澳门特别行政区科学技术发展基金(0392009A)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：秦笙关文达杨子峰周荣莫自耀更多>>
- 相关机构：广州医学院第一附属医院广东省中医院澳门大学更多>>
- 发文基金：澳门特别行政区科学技术发展基金广州市医药卫生科技项目呼吸疾病国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 呼吸道合胞病毒NS1基因原核表达及其免疫原性分析
- 2012年
- 目的原核表达呼吸道合胞病毒(RSV)非结构NS1蛋白,并对其免疫特性进行研究。方法采用PCR技术获得NS1基因,将其插入pET41a(+)载体上,导入大肠杆菌后诱导表达;利用GST亲和层析柱对诱导表达的NS1蛋白进行纯化,免疫动物制备抗体,Westernblot法鉴定抗体的特异性。结果重组质粒经酶切鉴定和DNA序列测序完全正确,经IPTG诱导后融合蛋白在大肠杆菌BL21-DE3中得到高效表达,表达产物经超声破碎和GST亲和层析纯化获得重组蛋白,分子量约42000Mr,以抗NS1蛋白的多克隆抗体为一抗进行Westernblot检测,结果只有RSV感染细胞的样品在15000Mr处有特异性带显示,其他病毒感染的细胞和阴性对照没有相应条带。结论 NS1基因得到高效表达,免疫制备得到的抗体与RSV感染细胞有特异性反应,与其他常见呼吸道病毒感染细胞无交叉免疫反应。
- 刘昆陈俏连伍时冠潘思华李海涛杨子峰关文达秦笙
- 关键词：呼吸道合胞病毒非结构蛋白蛋白纯化
- 2009年广州地区季节性甲型流感病毒对烷胺类药物耐药性分析被引量：6
- 2011年
- 目的 分析2009年1-10月份广州地区季节性甲型流感病毒对烷胺类药物的耐药情况,为临床预防和治疗季节性甲型流感提供参考依据.方法 选取2009年1-10月份广州地区6家医院分离的季节性甲型流感病毒株311株,其中H1亚型159株,H3亚型152株.对病毒的毒株基质蛋白（MP）基因进行序列测定,利用数据库和软件进行生物信息分析,并测定软件随机抽取的临床分离的H1和H3病毒株（各10株）对金刚烷胺的药物敏感度,分析广州地区2009年1-10月份季节性甲型流感病毒的耐药性和基因重组情况.结果 159株H1亚型流感病毒中148株对金刚烷胺耐药（93.1%） 152株H3型流感病毒均对金刚烷胺耐药（100%） 除1株H1亚型流感病毒发生V27A/S31N双重位点突变外,其余均为S31N单位点突变 159株H1亚型流感病毒中MP基因B型（人类）97株,F型（欧洲/澳洲鸟类）62株 152株H3亚型病毒的MP基因均为B型.结论 广州地区季节性甲型流感病毒对烷胺类药物的耐药比例高,且H1亚型流感病毒与欧洲/澳洲鸟类流感病毒可能存在MP基因交换.
- 杨子峰关文达徐国荣李铭源莫自耀罗翌董婉妮王玉涛秦笙占扬清张雪黄群娣招穗珊周荣陈荣昌钟南山
- 关键词：流感病毒A型耐药性
