国家自然科学基金(30470805)
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：大连医科大学附属第一医院长治医学院附属和济医院大连医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”山西省高等学校科技开发基金更多>>
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- 大鼠肾小球系膜细胞活性氧簇JAK2/STAT5通路与TIMP-1之间的关系及对其凋亡的影响
- 2010年
- 目的:探讨高糖(HG)条件下大鼠肾小球系膜细胞(RMC)活性氧簇(ROS)、JAK2/STAT5信号通路与金属蛋白酶1组织抑制剂(TI MP-1)之间的关系及对其凋亡的影响。方法:在HG培养条件下的RMC中,根据是否使用DPI(NADPH氧化酶特异性抑制剂,可抑制ROS产生)和AG490(JAK2特异性抑制剂)刺激24 h,将RMC分为HG组、HG+AG490组、HG+DPI组和HG+AG490+DPI组四组。采用流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率,RT-PCR检测各组RMC Bcl-xl、Cyclin D1、P27kip1、JAK2和TI MP-1 mRNAs的表达,Western blot检测胞浆中JAK2、STAT5及相应磷酸化蛋白的表达。结果:HG组、HG+AG490组、HG+DPI组和HG+AG490+DPI组的细胞总凋亡率分别为:(10.69±0.26)%、(20.52±0.51)%、(24.56±0.36)%和(26.01±0.28)%;加入AG490和(或)DPI后RMC总凋亡率明显升高(P<0.01),Bcl-xl、Cyclin D1、JAK2和TI MP-1 mRNAs表达显著减少,P27kip1 mRNA表达增加。AG490和(或)DPI可使各组RMC P-JAK2和P-STAT5的表达显著减少,尤其在加入DPI后减少更加明显。结论:HG条件下JAK2/STAT5信号通路受ROS调控;阻断ROS生成和(或)JAK2/STAT5信号通路,可使RMC TI MP-1 mRNA表达减少,凋亡增加。
- 温文斌林洪丽吴泰华马艳梅夏丽华单路娟
- 关键词：系膜细胞活性氧簇金属蛋白酶1组织抑制剂凋亡
- 金属蛋白酶1组织抑制剂在慢性肾衰竭大鼠钙化动脉中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的探讨金属蛋白酶1组织抑制剂（TIMP-1）是否参与慢性肾衰竭大鼠动脉钙化形成。方法雄性Wistar大鼠按随机数字表法分组，其中健康对照组8只，实验组36只。用2％腺嘌呤250mg·kg^-1·d^-1灌胃制备动脉钙化模型。von Kossa染色观察主动脉、股动脉、肾动脉和冠状动脉钙化情况。RT—PCR和Western印迹检测主动脉TIMP-1表达。免疫组织化学方法检测TIMP-1、骨桥蛋白（OPN）、核心结合因子α1（Cbfα-1）在主动脉的表达。结果实验组大鼠给药2周后出现明显慢性肾衰竭表现，BUN、Scr、血磷、钙磷乘积和全段甲状旁腺素（iPTH）显著高于对照组（P〈0．01）；给药6周后主动脉、股动脉、肾动脉和冠状动脉中层出现不同程度的钙化。RT—PCR和Western印迹结果显示，实验组大鼠主动脉TIMP-1表达较对照组上调（P〈0．05），随时间延长呈上升趋势。免疫组化的结果显示，给药后第2、4、6、8周主动脉平滑肌细胞TIMP-1蛋白表达均显著高于对照组（P〈0．05）；钙化主动脉出现Cbfα-1的阳性表达；OPN表达显著增多（P〈0．01）。TIMP-1的表达和OPN及Cbfα-1表达均呈正相关（r=0．317，P=0．000；r=0．485，P=0．000）。结论大鼠腺嘌呤肾衰竭模型血管钙化的病理变化与人类慢性肾衰竭血管钙化相似，是研究慢性肾衰竭血管钙化周期较短、较好的动物模型。TIMP-1高表达和慢性肾衰竭动脉血管钙化相关。
- 冯杰林洪丽吴泰华孙艳玲王陆
- 关键词：金属蛋白酶1组织抑制剂肾功能衰竭
- 慢性肾脏病金属蛋白酶组织抑制剂-1和临床分期关系的研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨慢性肾脏病(CKD)患者血、尿金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)质量浓度和CKD分期的关系。方法选取大连医科大学附属第一医院肾内科2005年10月至2006年3月住院治疗的CKD患者,用酶联免疫法(ELISA)测定122例CKD不同分期患者和40名健康对照者血、尿TIMP-1质量浓度,测定血胱蛋白酶抑制剂C(CystC)、甲状旁腺激素(PTH)。分析血、尿TIMP-1质量浓度和CKD分期及血CystC的相关性。结果CKD患者血及尿TIMP-1质量浓度较对照组明显增高(P<0.01),且随着CKD分期的增加而升高(P<0.05),血TIMP-1于CKD1期开始明显增高并持续至终末期;血CystC于CKD2期开始升高;尿TIMP-1于CKD3期开始升高。血、尿TIMP-1质量浓度与血CystC呈正相关(r分别为0.733、0.520,P<0.01)。结论血TIMP-1质量浓度是评价慢性肾脏病肾纤维化程度一个较好的指标。
