湖北省自然科学基金(2006ABA344)
- 作品数：9 被引量：15H指数：2
- 相关作者：曹学兵孙圣刚王云甫陈吉相何国厚更多>>
- 相关机构：华中科技大学太和医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转染TGF-β1基因的树突状细胞对重症肌无力大鼠T细胞IFN-γ和NO分泌的调节被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨TGF-β1基因转染的树突状细胞(TGF-β1-DC)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠T细胞IFN-γ和NO分泌的调节作用.方法:近交系、8～10 wk龄、雌性Lewis大鼠25只,随机分为5组:正常组、EAMG组、DC对照组、TGF-β1-DC治疗组、生理盐水治疗对照组.除正常组外,其余各组均采用丁氏双鳍电鳐的电器官乙酰胆碱受体蛋白二次免疫的方法复制EAMG大鼠模型.初次免疫后第5日分别皮下注射2×106的DC,TGF-β1-DC及等体积的生理盐水,EAMG组不接受任何治疗.初次免疫后7 wk,分离脾脏T细胞体外培养48 h后分别应用ELISA和化学方法检测T细胞IFN-γ和NO的分泌水平.结果:正常大鼠T细胞体外培养48 h后,其上清液中IFN-γ的含量很少,而EAMG组大鼠T细胞培养上清液中IFN-γ的含量显著增加(P<0.01).TGF-β1-DC治疗组、DC对照组、生理盐水对照组IFN-γ的含量与EAMG组比较均无统计学差异;正常大鼠T细胞体外培养的上清液中NO的含量很少,EAMG组大鼠T细胞培养上清液中NO的含量明显增加(P<0.01).TGF-β1-DC治疗组NO的含量较EAMG组明显增加(P<0.05),DC对照组、生理盐水对照组与EAMG组比较无统计学差异.结论:调节EAMG大鼠体内IFN-γ和NO的分泌可能是TGF-β1-DC的治疗机制之一.
- 王云甫陈吉相孙圣刚曹学兵
- 关键词：重症肌无力转化生长因子树突状细胞干扰素-Γ
- T细胞干扰素-γ及其受体与实验性重症肌无力大鼠发病的相关性研究被引量：1
- 2007年
- 王云甫孙圣刚何国厚曹学兵李罗清乔娴陈吉相
- 关键词：重症肌无力干扰素-Γ
- 白细胞介素-12对实验性自身免疫性重症肌无力耐受的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨白细胞介素(IL)-12对未成熟树突状细胞(iDC)诱导实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)耐受的影响。方法采用乙酰胆碱受体(AChR)负载的iDC接种Lewis大鼠,IL-12组大鼠在接种DC的同时和次日分别给予重组大鼠白细胞介素-12(rrIL-12)腹腔注射,200 ng/次。3周后以AChR和完全福氏佐剂(CFA)进行免疫,观察免疫7周后大鼠重症肌无力(MG)相关指标的改变。结果接种AChR负载的iDC的大鼠和健康大鼠经AChR和CFA免疫后MG相关指标无明显改变;而经IL-12干预的大鼠和EAMG对照组大鼠均产生明显的MG症状,重复电刺激出现明显衰减,血清AChR抗体滴度明显增高,神经肌肉接头呈现典型的MG样改变。结论 IL-12可阻止AChR负载的iDC诱导EAMG耐受,提示DC功能异常和IL-12可能在MG异常免疫反应的启动机制中具有重要作用。
- 李罗清孙圣刚曹学兵王云甫
- 关键词：重症肌无力未成熟树突状细胞免疫耐受白细胞介素-12
- 激发型CD40单克隆抗体对实验性自身免疫性重症肌无力耐受的影响
- 2011年
- 目的 探讨激发型CD40单克隆抗体（CD40mAb）对未成熟树突状细胞（iDC）诱导实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）耐受的影响. 方法 20只Lewis大鼠按照随机数字表法分为正常组、EAMG对照组、耐受组和CD40mAb组,每组5只.耐受组和CD40mAb组每只大鼠于背部皮下分4点分别注射总量为1 mL的乙酰胆碱受体（AChR）＋iDC,其中CD40mAb组每只大鼠在接种iDC的同时和次日分别给予CD40mAb腹腔注射,0.5mg/次.EAMG对照组注射1 mL无血清培养基.正常组不做任何处理.3周后用AChR和完全弗氏佐剂（CFA）免疫,观察免疫7周后重症肌无力（MG）相关指标的改变. 结果 耐受组大鼠和正常组大鼠一样,用AChR和CFA免疫后,MG相关指标无明显改变;而CD40mAb组大鼠和EAMG对照组一样,产生了明显的MG症状,重复电刺激出现明显衰减,血清AChRab滴度明显增高,神经肌肉接头呈现典型的MG样改变. 结论 激发型CD40mAb可阻止AChR负载的iDC诱导EAMG耐受,提示iDC功能异常可能与MG异常免疫反应的启动密切相关.
