国家科技重大专项(2009ZX10004-706)
- 作品数：14 被引量：29H指数：4
- 相关作者：吴英松林冠峰邹丽萍李明贺安更多>>
- 相关机构：南方医科大学福州总医院南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 癌胚抗原光激化学发光免疫分析法的建立被引量：2
- 2011年
- 目的:利用光激化学发光免疫分析技术(Al-phaLISA)建立人血清癌胚抗原(CEA)的快速检测试剂。方法:1株CEA单克隆抗体(mAb)包被受体微球,另1株(mAb)用生物素标记,与链霉亲和素的供体微球共同组成检测试剂,优化反应体系并对试剂的各项性能指标进行评价。结果:自制CEA试剂分析灵敏度为0.11 ng/mL,线性测量范围为0.11～500 ng/mL,分析内和分析间的精密度分别为3.3%～6.8%、5.5%～8.1%,与AFP、CA12-5、CA19-9和人血清白蛋白均无交叉反应,100份临床血清样本用本试剂与罗氏化学发光试剂检测,其相关系数为0.976。结论:自制CEA Al-phaLISA试剂的各项性能指标均能达到临床检测要求,有望替代国外同类试剂应用于临床血清样本CEA浓度的测定。
- 贺安董志宁刘天才邹丽萍林冠峰李明吴英松
- 关键词：癌胚抗原
- 妊娠相关血清蛋白A光激化学发光免疫分析法的建立被引量：1
- 2014年
- 目的采用光激化学发光免疫分析技术（AlphaLISA）建立快速定量检测妊娠相关血清蛋白A（PAPPA）的方法。方法用两株配对的PAPPA单克隆抗体，一株PAPPA单克隆抗体包被受体微球，另一株PAPPA单克隆抗体用生物素标记，与链霉亲合素的供体微球共同组成检测试剂。结果自制PAPPA试剂分析灵敏度为1．365mU／L，线性测量范围为1．365～10000mU／L，分析内和分析间的精密度分别为5．61％～6．51％和2．07％～4．82％，与AFP、RPL、HPL和HCG无明显交叉反应。使用自制试剂对853份9～13周的正常孕妇血清进行检测，建立了孕妇血清在不同孕周时的中位数水平，为正常值参考范围的确定提供了一定依据，其中165份临床血清样本使用自制试剂与Perkin Elmer公司PAPPATRFIA诊断试剂盒同时进行检测，结果具有相关性（r=0．987）。结论自制PAPPA光激化学发光免疫分析试剂的各项性能指标均能达到临床检测要求，有望替代国外同类产品。
- 黄莉萍周燕莉邹丽萍刘天才董志宁钟梅吴英松
- HBeAb光激化学发光免疫分析试剂盒的研制被引量：5
- 2011年
- 目的研制光激化学发光免疫分析技术(AlphaLISA)建立人血清乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)的快速检测试剂盒。方法采用中和抑制法建立HBeAb AlphaLISA试剂盒。结果自制HBeAb试剂盒灵敏度为0.003NCU/ml,可测范围为0.003-16NCU/ml。批内与批间的精密度分别为5.3%和6.8%,与HBcAb无交叉反应。使用自制试剂与罗氏化学发光试剂盒同时检测136份临床血清样本,结果具有相关性(r=0.961)。结论自制HBeAb AlphaLISA试剂盒的各项性能指标能够达到临床检测要求,可用于临床血清样本HBeAb浓度的测定。
- 马强贺安董志宁刘天才邹丽萍林冠峰李明吴英松
- 关键词：试剂盒
- C肽光激化学发光免疫分析试剂盒的研制被引量：5
- 2011年