- 冯杰林洪丽谢华王可平孙艳玲王陆
- 关键词：慢性肾脏病金属蛋白酶组织抑制剂-1肾小球滤过率肾脏纤维化
- 肾小球系膜细胞金属蛋白酶1组织抑制剂对血管内皮生长因子及转化生长因子β_1表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨高糖(葡萄糖25mmol/L)条件下大鼠肾小球系膜细胞(RMC)金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)对血管内皮生长因子(VEGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法:用高糖培养基体外培养未转染及分别用pcDNA3空载体、人反义TIMP-1基因重组真核表达载体转染的RMC24h,将细胞分为未转染组、空载体组及反义组,并设正常培养条件下的RMC作为正常对照组。RT-PCR检测各组RMC TIMP-1、VEGF及TGF-β1mRNA的表达。Western印迹检测胞质中TIMP-1、VEGF及TGF-β1蛋白的表达。免疫荧光检测各组RMC胞质中VEGF的表达。结果:高糖培养条件下未转染组及空载体组RMC大鼠TIMP-1、VEGF及TGF-β1mRNA表达均较对照组明显增加(P<0.01),而此两组间相应指标表达差异无统计学意义;反义组大鼠TIMP-1、VEGF mRNA表达较未转染组显著降低(P<0.01),而TGF-β1 mRNA表达则无变化。Western印迹也得到相同的结果。免疫荧光检测发现,未转染组及空载体组VEGF荧光表达较对照组显著增强,反义组荧光则较未转染组明显减弱。结论:高糖可促进RMC TIMP-1、VEGF及TGF-β1表达增加。在高糖条件下,TIMP-1可能位于VEGF上游,促进其表达;而TGF-β1表达并不受TIMP-1调控,高糖可能通过其他途径上调其表达。
- 温文斌赵银娥林洪丽马艳梅单路娟郭广庆师帅帅
- 关键词：系膜细胞金属蛋白酶1组织抑制剂血管内皮生长因子转化生长因子Β1
- JAK／STAT通路在金属蛋白酶1组织抑制剂抑制肾小球系膜细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2008年
- 目的探讨金属蛋白酶1组织抑制剂（TIMP-1）抑制大鼠肾小球系膜细胞（RMC）凋亡与Janus激酶／信号转导和转录激活子（JAK／STAT）通路的关系。方法用无血清培养基体外培养pcDNA3空载体、人正义、反义TIMP-1基因重组真核表达载体转染RMC。根据是否加JAK2特异性抑制剂AG490刺激24h，将细胞分为未转染组、未转染＋AG490组、空载体组、空载体＋AG490组、正义组、正义＋AG490组、反义组和反义＋AG490组。另外设正常培养条件下的RMC作为正常对照组。应用流式细胞技术检测各组RMC的凋亡率。RT-PCR检测TIMP-1、bcl—xl、cyclin D1、p27^kip1和JAK2 mRNA的表达。Western印迹检测胞质中JAK2、STAT3、STAT5及其相应磷酸化蛋白（p-JAK2、p-STAT3、p-STAT5）的表达。结果未转染组、正义组及反义组RMC凋亡率分别为（10．59±0．96）％、（7．08±0．43）％和（21．91±0．25）％，各组间差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。在未加AG490的各组RMC中，bcl-xl和cyclin D1 mRNA在正义组中表达最高，反义组中最低，p27^kip1 mRNA在反义组中表达最高。加入AG490后，各组细胞的凋亡率均显著增加（P〈0．01）；TIMP-1、bcl-xl和cyclin D1 mRNA表达均减少；p27^pik1 mRNA表达均增加。在未加AG490的各组细胞中，p-JAK2、p-STAT3和p-STAT5在正义组中表达最高，反义组中最低。加入AG490后上述蛋白表达均减少，且正义＋AG490组最高，反义＋AG490组最低。结论TIMP-1表达受JAK／STAT信号通路调控，后者可通过上调前者的表达抑制RMC凋亡；TIMP-1通过JAK／STAT信号通路抑制RMC凋亡。bcl—xl、cyclin D1和p27^kip1参与了上述过程。
- 温文斌林洪丽吴泰华孙艳玲马艳梅夏丽华
- 关键词：金属蛋白酶1组织抑制剂系膜细胞JAKSTAT
- 血液透析患者血清Fractalkine、TIMP-1水平的变化及意义
- 2008年
