 王冬梅 侯春燕 韩胜芳 刘娜 陈琰 更多>> 相关机构: 河北农业大学 北京诺禾致源科技股份有限公司 河北省环保产品质量监督检验院 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 河北省应用基础研究计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 金属学及工艺 更多>>
小麦悬浮细胞应答激发子刺激的过敏性反应中Ca^(2+)和NO的动态变化及其相互作用 被引量:3 2015年 以感染叶锈菌的小麦(Triticum aestivum)叶片细胞间隙液IWF-260作为激发子,刺激小麦品种洛夫林10和郑州5389的悬浮细胞,探讨由激发子引发悬浮细胞过敏性反应中Ca2+和NO的变化及相互作用。以荧光分子探针Fluo-3AM和DAF-FM DA分别对细胞内Ca2+和NO进行标记,利用激光共聚焦扫描显微镜对其动态变化进行实时监测,通过药物学实验对Ca2+和NO的产生机制及其可能存在的相互关系进行探讨。结果表明,2个小麦品种悬浮细胞的[Ca2+]cyt水平对激发子刺激的反应表现出明显的差异,对叶锈菌小种表现不亲和的洛夫林10悬浮细胞分别在激发子刺激后330秒和700秒出现2个钙峰;而对该小种表现亲和的郑州5389悬浮细胞在激发子刺激后[Ca2+]cyt水平稍有波动但变化不明显。药物学实验证明,[Ca2+]cyt的升高依赖于胞外钙离子内流,钙离子与激发子刺激诱发的过敏性防卫反应紧密相关。同样,在激发子刺激后,洛夫林10悬浮细胞出现1个NO峰,而郑州5389悬浮细胞胞质NO变化不明显。药物学实验初步证明,NO的产生与胞外钙离子内流密切相关。由此推测,在小麦悬浮细胞应答激发子刺激诱发的过敏性反应中,NO可能在钙的下游发挥作用。 乔妹 孙嘉炜 陈琰 韩胜芳 侯春燕 刘刚 王冬梅关键词:CA2+ 激发子 NO 悬浮细胞 小麦与叶锈菌互作过程中H2O2的时空分布特征 本试验以小麦(Triticum aestivum L.)品种洛夫林10(L10)为材料,与叶锈菌(puccinia triticina)生理小种165和260分别组成亲和组合和不亲和组合,用DAB、CeCl3特异性标记H... 王鑫 刘娜 石诚 刘刚 陈琰 韩胜芳 侯春燕 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 H2O2 HR CECL3 文献传递 小麦与叶锈菌互作过程中Wrab17基因的功能研究 植物在遭受生物和非生物逆境胁迫时,体内会引发一系列的防卫反应。在小麦与叶锈菌的互作体系中,小麦通过产生HR-PCD抵御叶锈菌的侵袭。为了更好地探究小麦抗叶锈菌机制,对小麦抗叶锈相关防卫基因的研究就显得非常重要。Wrab1... 杨高山 王帅帅 刘鹏 张恒 韩胜芳 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 HR 文献传递 小麦单基因系TcLr19抗叶锈防卫反应的表达与叶锈菌侵染进程关系的初步研究 被引量:1 2013年 试验采用小麦单基因系TcLr19,感病对照Thacher(Tc)及叶锈菌小种366和165,利用组织化学方法,对接种后不同时间点叶锈菌在亲和和不亲和寄主上的发育情况进行观察,并对表现不同侵染型的TcLr19-叶锈菌组合中的2种防御酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(PO)的活性变化及发生过敏性死亡(HR)的细胞面积进行测定。结果表明,伴随着叶锈菌的侵染,TcLr19接种叶锈菌小种366(侵染型为0;)后PAL的活性分别在24,72 h出现高峰,PO活性在48 h达到最高峰,发生HR的细胞面积从接种后24 h逐渐增加直至96 h达到高峰;而接种叶锈菌小种165(侵染型为1)后2种酶活性变化及HR的变化和接种366具有相同趋势,但是前者的酶活性峰值低于后者,且发生HR的面积在96 h之前一直也小于后者。小麦对叶锈菌的抗性表达程度与防卫反应的表达强度呈正相关关系。 阎爱华 张立峰 张韫玮 刘猛 侯春燕 王冬梅关键词:叶锈菌 苯丙氨酸解氨酶 过氧化物酶 小麦与叶锈菌互作过程中自噬的功能及作用机制研究 自噬是一种蛋白质降解的过程,它发生在细胞遭受胁迫状态下或者生长发育的特殊时期中。当自噬被诱导产生后,会形成一种双层膜结构的自噬体包裹细胞质的成分,并运送至液泡或者溶酶体进行降解。自噬是生物长期进化所形成的一种高度保守机制... 石诚 刘刚 刘娜 张璐璐 陈琰 王冬梅关键词:自噬 小麦 叶锈菌 过敏性反应 活性氧 文献传递 TaGSO1的克隆及其在叶锈菌侵染TcLr26过程中的表达分析 被引量:1 2018年 为了挖掘新的小麦抗叶锈菌相关基因,本试验利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术从小麦抗叶锈近等基因系TcLr26中克隆得到抗病相关基因TaGSO1,对其进行生物信息学分析,并对其在小麦与叶锈菌互作过程中的转录水平表达模式进行检测。