- 目的：研制光激化学发光免疫分析技术（AlphaLISA）建立人血清C肽（C peptide）的快速检测试剂盒。方法：采用夹心法建立C peptide AlphaLISA试剂盒。结果：自制C肽试剂盒灵敏度为0.06ng/ml.,可测范围为（0.06~22）ng/ml。批内与批间的精密度分别为4.0%~4.8%,5.6%~6.8%,与胰岛素以及胰岛素原无交叉反应,使用本试剂盒与CMIA-ARCHITECT试剂盒同时检测98份临床血清样本,结果具有相关性,其相关系数为0.973。结论：自制C肽AlphaLISA试剂盒的各项性能指标能够达到临床检测要求,可用于临床血清样本C肽浓度的测定。
- 马强贺安董志宁刘天才邹丽萍林冠峰李明吴英松
- 关键词：C肽
- 梅毒螺旋体0751基因的克隆、表达及鉴定被引量：3
- 2011年
- 目的构建梅毒螺旋体0751基因的原核表达质粒,诱导重组蛋白表达及进行免疫学鉴定。方法以梅毒螺旋体基因组DNA为模板,PCR扩增梅毒螺旋体0751基因,构建其重组原核表达载体,并采用Western-blot方法初步鉴定该蛋白的特异性。结果成功扩增出梅毒螺旋体0751基因,该基因在大肠杆菌表达系统中得到表达,并且特异性识别梅毒患者血清。结论在大肠杆菌中成功表达梅毒螺旋体0751基因,为梅毒螺旋体的诊断提供了新的特异性抗原。
- 马强耿焱黄茂梁吴英松李明
- 关键词：梅毒螺旋体蛋白表达
- 人促卵泡激素光激化学发光免疫分析法的建立及性能评价被引量：4
- 2012年
- 目的利用光激化学发光免疫分析法(AlphaLISA)建立人促卵泡激素(hFSH)的快速检测试剂。方法使用2株配对的hFSH单克隆抗体,一株hFSH单克隆抗体用生物素标记,另一株hFSH单克隆抗体包被于受体微球上,与包被有链霉亲合素的供体微球共同构成检测试剂,优化反应体系并对试剂的各项性能指标进行评价。结果自制hFSH试剂分析敏感性和功能敏感性分别为0.09和0.12 U/L,线性测量范围为0.09～192.00 U/L,试剂的分析内变异系数(CV)和分析间CV分别为4.2%～7.1%和7.5%～8.3%,均<10.0%,与人黄体生成素(hLH)、人促甲状腺素(hTSH)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)的交叉率分别为0.16%、0.08%和0.02%。100份临床血清样本用本试剂与西门子Immulite 2000促卵泡生成激素化学发光(CLIA)检测试剂盒检测,其相关系数为0.979(P<0.001)。结论自制hFSH AlphaLISA试剂的各项性能指标均能达到临床检测要求,可用于临床血清样本hFSH浓度的测定。
- 林冠峰董志宁贺安邹丽萍侯经远李明吴英松
- 关键词：性能评价
- 总PSA光激化学发光免疫分析法的建立被引量：4
- 2011年
- 为了采用光激化学发光免疫分析技术建立快速定量检测总前列腺特异性抗原(tPSA)的方法。用两株配对的tPSA单克隆抗体,一株tPSA单克隆抗体包被受体微球,另一株tPSA单克隆抗体用生物素标记,与链霉亲合素的供体微球共同组成检测试剂。结果:自制tPSA试剂分析灵敏度为0.006ng/ml,线性测量范围为0.006～150ng/ml,分析内和分析间的精密度分别为3.90%～6.67%、4.71%～6.90%,与AFP、CA125、CA19-9和人白蛋白无明显交叉反应,136份临床血清样本用本试剂与罗氏化学发光试剂检测,其相关系数为0.979。提示:自制tPSA光激化学发光免疫分析试剂各项指标均能达到临床要求,有望替代国外同类产品。
- 邹丽萍贺安林冠峰董志宁李明吴英松
- 关键词：总前列腺特异性抗原
- 人附睾分泌蛋白4光激化学发光免疫分析法的建立被引量：1
- 2015年
