国家自然科学基金(30460047) 作品数:13 被引量:51 H指数:6 相关作者: 孙抒 杨万山 李基俊 崔春爱 宋莲莲 更多>> 相关机构: 延边大学 通化市口腔医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部科学技术研究重点项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
蛴螬提取物诱导人肺癌A549细胞凋亡的机制研究 被引量:7 2009年 目的:观察蛴螬提取物对人肺癌A549细胞增殖的影响及其机制。方法:采用MTT法检测蛴螬提取物对人肺癌A549细胞的生长抑制率;用HE染色方法观测凋亡细胞的形态学变化;运用免疫组织化学SP法检测用药前后细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达改变。结果:用蛴螬提取物处理的人肺癌A549细胞生长抑制率明显高于对照组;施药早期细胞出现凋亡形态学变化;A549细胞经蛴螬提取物处理后CyclinD1表达均下降。结论:蛴螬提取物在体外对人肺癌A549细胞株有显著的增殖抑制作用,其机制与下调CyclinD1的表达有关。 崔春爱 李莉 杨万山 孙抒关键词:蛴螬 A549 CYELIND1 凋亡 蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响 被引量:12 2006年 目的研究蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法MTT法检测蛴螬石油醚提取物对体外培养的HeLa细胞株增殖抑制作用及细胞毒活性;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdT-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测细胞凋亡;通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡相关基因产物Bcl-2、Bax蛋白与凋亡相关蛋白caspase-8和caspase-3的表达情况。结果蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01)。蛴螬石油醚提取物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多;凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性。蛴螬石油醚提取物作用后Bcl-2蛋白表达均下降,Bax、caspase-8和caspase-3表达上升,4种蛋白表达各组间比较均差异显著(P<0.01)。结论蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞抑制增殖作用(50μg/mL作用48h之前)主要以诱导凋亡为主。蛴螬石油醚提取物诱导凋亡作用可能与下调Bcl-2表达,上调Bax、caspase-8和caspase-3表达有关。 宋莲莲 孙抒 李香丹 金光洙 金莉莉 杨万山关键词:人宫颈癌HELA细胞 增殖 BAX CASPASE-8 CASPASE-3 蛴螬提取物对人肺癌A_(549)细胞诱导凋亡作用的形态学观察 被引量:10 2008年 目的探讨蛴螬提取物对人肺癌A549细胞诱导凋亡的形态学改变。方法应用MTT法、HE染色、扫描电镜的方法观察蛴螬提取物对体外培养的人肺癌A549细胞形态学影响。结果蛴螬石油醚提取物对人肺癌A549细胞株的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.05或P<0.01)。倒置显微镜下蛴螬石油醚提取物80μg/ml作用后,早期细胞出现凋亡形态学变化,晚期细胞发生膜破裂坏死。HE染色和扫描电镜观察细胞出现典型凋亡形态变化。结论蛴螬提取物在体外对人A549肺癌细胞株有显著性抑制增殖和诱导凋亡作用。 崔春爱 孙抒 杨万山关键词:蛴螬提取物 A549 肺癌细胞株 凋亡 蛴螬提取物抗肿瘤作用的体外血清药理学实验 被引量:4 2008年 目的探讨蛴螬提取物对人肺癌A549和人宫颈癌HeLa细胞株抗肿瘤作用。方法采用血清药理学实验方法,观察含药血清体外对人肺癌A549和人宫颈癌HeLa细胞株抗增殖作用。结果血清药理学实验结果显示,终浓度分别为20%、25%的灭活的蛴螬提取物含药大白鼠血清对A549细胞株的增殖抑制率分别为18.92%、37.54%;终浓度分别为10%、20%、25%的灭活的蛴螬提取物含药血清对HeLa细胞株的增殖抑制率分别为39.86%、24.86%及26.60%。