国家自然科学基金(81170358)
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 相关作者：杨桂连李景梅郝凤奇石少华叶丽萍更多>>
- 相关机构：吉林农业大学长春理工大学更多>>
- 发文基金：吉林省世行贷款农产品质量安全项目国家自然科学基金吉林省科技厅科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 乳酸菌Nisin诱导表达载体的构建和鉴定被引量：6
- 2012年
- 为构建乳酸菌Nisin诱导表达载体,实现外源目的基因在乳酸菌中的可控表达,本研究以产Nisin乳酸乳球菌染色体DNA为模板,采用PCR技术扩增双组份调控元件nisRK基因和诱导型启动子nisA基因,并克隆至乳酸菌-大肠杆菌穿梭质粒pW425et中,以nisA基因替换原组成型启动子P32,构建乳酸菌Nisin诱导表达载体pW425N。为检测载体的诱导表达功能,以gfp基因作为报告基因,构建重组表达载体pW425N-gfp,以分离自仔猪肠道内嗜酸乳杆菌为受体菌,电转化法制备重组乳酸菌pW425N-gfp/L.acidophilus。结果表明,重组载体能够在Nisin诱导下表达目的荧光蛋白,并且最佳Nisin有效浓度为30 ng/mL,最佳诱导时间为3 h。该表达载体的构建为外源功能性蛋白在乳酸菌中的诱导表达奠定基础。
- 郝凤奇李景梅杨桂连
- 关键词：乳酸菌NISIN
- H9N2亚型禽流感病毒HA-DCpep融合基因重组乳杆菌的构建及免疫原性分析被引量：3
- 2014年
- 为了构建HA-DCpep融合基因重组乳杆菌并检测其表达产物的免疫原性,以pSIP409-HA质粒为模板,采用PCR方法将HA基因和DCpep基因融合。将目的基因克隆至pGEM-T载体中,进行测序。再将阳性基因亚克隆至大肠杆菌-乳杆菌穿梭表达载体pSIP409中,电转化入植物乳杆菌NC8中,经SppIP诱导后对表达产物进行Western-blot分析。结果显示,重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep的裂解物中出现大小约为64ku的反应条带,大小与预期结果相符,表明重组融合蛋白具有良好的反应原性。重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep口服免疫SPF雏鸡后,在免疫后第14天可被检出特异性HI抗体,28d后达到高峰。结果表明,应用重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep免疫雏鸡能刺激机体产生特异性体液免疫应答反应,这为研制预防禽流感的重组乳杆菌口服制剂奠定了基础。
- 石少华杨文涛叶丽萍黄海斌蔡若鹏李雨宸闫晓月王春凤杨桂连
- 关键词：禽流感病毒免疫原性
- 猪RAG2蛋白的基因克隆及原核表达
- RAG-1和RAG-2基因是未成熟B细胞和T细胞分化所必须的,且只在初级淋巴器官中表达,而不在成熟细胞中表达,这个特征使RAG-1或RAG-2成为研究这些器官发育的一个实用的指标。然而,目前市场上人和兔的RAG蛋白的特异...
- 晋玉北杨文涛黄科谚刘晶陈宏亮刘琼姜延龙杨桂连王春凤
- 关键词：克隆原核表达
- 文献传递
- 益生菌在肝脏疾病方面的应用
- 各种动物和人类肠道中存在着大量微生物,其总量远远超过宿主的体细胞和生殖细胞数量,这些定殖微生物被称为微生物菌群,另外,在同一宿主内,宿主的年龄、遗传背景、日粮和健康状况等多种因素会影响微生物菌群的组成。人胃肠部位定植了5...
- 曾庆丰杨文涛杨桂连王春凤
- 文献传递
- 乳酸菌作为口服药用蛋白载体的应用研究进展
- 多种乳酸菌(LAB)以其安全性、遗传可操作性及良好的定殖能力成为口服药用蛋白在胃肠道发挥局部作用的潜在运载工具。过去十多年的动物试验表明,通过口服途径给药的重组乳酸菌具有明显的益生作用,目前关于乳酸菌作为口服药用蛋白载体...
- 蔡若鹏杨桂连王春凤
- 关键词：乳酸菌
- 文献传递