- 李罗清孙圣刚曹学兵王云甫
- 关键词：重症肌无力免疫耐受树突状细胞
- 负载乙酰胆碱受体的未成熟树突状细胞对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠细胞因子表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨负载乙酰胆碱受体(AChR)的未成熟树突状细胞(iDC)对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠细胞因子表达的影响。方法 30只雌性Lewis大鼠随机分为EAMG组、iDC组、成熟DC(mDC)组、负载AChR的iDC(AChR+iDC)组、负载AChR的mDC(AChR+mDC)组和正常对照组。分别给各组大鼠皮下注射培养基、iDC、mDC、AChR+iDC、AChR+mDC,正常对照组大鼠不注射。3周后给各组大鼠(除正常对照组)用AChR二次免疫法制作EAMG模型。免疫后每周进行EAMG症状评分,免疫7周后检测大鼠T细胞干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-12、IL-10和转化生长因子(TGF)-β1的表达水平。结果 EAMG组、iDC组、mDC组和AChR+mDC组大鼠均产生了典型的MG症状;与正常对照组比较,其T细胞IFN-γ、IL-12、IL-10和TGF-β1的表达水平均显著增高(均P<0.01)。AChR+iDC组仅有一只大鼠出现轻微MG症状,其IFN-γ和IL-12表达水平与正常对照组比较差异无统计学意义,IL-10和TGF-β1的表达水平均明显高于正常对照组(均P<0.01),且TGF-β1的表达显著高于EAMG组、iDC组、mDC组和AChR+mDC组(均P<0.05)。结论负载AChR的iDC能抑制EAMG大鼠细胞因子IFN-γ和IL-12表达,上调IL-10和TGF-β1表达,可能与其诱导EAMG耐受作用有关。
- 李罗清孙圣刚曹学兵王云甫
- 关键词：重症肌无力细胞因子
- 实验性自身免疫性重症肌无力大鼠转化生长因子-β1和白细胞介素-10水平变化的研究
- 2011年
- 目的:探讨转化生长因子(TGF)-β1和白细胞介素(IL)-10在实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)发病机制中的作用。方法:10只Lewis大鼠随机分为EAMG组和健康对照组。EAMG组采用AChR二次免疫的方法制作EAMG模型,观察大鼠EAMG症状。于初次免疫后第7周,对大鼠进行Lennon评分,采用Western Blot和RT-PCR方法分别检测大鼠脾脏T淋巴细胞TGF-β1和IL-10的表达水平。结果:AChR二次免疫后,EAMG组大鼠产生了典型的EAMG症状。初次免疫后第7周,EAMG组大鼠Lennon评分及其脾脏T淋巴细胞TGF-β1和IL-10mRNA的表达水平均显著高于健康对照组(P﹤0.01)。结论:EAMG大鼠脾脏T淋巴细胞TGF-β1和IL-10的表达增强,提示TGF-β1和IL-10在EAMG的发病机制中具有重要作用。
- 李罗清孙圣刚曹学兵王云甫
- 关键词：重症肌无力转化生长因子-Β1白细胞介素-10
