湖北省教育厅重点项目(D20102103)
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 相关作者：余明华王珺王燕孙晓东彭新春更多>>
- 相关机构：湖北医药学院武汉大学湖北医药学院附属太和医院更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SiRNA阻断对人结肠癌SW480细胞DLL4/Notch信号通路的影响
- 2010年
- 目的:探讨DLL4基因在人结肠癌SW480细胞中的表达及利用RNAi技术对DLL4基因表达的沉默作用,为临床基因治疗结直肠癌提供一个可选择的靶点和方法。方法:针对DLL4基因的DNA设计具有特异性的SiRNA,经脂质体转染人结肠癌SW480细胞,采用免疫组化方法检测空脂质体组和转染组DLL4基因表达有否阻断。结果:DLL4在SW480细胞对照组和空脂质体组中高表达,转染后,DLL4表达显著降低(P<0.05)。结论:RNAi技术能够有效抑制DLL4基因的表达。
- 魏巍余明华胡承江徐少勇
- 关键词：RNAI技术人结肠癌DLL4
- 阻断Notch信号途径能有效抑制A549细胞增殖被引量：2
- 2012年
- 目的 Delta-like 4(DLL4)是Notch信号通路的配体之一,是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明DLL4的高表达与肺腺癌转移预后密切相关。该文旨在研究DLL4在A549细胞中的表达,以及DLL4基因表达对人A549细胞增殖与凋亡的影响。方法 (1)体外培养A549细胞,免疫细胞化学法检测DLL4在A549细胞中的表达及定位;(2)设计并化学合成靶向DLL4基因的siRNA序列,lipofectamineTM2000介导DLL4 siRNA转染A549细胞,RT-PCR进行DLL4-mRNA定量,Western blot分别检测A549细胞DLL4蛋白的改变;(3)四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞的存活和生长变化;(4)激光共聚焦显微镜检测Annexin V-FITC标记的A549细胞的细胞凋亡比率。结果 (1)A549细胞表达DLL4蛋白,且定位于胞浆中;(2)DLL4-mRNA和DLL4蛋白的表达在对照组与干扰组之间有显著差异(P<0.05);(3)MTT检测显示抑制DLL4表达对A549细胞的增殖有抑制作用,DLL4干扰组细胞增殖抑制率为43.85%,未处理组细胞增殖抑制率为23.81%;(4)抑制DLL4基因表达,A549细胞的凋亡比率明显升高,DLL4干扰组细胞凋亡率为(25.01±4.32)%,未处理组细胞凋亡率为(14.24±0.98)%。结论 DLL4在A549细胞表达。特异性阻断DLL4/Notch信号途径能有效抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡。
- 桑明王燕王珺孙晓东罗超龚坚彭新春余明华
- 关键词：DLL4RNA干扰A549细胞细胞增殖
- SiRNA干扰DLL4表达对A549细胞周期和凋亡的影响被引量：2
- 2011年
- 目的筛选DLL4基因的特异性小干扰RNA(small interference RNA,siRNA),探讨DLL4对A549细胞增殖、周期、凋亡的影响。方法设计、合成并筛选针对DLL4的siRNA,转染A549细胞后,以RT-PCR和Western blot检测DLL4 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测细胞增殖,激光扫描共聚焦显微镜检测细胞凋亡变化,流式细胞仪检测细胞周期改变。结果 DLL4 siRNA能够明显下调A549细胞中DLL4 mRNA和蛋白的表达。并能抑制细胞的增殖(抑制率为43.85%);促进细胞凋亡(P<0.05),G2/M期细胞比例明显增加(P<0.05)。结论 DLL4在肺癌细胞中也有表达,下调其表达后,能够抑制肿瘤细胞增殖、促进其凋亡。
- 王珺孙晓东王燕骆志国余明华
- 关键词：DLL4RNA干扰凋亡细胞周期
