陕西省教育厅科研计划项目(009JK427)
- 作品数:7 被引量:16H指数:2
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- 液态甲醛对雄性小鼠生殖毒性的研究被引量:4
- 2012年
- 为研究液态甲醛对雄性昆明鼠的生殖毒性效应,选用雄性昆明鼠16只,分成4组,采用腹腔注射染毒的方法,各组浓度分别为2mg/kg(低)、20mg/kg(中)和200mg/kg(高),给药量为每只鼠0.1mL,对照组腹腔注射等体积的生理盐水,每天上午10:00注射1次,持续3周。处死并剖检试验鼠,取其睾丸和附睾处理,计算小鼠睾丸的脏器系数,精子总数及精子存活率,并观察精子畸形数和睾丸组织的病理改变。与对照组比较,随着染毒剂量的增加,睾丸的脏器系数减小,精子总数和存活率明显下降,低剂量组与对照组差异显著(P<0.05);中、高剂量组与对照组比较差异极显著(P<0.01);中、高剂量组的精子畸形数量显著增多;各染毒组小鼠的睾丸组织均具有明显的病理改变和损伤。说明甲醛对雄性小鼠的生殖器官具有明显的毒害作用。
- 李亚琳
- 关键词:甲醛生殖毒性精子存活率脏器系数
- 小鼠肝星状细胞的分离纯化新方法的建立与应用被引量:2
- 2012年
- 目的介绍一种简便、经济、高产的小鼠肝星状细胞(HSC)分离方法,为肝纤维化的研究提供细胞模型。方法参照国内外方法并加以改良,采用酶灌注预消化及随后的震荡充分消化,合并Medimachine系统制成单细胞悬液。用人淋巴细胞分离液直接铺梯度,采用单层梯度离心法一步分离HSC。结果两只小鼠HSC得率可达1×106个,台盼蓝染色显示细胞活率达92%。初分离的HSC在328nm激发光下自发蓝绿色荧光,油红染色及结蛋白免疫细胞化学染色鉴定纯度达90%。结论建立了一种实用的小鼠HSC分离方法,可用于肝纤维化和原代HSC的生物学行为研究。该方法简便、实用、高产,不需特殊设备,便于推广应用。
- 李亚琳
- 关键词:枯否细胞细胞分离肝星状细胞
- 新城疫病毒在肿瘤治疗中的研究进展被引量:2
- 2012年
- 新城疫病毒(NDV)是一种新兴的肿瘤生物治疗因子,反向遗传学操作技术的成熟使其在肿瘤治疗中的应用研究越来越深入。NDV能够通过其直接的溶瘤作用杀死肿瘤细胞,也可通过感染自体肿瘤细胞制成疫苗对患者进行主动特异性免疫治疗。但直接溶瘤效应会对患者产生一定的负面影响,自体肿瘤疫苗的免疫治疗也不能彻底杀死肿瘤细胞。目前,以NDV为复制型病毒载体的肿瘤基因治疗已成为该病毒肿瘤生物治疗的研究热点,这种基因治疗方法被认为是人类征服癌症的潜在手段。论文综述了NDV在肿瘤治疗中的研究与应用,对其溶瘤及抗肿瘤免疫学机制进行了分析,并对NDV作为载体的肿瘤基因治疗前景进行展望。
- 李亚琳
- 关键词:新城疫病毒基因治疗肿瘤
- 新城疫病毒抑制肝星状细胞活化的初步研究
- 2013年
- 目的:探讨新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)在活化肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)中的复制对HSC的活化增殖以及细胞生物学功能的影响。方法:用不同滴度的NDV溶瘤株Italien(NDV-Italien)感染经转化生长因子-β1(trans-formation growth factor-β1,TGF-β1)刺激活化的人HSC系LX-2。MTT法检测NDV对细胞增殖率的影响。免疫荧光显微镜技术检测活化标志物α-SMA的表达变化。结果:NDV的感染抑制了LX-2细胞的增殖,细胞增殖率和病毒滴度呈负相关。与未刺激组相比,NDV在TGF-β1刺激的LX-2细胞中的增殖抑制率提高,LX-2细胞的活化标志物α-SMA的表达显著性下调。结论:NDV在活化LX-2细胞中的复制具有抑制细胞增殖和HSC活化的作用。