- 目的采用光激化学发光免疫分析技术建立快速定量检测人附睾分泌蛋白4（HE4）的方法。方法用两株配对的HE4单克隆抗体,一株HE4单克隆抗体包被受体微球,另一株HE4单克隆抗体用生物素标记,与链霉亲合素的供体微球共同组成检测试剂。结果自制HE4试剂分析灵敏度为0.81 pmol/L,分析内和分析间的精密度分别为4.3%~7.2%和6.1%~7.7%,均低于10%,与癌抗原15-3（CA15-3）、甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、癌抗原125（CA125）无明显交叉反应,120份临床血清样本用本试剂与罗氏电化学发光检测试剂盒平行检测,其相关系数为0.95。结论自制HE4光激化学发光免疫分析试剂各项指标均能达到临床要求,有望替代国外同类产品。
- 肖俐霞林冠峰陈少琅吴英松
- 关键词：免疫分析
- 人促黄体生成素光激化学发光免疫分析法的建立被引量：1
- 2012年
- 目的采用光激化学发光免疫分析技术建立快速定量检测人促黄体生成素(hLH)的方法。方法用2株配对的hLH单克隆抗体,1株hLH单克隆抗体包被受体微球,另1株hLH单克隆抗体先用生物素标记,再与链霉亲合素的供体微球共同组成人促黄体生成素光激化学发光免疫分析试剂,进而优化反应体系并对试剂的各项性能指标进行评价。结果自制hLH试剂分析灵敏度为0.164 U/L,线性测量范围为0.164～135 U/L,分析内和分析间的精密度分别为4.3%～6.1%和7.4%～8.1%,均低于10%,与hTSH、hFSH和hCG无明显交叉反应,158份临床血清样本用本试剂与罗氏电化学发光检测试剂盒平行检测,对所测数值采用配对t检验分析,结果显示两种方法检测结果差异无统计学意义(t=-1.468,P=0.07)。结论自制hLH光激化学发光免疫分析试剂各项指标均能达到临床要求,有望替代国外同类产品。
- 林冠峰邹丽萍刘天才侯经远任志奇吴英松
- 关键词：免疫分析
- C肽与胰岛素双标记时间分辨荧光免疫分析法的建立及初步临床应用被引量：4
- 2011年
- 建立钐(Sm3+)标记检测C肽(C-peptide)及铕(Eu3+)标记检测胰岛素(insulin)的双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),并初步尝试检测人血C肽以及胰岛素含量.将抗C肽单克隆抗体(Biodesign No.E54094M)与抗insulin单克隆抗体(BiodesignNo.E86306M)混合包被96孔板,然后用Sm3+标记抗C肽单克隆抗体(Medix No.9103),Eu3+标记抗insulin单克隆抗体(Biodesign No.E86802M),运用双抗体夹心一步法建立C肽/胰岛素双标记时间分辨免疫荧光分析法.结果显示:C肽分析灵敏度为0.2μg/L,线性范围为0.5～22μg/L,平均回收率达到99.6%,分析内和分析间变异系数分别为4.6%～6.0%和5.1%～7.6%.胰岛素分析灵敏度为0.8 mU/L,线性范围为3.6～180 mU/L,平均回收率为99.4%,分析内和分析间变异系数分别为3.7%～6.0%和5.1%～8.0%.C肽/胰岛素双标记检测试剂与PerkinElmer公司对应的单标记进口试剂盒分别同时测定血清样本200份,检测结果高度相关,具有较好的一致性,相关系数分别为0.98与0.99.总之,自建C肽/胰岛素双标记时间分辨荧光免疫分析方法的性能均可以达到临床检测要求,有望替代现有国内外较为昂贵的单标记试剂,可用于胰岛素分泌不足导致的糖尿病诊断及糖尿病的大规模普查筛选.
- 马强李来庆贺安林冠峰邹丽萍李明吴英松
- 关键词：双标记时间分辨荧光免疫分析C肽胰岛素