- 目的测定维持性血液透析(MHD)患者血清Fractalkine(FKN)及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)水平的变化,探讨FKN、TIMP-1与炎症的关系。方法选取长期规律血液透析(HD)的患者30例,应用ELISA法检测其透析前、后的FKN、TIMP-1血清水平,应用免疫散射比浊法测定透析前血清超敏C反应蛋白(Hs-CRP)水平,同时检测其血白蛋白(ALb)、血红蛋白(Hb)、体重指数(BMI)、透析充分性指标(Kt/V)及透析前后尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平。结果MHD患者HD后的血清FKN水平比HD前升高(P<0.01),HD后的TIMP-1水平比HD前升高(P<0.01)。HD前血清FKN水平与HD前Hs-CRP呈正相关(r=0.387,P<0.05),HD前血清FKN与HD前TIMP-1、透析年限无相关性(P>0.05);HD前TIMP-1水平与HD前Hs-CRP、透析年限无相关性(P>0.05)。HD前后FKN差值与HD前Hs-CRP呈正相关(r=0.291,P<0.05),与HD前后TIMP-1差值及透析年限无相关性(P>0.05);透析前后TIMP-1差值与HD前Hs-CRP呈正相关(r=0.226,P<0.05),与透析年限无相关性(P>0.05)。结论血液透析患者透析后血清FKN及TIMP-1水平增高。HD前后FKN及TIMP-1水平的瞬时变化可能与炎症有关。
- 王玲林洪丽赵光本乔世岩王可平杭宏东于长青
- 关键词：金属蛋白酶组织抑制剂-1血液透析FRACTALKINE微炎症状态
- 组织基质金属蛋白酶抑制剂-1与尿毒症血管中膜钙化被引量：3
- 2008年
- 目的研究终末期尿毒症患者桡动脉血管壁上基质金属蛋白酶及其抑制剂表达与钙盐沉积的关系,探讨基质金属蛋白酶及其抑制剂是否参与血管钙化。方法选择大连医科大学附属第一医院肾内科80例尿毒症患者的桡动脉为尿毒症组;10例因上肢外伤行截肢手术时取得桡动脉为正常对照组。HE染色观察血管;应用von Kossa染色判断钙盐沉积程度;应用免疫组化方法测定uMP-9、TIMP-1、骨桥蛋白(OPN)、I型胶原、核心结合因子(Cbfa1)在血管壁上的表达;同时测定外周血中钙、磷、三酰甘油(TG)、总胆固醇(Tch)、低密度脂蛋白(LDL)、白蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)、甲状旁腺激素(iPTH)、C反应蛋白(CRP)。结果80例尿毒症桡动脉血管标本中出现血管钙化36例,发生率45%;其中轻中度钙化25例,重度钙化11例,钙化均发生在血管中膜。钙化的血管中膜均有MMP-9、TIMP-1、OPN、I型胶原、Cbfa1的阳性表达(P<0.01),无钙化的44例血管中有33例血管中膜有OPN的表达,29例有I型胶原的表达,但无Cbfa1的阳性表达。对照组血管均无中膜钙化表现,亦无OPN表达。两组患者的体重指数、血钙、三酰甘油(TG)、总胆固醇(Tch)、低密度脂蛋白(LDL)、白蛋白(ALB)差异无统计学意义。尿毒症患者的平均收缩压、血磷水平、钙磷乘积、iPTH、C反应蛋白水平明显高于对照组(P<0.01)。血红蛋白水平明显低于对照组(P<0.01)。结论尿毒症患者普遍存在血管钙化,uMP-9、TIMP-1在尿毒症患者桡动脉的血管壁表达和血管钙化程度相关,提示组织基质金属蛋白酶系统在尿毒症血管钙化中可能有重要作用。
- 王陆林洪丽王可平谢华黄琳
- 关键词：尿毒症桡动脉血管钙化组织基质金属蛋白酶抑制剂-1
- 尿毒症患者血清组织金属蛋白酶抑制因子-1与血管钙化关系的研究
- 2008年
- 目的研究尿毒症患者血中组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)与血管钙化的关系。方法选择2005年10月至2006年2月在大连医科大学第一附属医院肾内科行前臂动-静脉内瘘成形术的尿毒症患者60例为尿毒症组,对照组为同期就诊上臂外伤患者或体检者共60例,肾功能均正常。尿毒症组分成冠状动脉钙化(CAC)组和非冠状动脉钙化(NCAC)组。应用酶联免疫吸附试验测定两组血清TIMP-1。应用vonKossa染色判断桡动脉钙盐沉积程度。应用多层螺旋CT扫描心脏,并计算钙化积分以评估CAC情况。同时测定外周血生化指标。结果尿毒症组收缩压、血磷、钙磷乘积、低密度脂蛋白(LDL)、甲状旁腺素(iPTH)、C-反应蛋白(CRP)明显高于对照组(P<0.01),血红蛋白明显低于对照组(P<0.01)。CAC组年龄、体重指数、糖尿病患者例数、透析时间、血磷、钙磷乘积、CRP、胆固醇和LDL均高于NCAC组(P<0.01)。尿毒症患者中桡动脉血管钙化28例(46.67%)。尿毒症组血清TIMP-1质量浓度明显高于对照组(P<0.01)。结论尿毒症患者普遍存在血管钙化,血TIMP-1质量浓度与血管钙化密切相关,提示组织基质金属蛋白酶系统在尿毒症血管钙化中可能有重要作用。
- 王陆林洪丽王可平冯杰
- 关键词：尿毒症血管钙化桡动脉冠状动脉组织金属蛋白酶抑制因子-1