结论蛴螬提取物含药血清对人肺癌A549和人宫颈癌HeLa细胞株增殖有抑制作用。 金龙男 孙抒 杨万山 李基俊关键词:蛴螬提取物 血清药理学 抗增殖 蛴螬提取物对小鼠肝癌H22的抑制作用 被引量:4 2006年 目的:探讨蛴螬提取物体内抗肿瘤作用。方法:按标准方法给60只小鼠接种肝癌H22细胞后,随机分成4组:①对照组:每天灌胃生理盐水12ml/kg;②小剂量组:每天灌胃蛴螬提取物0.97g/kg;③中剂量组:每天灌胃蛴螬提取物1.95g/kg;④大剂量组:每天灌胃蛴螬提取物3.9g/kg。连续灌胃10d后,观察瘤重及病理组织学,超微结构观察。结果:0.97g/kg、1.95g/kg、3.9g/kg剂量的蛴螬提取物对H22肝癌生长抑制率分别为15.2%、25.9%、54.0%;大剂量组的镜检淋巴细胞和淋巴结样组织浸润及坏死多于对照组;超微结构观察:细胞内线粒体嵴断裂,肿胀空化脂滴,可见凋亡细胞或凋亡小体。结论:蛴螬提取物对小鼠H22肝癌有抑制作用。 杨万山 李基俊 孙抒 刘树森 金昌范关键词:蛴螬提取物 H22 抑瘤率 病理组织学观察 超微结构 蛴螬粗提物对人宫颈癌HeLa细胞诱导凋亡作用及其机制 被引量:6 2008年 目的研究蛴螬粗提物对人宫颈癌HeLa细胞诱导凋亡作用,并探讨其作用机制。方法采用流式细胞仪检测HeLa细胞的细胞周期分布相和细胞凋亡率;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdT-mediated dUTP nick end labeling)TUNEL法检测凋亡细胞;通过免疫细胞化学SP法测定凋亡相关基因产物p53、Fas、bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结果(1)蛴螬粗提物可以诱导HeLa细胞发生凋亡,加药组出现亚二倍体峰,并且G0/G1期细胞比例显著增加(P<0.01),而S期和G2/M期细胞比例则明显下降,将细胞阻滞在G0/G1期;(2)蛴螬粗提物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多,凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性;(3)蛴螬粗提物作用后bcl-2、p53蛋白随提取物浓度表达均下降,Bax、Fas蛋白表达上升,四种蛋白表达各组间比较差异均有具有统计学意义(P<0.01)。结论(1)蛴螬粗提物对人宫颈癌HeLa细胞具有诱导凋亡作用;(2)蛴螬粗提取物诱导凋亡作用机制可能与细胞周期发生G0/G1期阻滞有关;并且通过下调bcl-2、p53蛋白表达,上调Bax、Fas蛋白表达,经由细胞凋亡的死亡受体通路和线粒体通路完成凋亡的启动和执行。 李香丹 孙抒 宋莲莲 杨万山关键词:HELA细胞 凋亡 BCL-2 BAX FAS 蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡的影响 被引量:9 2008年 目的:研究蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡通路的影响,为天然药物蛴螬的开发提供实验和理论依据。方法:应用MTT法检测蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株的抗增殖作用及细胞毒活性;通过倒置显微镜、HE染色、吖碇橙(AO)/溴化乙啶(EB)荧光染色方法观察肿瘤细胞的形态学改变;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化;应用免疫细胞化学技术(S-P法)检测用药前后凋亡通路中Bcl-2、Fas、caspase-9、caspase-3的表达改变,探讨蛴螬提取物对凋亡通路的影响。结果:(1)用MTT法检测结果表明,蛴螬提取物在体外对MCF-7人乳腺癌细胞株有明显的抑制增殖作用,实验组与对照组相比其生长抑制率有显著差异(P<0.01),而且这种抑制作用呈现浓度和时间的依赖性;(2)倒置显微镜观察表明,实验组可见胞核固缩、碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化;(3)HE染色表明实验组胞核浓缩呈蓝黑色、胞浆呈淡红色、核染色质浓缩、呈碎块状,有凋亡小体形成;(4)经AO/EB荧光染色观察结果表明,实验组出现凋亡细胞;(5)流式细胞仪结果表明实验组凋亡率明显增加,呈时间依赖性;(6)免疫细胞化学染色结果表明,实验组Bcl-2表达下调,Fas、caspase-3、caspase-9表达均上调,与对照组比差异显著(P<0.01)。