教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-05-0256)
- 作品数：2 被引量：31H指数：2
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- “醒脑开窍”针刺后局灶性脑缺血模型大鼠脑基底核组织在蛋白质水平上的变化被引量：18
- 2006年
- 目的:观察“醒脑开窍”针刺治疗后局灶性脑缺血模型大鼠基底核组织在蛋白质水平上发生的改变,以分析针刺对脑缺血后蛋白质表达的影响。方法:实验于2003-10/2004-07在天津中医学院第一附属医院分子生物学实验室和全国重点实验室国家生物医学分析中心完成。①选用40只成年雄性Wistar大鼠,按随机抽签法分为4组,每组10只:正常组、假手术组、模型组和针刺组。模型组和针刺组采用颈内动脉插入线栓法建立大脑中动脉阻塞模型。假手术组除不向颈内动脉内插线外,其余步骤同模型组。正常组不作任何处理。针刺组:选用韩氏穴位神经刺激仪以醒脑开窍针法主穴内关、人中穴进行针刺;频率2Hz,电流3mA,持续10min/次。于大鼠神经功能缺陷评分合格后,即刻针刺一次,处死前10min再针刺一次。各组在术后6h快速处死,冰上剥离缺血侧基底核。②对4组蛋白质提取物行双向凝胶电泳,采用计算机辅助图像分析技术,分析凝胶图像和找出差异表达蛋白点。选取差异表达蛋白质点用基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定肽质量指纹谱,检索Swiss-Prot蛋白质数据库鉴定差异蛋白。结果:Wistar大鼠40只均进入结果分析。4组基底核组织采用双向凝胶电泳根据蛋白质的分子量和等电点将其分离。并用考染方法显示了凝胶上蛋白质点的位置和丰度。结果显示这种方法对Wistar大鼠基底核组织蛋白质达到了很好的分离效果,经过计算机图像软件分析凝胶图像有以下结果:经过对比分析及质谱鉴定,找到质和/或量有明显改变的15个点。其中,在模型组表达上调,针刺组治疗后下调的2个点:泛醌-细胞色素C还原酶铁硫亚单位(分子量/等电点:29427/9.04),3-磷酸甘油醛脱氢酶(35656/8.45);治疗后进一步上调有3个点:谷胱甘肽S-转移酶P(23293/7.30),组织型纤溶酶原激活物前体(62862/8.55),抗氧化蛋白2(24439/5.8)。在�
- 王舒温景荣赵晓峰石学敏
- 关键词：蛋白质类
- “醒脑开窍”针刺法对局灶性脑缺血大鼠海马蛋白质组学影响的研究被引量：17
- 2007年
- [目的]寻找与脑缺血相关及针刺起效的靶蛋白,从蛋白质组学层面探讨脑缺血的病理机制及针刺治疗脑缺血性损伤的作用机制。[方法]将Wistar大鼠随机分为正常组、假手术6h组,模型6h组和针刺6h组,采用改进的线栓法制备动物模型。在规定时间快速断头取脑,剥离缺血侧海马,提取脑组织总蛋白进行双向电泳,以Image Master 2DV3.01 Elite软件进行图像分析。选取差异蛋白质点进行胶内酶解,以基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MAL-DI-TOF-MS)测肽质量指纹图,检索Swiss-Port数据库,对蛋白质进行鉴定。[结果]共鉴定出30个差异蛋白质。正常组与假手术组比较无差异蛋白表达;模型组与正常组比较鉴定出差异蛋白质点29个,其中在模型6h组新出现1个,在模型6h表达上调的11个,表达下调的17个;针刺组与模型组比较鉴定出差异蛋白质点21个,其中在针刺组上调有16个,下调的有5个。[结论]以双向电泳联合质谱技术,初步发现与脑缺血相关以及针刺治疗脑缺血的部分靶蛋白质,有助于深入研究脑缺血性损伤病理机制及针刺治疗脑缺血性损伤的作用机制。
- 温景荣赵晓峰王舒石学敏
- 关键词：脑缺血蛋白质组学双向电泳