- 未成熟树突状细胞对T细胞活化及其IFN-γ和IL-12表达的影响被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨未成熟树突状细胞(DC)对T细胞活化及其IFN-γ和IL-12表达的影响。方法:通过诱导Lewis大鼠骨髓前体细胞,获取未成熟(iDC)和成熟(mDC)两种状态的DC;将两种DC用乙酰胆碱受体(AChR)负载后进行T细胞重复刺激、交叉刺激和无关抗原刺激试验,观察T细胞增殖情况并测定T细胞IFN-γ、IL-12的表达水平。结果:(1)AChR负载的iDC可明显抑制T细胞增殖,且这种被抑制的T细胞对AChR负载的mDC的交叉刺激也不引起增殖,但对无关抗原OVA负载的mDC的刺激可产生明显增殖。(2)与mDC组比较,AChR负载的iDC初次和重复刺激均明显抑制T细胞IFN-γ和IL-12的表达。结论:iDC可诱导抗原特异性T细胞耐受,耐受机制可能与Th1细胞因子IFN-γ和IL-12的抑制有关。
- 李罗清孙圣刚曹学兵王云甫
- 关键词：树突状细胞T细胞免疫耐受
- 未成熟树突状细胞对T细胞功能及其IL-10和TGF-β1表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨未成熟树突状细胞(DC)对T细胞功能及其IL-10和TGF-β1表达的影响。方法通过诱导大鼠骨髓前体细胞,获取未成熟(iDC)和成熟(mDC)2种状态的DC;将2种DC用乙酰胆碱受体(AChR)负载后进行T细胞重复刺激、交叉刺激和无关抗原刺激试验,采用MTT法观察T细胞增殖情况,采用RT-PCR方法测定T细胞IL-10 mRNA的表达水平,采用Western blot方法检测T细胞TGF-β1的表达水平。结果①AChR负载的iDC可明显抑制T细胞增殖,且这种被抑制的T细胞对AChR负载的mDC的交叉刺激也不引起增殖,但对无关抗原OVA负载的mDC的刺激可产生明显增殖。②与mDC组比较,AChR负载的iDC初次和重复刺激均明显增强T细胞IL-10和TGF-β1的表达。结论 iDC可诱导抗原特异性T细胞耐受,耐受机制可能与IL-10和TGF-β1的表达增强有关。
- 李罗清孙圣刚曹学兵王云甫
- 关键词：树突状细胞T细胞免疫耐受细胞因子
- 实验性自身免疫性重症肌无力大鼠T淋巴细胞IFN-γ及其受体表达水平的研究被引量：2
- 2006年
- 目的探讨实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠T淋巴细胞γ-干扰素(IFN-γ)的分泌及其表面IFN-γ受体(IFN-γR)的表达水平。方法健康、雌性Lewis大鼠24只,随机分为正常对照组、完全福(氏)佐剂(CFA)对照组、EAMG组。EAMG组大鼠分别于足垫、腹部及背部皮下多点注射丁(氏)双鳍电鳐的电器官乙酰胆碱受体(AChR)蛋白乳剂1 mL,第4周再次注射上述乳剂免疫大鼠。CFA对照组只接受等量的CFA皮下注射。初次免疫后7周,分离各组大鼠脾脏T淋巴细胞并体外培养48 h后,应用ELISA和免疫组织化学方法分别检测T淋巴细胞IFN-γ分泌及其表面IFN-γR的表达水平。结果(1)正常大鼠T淋巴细胞体外培养48 h后,其上清液中IFN-γ水平很低,而EAMG组大鼠T淋巴细胞培养上清液中IFN-γ水平较CFA对照组与正常组显著增高(P<0.01);(2)正常大鼠T淋巴细胞经过体外培养后可见少量IFN-γR阳性细胞,而EAMG组大鼠T淋巴细胞经体外培养后可见较多IFN-γR阳性细胞,其阳性细胞数及其平均吸光度D(λ)值均明显高于CFA对照组与正常组(P<0.01)。结论EAMG大鼠T淋巴细胞IFN-γ分泌及其表面IFN-γR表达水平明显升高,IFN-γ/IFN-γR的异常表达可能在重症肌无力(MG)的发生过程中发挥重要作用。
- 王云甫孙圣刚何国厚曹学兵李罗清乔娴陈吉相
- 关键词：重症肌无力Γ-干扰素