结论:①蛴螬提取物在体外显著抑制MCF-7人乳腺癌细胞株增殖;②蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡通路的影响机制可能是通过下调Bcl-2,上调Fas、caspase-3、caspase-9的蛋白表达而起作用,是经由细胞凋亡的线粒体途径和死亡受体途径来完成凋亡的启动和执行。 金华 孙抒 于柏艳 杨万山 金铁峰关键词:蛴螬提取物 MCF-7细胞 蛋白质BCL-2 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 蛴螬提取物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及其机制探讨 被引量:2 2006年 目的观察蛴螬提取物对人乳腺癌M CF-7细胞增殖的影响及其机制。方法采用M TT法检测蛴螬提取物处理过的人乳腺癌M CF-7细胞的生长抑制率,用免疫组化SP法检测用药前后增殖细胞核抗原(PCNA)、K i-67、细胞周期蛋白D 1(CyclinD 1)的表达改变,用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果用蛴螬提取物处理后的M CF-7细胞生长抑制率明显高于对照组,这种抑制作用呈浓度和时间依赖性;M CF-7细胞经蛴螬提取物处理后K i-67、PCNA、CyclinD 1表达均下降,且随着蛴螬提取物作用时间的延长,S期细胞比例明显升高。结论蛴螬提取物在体外对人乳腺癌M CF-7细胞株有显著的增殖抑制作用,其机制可能与下调CyclinD 1、K i-67、PCNA的表达有关。 金华 孙抒 王立波 金日洙 金铁峰关键词:蛴螬 乳腺肿瘤 细胞周期 蛴螬提取物体外对人MGC-803胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡作用的形态学观察 被引量:5 2005年 目的 :探讨蛴螬提取物体外对MGC 80 3胃癌细胞株的抗增殖及诱导凋亡的形态学观察。方法 :通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜技术及吖啶橙 (AO) /溴化乙锭 (EB)荧光染色方法和免疫细胞化学技术检测蛴螬提取物对MGC 80 3胃癌细胞诱导凋亡作用的方式。结果 :(1)光镜及电镜观察结果表明 ,蛴螬 (终浓度为 4mg/ml)作用于MGC 80 3胃癌细胞 2 4h后 ,可见胞核固缩、胞核碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化 ;(2 )经AO/EB荧光染色观察结果表明 ,当终浓度为 4mg/ml的蛴螬作用于MGC 80 3细胞 2 4h后 ,其凋亡率和破膜率与自然凋亡率和破膜率相比均有显著性差异 ,其凋亡率为 86 3% (P <0 0 0 1) ,破膜率为 4 1 9% (P <0 0 0 1)。说明蛴螬提取物确实有诱导MGC 80 3细胞凋亡的作用 ,同时也有细胞毒作用 ,但以诱导细胞凋亡为主。 (3)应用免疫细胞化学技术(S P法 )检测用药前后ki 6 7抗原的表达改变 ,探讨蛴螬提取物在体外对MGC 80 3胃癌细胞株的抗增殖作用。结论 :蛴螬提取物在体外对人MGC 80 3胃癌细胞株有显著抗增殖及诱导凋亡作用。 孙抒 金哲 李基俊关键词:MGC-803 体外 诱导凋亡 提取物 抗增殖 形态学观察 蛴螬提取物抗肿瘤作用的实验研究 被引量:7 2007年 目的探讨蛴螬提取物抗肿瘤作用及其作用机制。方法采用寇氏(Korbor)法计算小鼠急性经口LD50及其95%可信限;用蛴螬提取物灌胃观察其对S180荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用,并采用比色法测定S180荷瘤小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。结果①蛴螬提取物的小鼠急性经口LD50及其95%可信限为48.73(46.43—51,14)g/kg;②蛴螬提取物小、中、大剂量组对小鼠移植性肉瘤S180实体瘤的抑瘤率分别为18.64%、39.47%、53.24%;③经过蛴螬提取物治疗后,荷瘤小鼠血清MDA较模型组明显下降,而SOD活性则显著增加(P〈0.01)。结论蛴螬提取物属低毒中药,具有抗氧化作用,可能是其抗肿瘤机制之一;蛴螬提取物在体内具有抑制小鼠移植性S180肉瘤生长的作用。 金龙男 孙抒 杨万山 李基俊关键词:蛴螬提取物 抑瘤率 超氧化物歧化酶 丙二醛