江苏省卫生科研项目(X200739)
- 作品数：4 被引量：19H指数：3
- 相关作者：高琪许永良周永华黄玉政胡玉红更多>>
- 相关机构：江苏省寄生虫病防治研究所南京军区南京总医院扬州大学更多>>
- 发文基金：江苏省卫生科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 弓形虫感染对大鼠脑组织神经丝mRNA表达和细胞免疫水平的影响被引量：7
- 2009年
- 目的探讨弓形虫感染对大鼠大脑组织神经丝（NF）mRNA表达和细胞免疫水平的影响。方法将4周龄雄性SD大鼠分成两组（每组10只）：弓形虫感染组腹腔感染2×10^10个／L弓形虫速殖子悬液2ml：对照组腹腔注射灭菌生理盐水2ml。9周后，应用RT-PCR法检测大鼠大脑组织中高相对分子质量NF（NF-H）、中相对分子质量NF（NF—M）和低相对分子质量NF（NF—L）mRNA表达水平；流式细胞术检测大鼠外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞；酶联免疫吸附试验测定其血清γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素4（IL-4）水平。结果大鼠弓形虫感染9周后，大脑组织NF—L、NF—HmRNA表达量（0．51±0．06、0．68±0．05）较对照组（0．79±0．03、0．76±0．05）明显下降（t值分别为3．41、2．17，P〈0．01或〈0．05）：NF—MmRNA表达量（0．69±0．02）与对照组（0．72±0．03）比较，差异无统计学意义（t=2．09，P〉0．05）。弓形虫感染组大鼠的CD4^＋T细胞[（32．19±5．01）％]和CD8^＋T细胞[（20．06±2．28）％1与对照组[（35．82±3．71）％、（22．06±3．90）％]比较，差异均无统计学意义（t值分别为1．69、1．88，P均〉0．05）。弓形虫感染组大鼠血清IFN-γ[（6．03±0．16）ng／L]、TNF-α[（18．05±1．93）ng／L]、IL-4[（15．76±1．59）ng／L]水平均高于对照组[（4．77±0．13）、（9．54±1．57）、（5．67±0．42）ng／L，t值分别为2．81、2．74、2．63，P均〈0．05]。结论弓形虫感染可导致大鼠大脑组织中NF亚单位mRNA表达水平下降。血清IFN-γ、TNF—α、IL-4水平升高。
- 周永华胡玉红顾向明王玠黄玉政董敏石芳许永良高琪
- 关键词：弓形虫属神经丝细胞因子类
- 慢性弓形虫感染大鼠海马蛋白质组的研究被引量：2
- 2013年
- 目的观察慢性弓形虫感染大鼠海马组织的蛋白质组的表达与变化。方法将6只雄性SD大鼠随机分成健康对照组和弓形虫感染组,每组3只。感染组每鼠腹腔注射4×107个弓形虫RH株速殖子,对照组注射等量生理盐水,于感染后第5天,尾静脉采血,吉氏染色验证大鼠感染情况。感染10周后,分离大鼠海马组织,抽提蛋白,并采用双向凝胶电泳分离,考马斯亮蓝染色后用PDQuest1.0软件进行图像分析,从胶中选取分离蛋白质点,应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,获取肽质量指纹图谱(PMF),采用Mascot软件检索SwissProt数据库鉴定蛋白质。结果血涂片结果证实,感染组大鼠均感染成功。感染组和对照组大鼠海马组织经双向凝胶电泳分离后,分别检出蛋白斑点数(311±19)个和(327±13)个,对2张电泳图进行匹配后发现有16个蛋白斑点在2组大鼠海马组织中的含量有明显变化,其中5个蛋白斑点在感染组大鼠海马蛋白双向电泳图谱中消失,11个蛋白斑点在2组大鼠海马组织中含量发生了3倍以上的变化,其中感染组上调4个,下调7个。有差异表达的16个蛋白斑点经质谱鉴定和数据库检索,发现9个蛋白,分别为磷酸激酶1、类烯醇化酶、谷氨酰合成酶、肌酸激酶、B型肌酸激酶、ATP合酶、线粒体顺乌头酸酶、肌动蛋白和未命名蛋白,前3个蛋白在感染组上调,其余6个下调。结论共获得9个慢性弓形虫感染大鼠与健康大鼠海马组织差异表达蛋白。
