国家科技重大专项(2006BAD05A16)
- 作品数：8 被引量：10H指数：2
- 相关作者：张滨马美湖杨华彭国平方俊更多>>
- 相关机构：华中农业大学湖南农业大学长沙环境保护职业技术学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 红平红球菌絮凝基因提取及絮凝剂对血红素肽-铁絮凝特性被引量：1
- 2009年
- 优化了红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)絮凝基因(NOC-1)的提取条件,探讨了该菌种发酵产生的微生物絮凝剂(MBF)对猪血红蛋白酶解的主要产物—血红素肽铁的絮凝特性。结果表明:采用溶菌酶与CTAB相结合方法,在水浴温度为65℃,时间为20 min条件下,提取絮凝基因,获得了清晰平整明亮的DNA条带,无明显弥散,DNA提取量多且断裂少,利用PCR扩增出了产絮凝基因(NOC-1)16S rRNA,测定并分析了产絮凝基因片段的1 400 bp碱基组成。该MBF对猪血红蛋白酶解主要产物,即血红素肽铁絮凝特性与溶液的pH、温度、絮凝方式等有关,当猪血红蛋白酶解溶液pH值为6.0,絮凝温度45℃,结合超声波处理,MBF对血红素肽铁的絮凝率达到最佳,且絮凝沉降规律为拥挤沉淀,絮凝机理为该菌种产生的MBF为粘多糖,分子上的活性基团(羧基、羟基、氨基等)借助离子键、氢键和范德华力,吸附血红素肽铁形成微粒,并通过架桥方式将2个或更多的微粒交联在一起从而导致絮凝。
- 张滨马美湖杨华
- 关键词：微生物絮凝剂絮凝
- Hemi Peptide-Fe果蔬饮料稳定性及安全性评价
- 在真空及低压高频脉冲电场(LHPEF)条件下,结合胰蛋白酶降解猪血红蛋白(Hb)获得的Hemi Peptide-Fe,与西红柿汁、红枣汁、甘草汁等混合,加工成Hemi Peptide-Fe果蔬饮料,对果蔬饮料的稳定性及安...
- 张滨马美湖彭国平
- 关键词：稳定性安全性评价果蔬饮料
- 文献传递
- 血红素肽-铁的分离纯化及其清除自由基能力被引量：4
- 2010年
- 目的分离纯化血红素肽-铁,并分析其清除自由基的能力。方法以聚丙烯酰胺为载体,对利用真空及低压高频脉冲胰蛋白酶降解猪血红蛋白的产物进行金属螯合亲和层析分离纯化,利用基质辅助激光解析串联飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)及生物信息学网站分析血红素肽-铁的分子结构;以维生素C(Vc)为对照,分析血红素肽-铁的抗氧化能力;以邻苯三酚法分析血红素肽-铁清除超氧阴离子的能力;以脱氧核糖法分析血红素肽-铁清除羟基自由基(·OH)的能力;以三氯甲烷-甲醇法分析血红素肽-铁对脂质过氧化的抑制作用。结果分离纯化的血红素肽-铁由139个氨基酸组成,相对分子质量为16065.08,铁离子含量为11013.5μg/L,理论pI为8.10,消光系数为6990,脂肪系数为92.73,不稳定系数为1.18,总平均疏水性为-0.023;在体外具有较强的清除超氧阴离子和抗氧化自由基能力。结论分离纯化的血红素肽-铁具有清除自由基的能力。
- 张滨马美湖
- 关键词：金属螯合亲和层析生物信息学自由基
- 红平红球菌产微生物絮凝剂的发酵条件及分离纯化被引量：2
- 2009年
- 优化了红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)产微生物絮凝剂(MBF)的发酵条件,并对该微生物絮凝剂(MBF)进行了分离纯化。结果表明:以红平红球菌为出发菌株,以廉价的蔗糖和尿素作为碳源和氮源,发酵培养液的配方为蔗糖30.0 g/L,尿素7.5 g/L,CaCl20.5 g/L,MgSO41.0 g/L,NaCl 0.2 g/L,pH 9,在30.0 L发酵罐中,以发酵温度35℃,搅拌转速350 r/min,发酵时间96 h的条件下发酵,其发酵液中絮凝率为89.31%;发酵液经离心后,用0.5%三氯甲烷∶正丁醇(4∶1)处理,利用不同浓度乙醇分级沉淀,初步分离得到粗制MBF,再通过DEAE-纤维素层析柱交换层析,最终可获得纯度高的MBF。