分析结果显示,该基因全长2598bp,编码866个氨基酸,其蛋白结构包含7个LRRs结构域和1个跨膜区以及1个短的细胞质结构,属于典型的LRR-RLPs受体蛋白;系统发育分析表明,TaGSO1基因与来自乌拉尔图小麦的EMS54105.1基因亲缘关系最近。RT-qPCR分析结果表明,该基因在TcLr26与叶锈菌的不亲和互作过程其表达量随接种时间延长明显升高,而在亲和组合中该基因的表达量很低,并且随着侵染时间的延长表达量几乎没有变化。外施SA发现TaGSO1的表达受SA诱导,推测该基因可能介导了SA信号传导途径。 李芳 张芳芳 顾佳 安瑞朋 张洁 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 RT-QPCR TaGAD在小麦抵抗叶锈菌侵染中的作用 被引量:3 2018年 本研究以小麦近等基因系TcLr26及其轮回亲本Thatcher(Tc)分别与叶锈菌生理小种260组成不亲和组合及亲和组合,利用RT-qPCR技术检测发现TaGAD的表达在不亲和组合接种后早期(4,8,12h)没有明显变化,从接种后16~72h伴随着HR的发生被诱导表达;而在亲和组合中TaGAD只在接种后8~12h表达有所增加;利用瞬时转化烟草,发现TaGAD定位于细胞质;利用RNAi技术沉默TaGAD基因后,与对照相比单侵染点寄主HR面积明显减少。研究结果表明,TaGAD在小麦抵抗叶锈菌侵染的HR发生中发挥着重要作用。 刘好良 李彤彤 李楠楠 侯春燕 王冬梅关键词:小麦 叶锈菌 过敏性反应 叶锈菌侵染诱导产生的小麦Wrab17蛋白的原核表达、纯化及其抗体制备 被引量:1 2015年 叶锈菌(Puccinia triticina)引起的小麦叶锈病是影响世界小麦生产的重要病害之一。研究小麦抗叶锈相关防卫蛋白的表达,对于深入研究小麦对叶锈菌的抗病机制,更好地为农业生产服务,具有重要意义。Wrab17(Wheat response to ABA)是一个冷胁迫诱导蛋白,前期工作通过构建叶锈菌侵染早期的小麦SSH文库及ESTs序列分析,筛选到Wrab17基因在不亲和组合接种后早期显著上调表达,初步表明Wrab17基因可能参与了小麦抗叶锈菌侵染过程,这是首次发现Wrab17参与抗病反应。本研究进一步利用RT-PCR技术从接种叶锈菌的小麦叶片中克隆获得了Wrab17基因的CDS区,构建了Wrab17蛋白原核表达载体,并在大肠杆菌中高效表达Wrab17蛋白。利用镍柱亲和层析方法获得了纯度较高的重组蛋白,将融合蛋白纯化后制备其兔抗血清,得到特异性较好的多克隆抗体。为进一步通过Western Blotting技术检测Wrab17在小麦被叶锈菌侵染后不同时间点表达量的变化,明确Wrab17参与小麦抵抗叶锈菌侵染的防卫反应奠定基础。 杨高山 王帅帅 张恒 韩胜芳 王冬梅关键词:叶锈菌 原核表达 蛋白纯化 基于小麦品种‘洛夫林10’的VIGS体系研究 被引量:1 2015年 为将病毒介导的基因沉默(Virus induced gene silencing,VIGS)技术应用于小麦-叶锈菌互作体系及小麦基因功能研究,本试验在优化适宜BSMV繁殖并引起发病的环境条件基础上,将病毒载体转染小麦品种‘洛夫林10’(简称L10)叶片并接种叶锈菌生理小种,发现接种病毒对叶锈菌侵染反应型没有影响,通过构建TaCAMTA4与TaATG8的BSMV-VIGS载体,将体外转录病毒转染小麦,以感染BSMV:PDS的L10作指示,在指示叶片变白后,经半定量RT-PCR检测,发现目的基因的表达量明显降低,表明用VIGS技术能够成功沉默L10中的目的基因,这一结果为进一步研究小麦与叶锈菌互作过程中小麦基因的功能及分子机制奠定了基础。 牛笑南 石诚 张路路 刘娜 侯春燕 刘刚 王冬梅关键词:小麦 在小麦和叶锈菌互作过程中TCTP的表达特征 2020年 翻译控制肿瘤蛋白是调节植物生长发育、参与植物抵抗逆境胁迫的重要调节因子。本研究以叶锈菌生理小种260与4种含有不同抗叶锈基因的近等基因系分别组成亲和程度不同的组合为对象,采用RT-qPCR和Western Blotting方法,从转录和翻译两个水平探讨TCTP在小麦与叶锈菌互作过程中的表达模式。研究结果表明,无论是转录水平还是翻译水平上,TCTP在不亲和组合中均表现为表达量显著上调,但在不同的Lr基因背景下其表达模式有所不同;而在亲和组合中并未表现出明显的变化趋势。基于TCTP mRNA和蛋白水平的结果,发现在小麦与叶锈菌互作体系中TCTP在转录水平和翻译水平均受到调控,推测其在小麦抵抗叶锈菌侵染的防卫反应中可能发挥正调控作用,这将为进一步研究TCTP的功能及其作用机制奠定了基础。 路兴通 麻楠 孙天杰 郭云杉 常亭亭 王冬梅关键词:TCTP 小麦 叶锈菌