黑龙江省教育厅科学技术研究项目(10551311)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：杨自金王丽敏王海燕朱晓峰罗志宏更多>>
- 相关机构：佳木斯大学附属第一医院连云港市第一人民医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 神经营养因子与神经干细胞移植联合治疗缺氧缺血性脑损伤的实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的观察神经营养因子与神经干细胞(NSCs)联合移植对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠的治疗效果。方法取新生24h的Wistar大鼠海马NSCs进行培养、鉴定。选7日龄Wistar大鼠制备HIBD动物模型,7d后行损伤侧侧脑室移植。将实验大鼠随机分为9组:正常组、模型组、磷酸盐缓冲液移植组、NSCs移植组、BDNF组、BDNF+NSCs移植组、NT-3组、NT-3+NSCs移植组、BDNF+NT-3+NSCs移植组。移植4周后进行功能实验,取脑组织进行免疫组化及免疫荧光检查。结果从新生大鼠海马可成功培养出NSCs,并表达NSCs的标志物神经巢蛋白(neuroepi-thelial stem cell protein,Nestin),NSCs可分化为神经元及星形胶质细胞。Y迷宫实验:NSCs移植组达到学会的次数(163±11.60)n,正确记忆次数(5.00±1.13)n;BDNF组(150.00±8.94,5.17±1.47)n;BDNF+NSCs移植组(111.25±13.56,6.23±1.60)n;NT-3组(153.56±10.35,5.07±1.03)n;NT-3+NSCs移植组(117.27±11.4,6.30±1.1)n;BDNF+NT-3+NSCs移植组(110±11.55,6.30±1.1)n。悬吊实验:NSC移植组平均(30.10±11.8)s;BDNF组(36.25±10.98)s;BDNF+NSCs移植组(43.6±10.56)s;NT-3组(34.95±10.15)s;NT-3+NSCs移植组(40.64±10.6)s;BDNF+NT-3+NSCs移植组(42.20±6.25)s。斜坡试验:NSCs移植组平均(20.3±8.25)s;BDNF组(14.33±2.88)s;BDNF+NSC移植组(11.17±2.48)s;NT-3组(15.26±2.98)s;NT-3+NSC移植组(12.8±3.65)s;BDNF+NT-3+NSCs移植组(12.9±5.18)s。说明各联合移植组大鼠学习记忆能力及神经功能与NSCs移植组比较,明显改善(P<0.05),而NSCs组大鼠学习记忆能力及神经功能与HIBD组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各联合移植组损伤侧皮层、海马存活的NSCs数量(BDNF+NSC移植组9.31±0.71个,10.10±1.65个;NT-3+NSCs移植组6.18±1.83个,8.18±3.06个;BDNF+NT-3+NSCs移植组为9.58±1.61个,11.45±1.36个)与NSCs组(3.33±0.24个,4.22±0.33个)比较明显增多(P<0.05),且NSCs分化为神经元的比例明显增多,与NSCs移植组比较,有统计学意义(P<0.05),但双因子联合移植组与其单因子移�
- 王海燕朱晓峰王丽敏杨自金罗志宏刘冬炎原德新吴英杰王淑贤
- 关键词：神经营养因子干细胞
- 神经营养素-3体外诱导新生鼠海马神经干细胞定向分化
- 2007年
- 目的探讨神经营养素-3(NT-3)对神经干细胞(NSCs)定向分化的影响。方法取24h龄新生鼠海马组织,以无血清培养基获得NSCs,随即分为实验和对照组。实验组用基础培养液加50g/L胎牛血清(FBS)和20μg/LNT-3诱导其分化;对照组用基础培养液加50g/LFBS。用免疫荧光及流式细胞仪法检测分化得到神经元特异性烯醇化酶(NSE)神经元及阳性神经元比例。结果随着分化培养时间延长,二组NSE阳性神经元渐增加;实验组NSE阳性神经元的比例在分化培养第3天达到高峰,约63%,对照组仅29%,二组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论NT-3体外促进NSCs向神经元定向分化,并可提高其分化比例。
- 杨自金
- 关键词：神经干细胞神经营养素-3分化
- 新生大鼠海马神经干细胞的无血清培养及鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的探讨新生大鼠海马神经干细胞无血清培养的最佳方法,观察神经干细胞的生长、增殖及分化的特点。方法分离新生24h大鼠的海马组织,分别采用含碱性成纤维生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、及bFGF+EGF的无血清条件培养基进行悬浮培养,采用神经巢蛋白(nestin)免疫荧光染色方法鉴定神经干细胞,通过胎牛血清诱导分化,鉴定分化细胞,进一步证实神经干细胞。结果bFGF+EGF能更好的诱导神经干细胞增殖,培养细胞呈nestin抗原阳性,分化后的细胞表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞特异性抗原。结论bFGF+EGF的无血清培养基可用于培养大鼠海马神经干细胞。
- 杨自金王海燕王丽敏
- 关键词：神经干细胞细胞培养增殖分化