- 张滨马美湖杨华
- 关键词：微生物絮凝剂分离纯化
- 金属螯合亲合层析(MCAC)分离血红素肽-铁及功能活性研究被引量：1
- 2010年
- 利用聚丙烯酰胺为载体,对猪血红蛋白酶降解产物进行金属螯合亲合层析分离,以获得一种纯度高的血红素肽-铁。采用基质辅助激光解析串联飞行时间质谱(MALDI-TOF.MS)分析血红素肽-铁的分子结构,做体外清除氧自由基能力试验,结果表明:经SDS-PAGE和高效凝胶色谱法分析,分离出的血红素肽-铁纯度高;经MALDI-TOF.MS测定得血红素肽-铁分子质量约为7 529 Da;结合猪血红蛋白氨基酸顺序以及胰蛋白酶固定酶切位点,推断该血红素肽-铁分子由60氨基酸构成,氨基酸序列为GTFAKFFEKHLQDLKVHLTAAEKLSEL-HCDKSAILDLWGKVLASFSEGLKLHVDPENFR。血红素肽-铁在体外具有较强的抗氧化、清除超氧阴离子和.OH能力以及抑制脂质过氧化作用。
- 张滨马美湖
- 关键词：自由基抗氧化性
- 猪血红蛋白(Hb)脉冲酶解效果比较研究被引量：1
- 2009年
- 目的寻找一种高效快捷有效地降解猪血红蛋白(Hb)新方法。方法在波型为双向方波,电极间距离为1.2 cm,脉冲频率为200 kHz的脉冲电场下,利用胰蛋白酶在温度为37℃,水解时间为4 h条件下水解猪血红蛋白。结果在脉冲电场作用下,胰蛋白酶水解血红蛋白获得的降解产物,利用高效凝胶色谱、紫外可见扫描及SDS-PAGE蛋白质电泳检测,发现其吸收峰或色带明显多于单一利用胰蛋白酶降解血红蛋白所得降解产物的吸收峰或色带。结论当脉冲电场通过血红蛋白时,血红蛋白内部的分子结构便产生斯塔克效应(Stark effect),引起血红蛋白分子剧烈振动,从而改变其分子结构振辐、吸收峰和偶极矩,并分别引起斯塔克频率、偶极矩、极化率的改变、使血红蛋白分子结构的极化跃迁和超极化,因此,在脉冲电场作用下,促进了血红蛋白酶解反应。
- 张滨马美湖
- 关键词：脉冲电场胰蛋白酶斯塔克效应
- 血红素肽铁果蔬饮料安全性评价
- 2011年
- 在真空低压高频脉冲电场（LHPEF）条件下,结合胰蛋白酶降解猪血红蛋白（Hb）,获得HemiPeptide-Fe与西红柿汁、红枣汁、甘草汁等,按血红素肽铁10mg/L,西红柿200mL/L,红枣汁200mL/L,甘草汁20mL/L,柠檬酸0.2g/L,蜂蜜15mL/L,黄原胶0.2g/L,CMCNa0.4g/L,海藻酸钠0.4g/L,胭脂红适量,维生素C2.0g/L配方,用纯净水调节至1L,加工成HemiPeptide-Fe果蔬饮料,并对该饮料安全性进行评价进行试验。结果表明：HemiPeptide-Fe果蔬饮料在大鼠体内HemiPeptide-Fe表观消化率达83.7%,LD50为7095mg/kgbw,95%置信区间为7968~6222mg/kgbw。急性毒性试验和长期毒性中小鼠外观及解剖特征图与对照组相比无明显变化。
- 张滨马美湖彭国平方俊
- 关键词：稳定性安全性评价果蔬饮料
- 基于真空LHPEF结合胰蛋白酶降解猪血红蛋白
- 2010年
- 在真空及低压高频脉冲（LHPEF）条件下，结合胰蛋白酶降解猪Hb，利用高效凝胶色谱、Native-PAGE蛋白电泳及紫外扫描来测定其降解效果。结果：在37℃温度下，1.88 V、200 kHz的LHPEF处理猪Hb，电导率为3.45326 ×10^5 μs/cm（对照组为0.645×10^4 μs/cm）。紫外扫描曲线图中的真空LHPEF胰蛋白酶降物中有8个特征吸收峰，而对照组中为6个吸收峰，Native- PAGE蛋白质电泳图中有13个明显色带，而对照组中只有6个色带，高效凝胶色谱图中的特征吸收峰为48个，对照组中7个特征吸收峰。
- 张滨马美湖杨华向华
- 关键词：胰蛋白酶真空