- 李亚琳
- 关键词:新城疫病毒肝星状细胞转化生长因子-Β1
- 新城疫病毒感染活化的人肝星状细胞系LX-2被引量:1
- 2012年
- 目的探讨新城疫病毒(NDV)在活化肝星状细胞(HSC)中的复制情况。方法用转化生长因子β1(TGF-β1)刺激人肝星状细胞LX-2,MTT法检测细胞的增殖率,RT-PCR检测活化相关基因的mRNA表达。用NDFLtag-EGFP感染不同传代的LX-2细胞和原代分离培养以及TGF-β1刺激活化的HSC,荧光显微镜观察NDV在细胞中的复制。用流式细胞术(FACS)检测NDFLtag-EGFP和NDV-Italien在LX-2细胞中的复制。结果 TGF-β1能够刺激LX-2细胞的活化。NDV随着LX-2细胞的连续传代活化以及TGF-β1刺激活化,其在细胞中的复制率也逐渐增加,分别从(15.65±0.92)%增加到(23.05±1.5)%、从(12.8±1.4)%增加到(22.7±1.7)%(P<0.05)。原代分离培养的小鼠HSC,随着细胞的传代次数增加和TGF-β1的刺激,NDV也表现出较高的复制效率。结论 NDV能在活化的HSC中高效复制,LX-2的活化易化了NDV在其中的复制。
- 李亚琳
- 关键词:新城疫病毒肝星状细胞活化
- 甲醛对小鼠肝脏毒性作用的研究被引量:9
- 2013年
- 为探讨甲醛对小鼠肝脏的毒性作用,将36只雄性昆明小鼠随机分成3个染毒组和1个对照组,每组9只。采用腹腔注射染毒的方法,每天上午10:00注射不同浓度的甲醛溶液,每次0.1mL/只。处理后第10、20、30天每组各处死3只小鼠,肉眼及病理切片观察其肝脏形态的改变,检测并计算肝脏脏器系数以及离体肝细胞的存活率。与对照组相比,染毒小鼠出现明显的病理变化,肝脏表面出现坏死斑点,肝细胞浊肿、胞浆疏松化,肝脏的脏器系数及肝细胞存活率均有所下降。试验证明了甲醛对小鼠肝脏组织及细胞具有毒性作用,且浓度越高,染毒时间越长,其毒性效应越显著。
- 李亚琳
- 关键词:甲醛肝脏毒性作用
- 新城疫病毒对CCl_4诱导的小鼠肝纤维化的抑制作用研究
- 2013年
- 目的观察新城疫病毒(NDV)对CCl4诱导的小鼠肝纤维化的抑制作用。方法昆明小鼠腹腔注射CCl4/花生油溶液,每周2次,连续8周,制作肝纤维化模型。最后一次CCl4注射后3d由尾静脉注射NDV 1次或3次,每次注射间隔24h,注射完毕24h后处死动物。取出肝脏进行大体形态观察,行HE和天狼猩红染色观察肝组织病理学改变,Western blotting检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果 CCl4诱导8周后,小鼠肝脏出现明显纤维化表现,可见肝脏质硬、表面粗糙不平、大量密集分布的白色点状斑块。HE染色显示纤维化肝脏组织结构松散,窦周隙增大。天狼猩红染色显示胶原异常沉积。而NDV注射3次后,小鼠肝脏表面白色斑点显著减少,胶原沉积降低。Western blotting结果表明,α-SMA表达水平随NDV注射次数增加而降低。结论 NDV能有效抑制CCl4诱导的小鼠肝纤维化的发生发展。
- 李亚琳
- 关键词:新城疫病毒四氯化碳