- 周永华范红结范红结张英张英黄玉政黄玉政
- 关键词：刚地弓形虫海马蛋白质组
- 弓形虫感染对大鼠脑组织神经丝mRNA表达的影响被引量：4
- 2010年
- 目的探讨弓形虫感染对大鼠脑组织神经丝(NF)mRNA表达和细胞免疫水平的影响。方法将4周龄雄性SD大鼠随机分成2组:弓形虫感染组(A组)腹腔感染弓形虫速殖子2×107/ml悬液2ml;正常对照组(B组)腹腔注射灭菌生理盐水2ml。感染弓形虫速殖子9周后,应用逆转录聚合酶链反应检测大鼠大脑组织中高分子量NF(NF-H)、中分子量NF(NF-M)和低分子量NF(NF-L)mRNA表达水平;流式细胞术检测大鼠外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞;ELISA测定其血清IFN-γ、TNF-α、IL-4等细胞因子。结果大鼠弓形虫感染9周后,大脑组织NF-LmRNA下降为正常对照组的64%(P<0.01);NF-M为96%(P>0.05);NF-H为89%(P<0.05)。感染组大鼠的CD4+和CD8+T淋巴细胞与正常对照组相比,差异均无统计学意义(P均>0.05);感染组大鼠血清中IFN-γ、TNF-α、IL-4等细胞因子的水平均高于正常对照组大鼠水平(P<0.05)。结论弓形虫感染可导致大鼠脑组织中NF亚单位mRNA表达水平的下降,血清IFN-γ、TNF-α、IL-4水平的升高。
- 周永华胡玉红顾向明王玠黄玉政董敏石芳许永良高琪
- 关键词：弓形虫逆转录聚合酶链反应
- 隐性弓形虫感染小鼠的学习记忆能力障碍研究被引量：8
- 2011年
- 目的应用物体识别试验和Morris水迷宫试验检测隐性弓形虫感染小鼠的学习记忆能力。方法 36只昆明小鼠随机分为对照组、低剂量弓形虫包囊感染组(低感染组)和高剂量弓形虫包囊感染组(高感染组),每组12只,低感染组和高感染组每鼠分别经口感染弓形虫Prugniaud(PRU)弱毒株6个和12个包囊。感染后第63天进行物体识别试验,通过第1天的适应期和第2天的熟悉期,于试验第3天记录小鼠对新旧不同物体的探究时间,计算分辨指数(DI)。感染后第66天进行Morris水迷宫试验,分别通过定位航行试验、空间搜索试验和工作记忆试验检测各组小鼠的空间记忆获得能力、空间记忆保持能力和工作记忆能力。于水迷宫试验结束当天,即感染后第74天处死小鼠,取左侧脑组织固定,切片,伊红-苏木素染色后,镜下观察病理改变。右侧脑组织用于检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果物体识别试验结果显示,高感染组和低感染组小鼠的分辨指数分别为(14.3±5.2)%和(17.5±5.6)%,均显著低于对照组[(28.9±7.1)%](P<0.01)。在定位航行试验中,两个弓形虫感染组小鼠找到平台的逃避潜伏期均长于对照组,其中试验第2天和第3天感染组和对照组间差异有统计学意义(P<0.05)。在空间搜索试验中,高感染组和低感染组小鼠穿越原平台所在象限的距离占游泳总距离的(19.9±5.0)%和(23.9±6.8)%,与对照组[(27.4±3.6)%]比较差异有统计学意义(P<0.05)。在工作记忆试验中,试验第4天高感染组和低感染组小鼠的逃避潜伏期[(36.5±14.2)s和(35.3±13.7)s]均比对照组[(30.4±12.5)s]显著延长(P<0.05)。所有试验中,低感染组和高感染组小鼠各观察指标的差异均无统计学意义(均P>0.05)。两组弓形虫感染小鼠的脑组织切片中均见弓形虫包囊,神经胶质细胞增生,小血管周围间隙增宽,出现"血管袖套"现象。高感染组和低感染组小鼠脑组织
- 周永华王小波蒋守富许永良陶建平张小萍张英高琪
- 关键词：刚地弓形虫学习记忆
