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“十五”国家科技攻关计划(2001BA703805)
作品数:
3
被引量:24
H指数:2
相关作者:
郑杰
苏静
方伟岗
崔湘琳
王洁良
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相关机构:
北京大学
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发文基金:
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相关领域:
医药卫生
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文献类型
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医药卫生
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腺癌
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复旦大学附属...
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作者
2篇
由江峰
2篇
王洁良
2篇
崔湘琳
2篇
方伟岗
2篇
苏静
2篇
郑杰
1篇
王永胜
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刘雁冰
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胡震
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柳晓义
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年份
1篇
2008
2篇
2007
共
3
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肿瘤转移抑制基因1抑制前列腺癌细胞的增殖和侵袭能力
被引量:12
2008年
目的研究肿瘤转移抑制基因1(TMSG-1)转染对高转移人前列腺癌细胞体外增殖能力和侵袭能力的影响。方法将TMSG-1全长真核表达载体稳定转染人前列腺癌细胞高转移亚系PC-3M-1E8,G418筛选,逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)和Western blot方法选取TMSG-1过表达阳性克隆。通过活细胞计数、二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)比色实验、软琼脂集落形成实验检测体外细胞生长能力;Matrigel穿膜实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力。结果在稳定转染TMSG-1基因的PC-3M-1E8细胞系中,筛选出3株TMSG-1转录活性及蛋白表达水平均明显升高的细胞用于后续生物学行为实验。活细胞计数和MTT比色实验结果显示,从计数第3天起,与空载体对照组和空白对照组相比,3株正义转染组细胞生长速度均明显减慢(P〈0.05)。软琼脂集落形成实验结果显示,3株正义转染组的细胞软琼脂集落形成数与空载体对照组、空白对照组相比,均明显减少(P〈0.05),分别为26.00±3.21、13.33±1.45和32.83±2.18。Matrigel穿膜实验结果显示,正义转染的各组细胞与空载体对照组及空白对照组相比,穿膜细胞数均明显减少(P〈0.05),分别为45.33±4.16、54.00±2.83和26.33±3.79。结论TMSG-1表达上调可使高转移人前列腺癌细胞体外增殖速度、锚着不依赖性生长能力及侵袭能力明显降低,TMSG-1可能通过抑制肿瘤细胞生长和侵袭抑制肿瘤转移潜能。
苏静
由江峰
王洁良
崔湘琳
方伟岗
郑杰
关键词:
前列腺肿瘤
肿瘤转移
增殖
基因转染
人肿瘤转移抑制基因1转染对人乳腺癌细胞MDA-MB-231体外生物学行为的影响
被引量:21
2007年
目的研究人肿瘤转移抑制基因1(TMSG-1)转染引起人乳腺癌细胞 MDA-MB-231体外生物学行为的改变及对肿瘤转移表型的影响。方法构建 TMSG-1全长编码序列真核表达载体,稳定转染人乳腺癌 MDA-MB-231细胞系,G418筛选挑取 TMSG-1过表达阳性克隆。通过 MTT 比色实验、软琼脂集落形成实验检测体外细胞生长能力;Matrigel 穿膜实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力。TMSG-1瞬时转染24、48 h,分别用 Annexin-V 碘化丙啶(PI)双标流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡情况。结果从稳定转染 TMSG-1的 MDA-MB-231细胞中挑取3个 TMSG-1-FLAG 融合蛋白表达量较高的阳性克隆株用于下游生物学行为实验。MTT 比色实验及软琼脂集落形成实验结果显示,TMSG-1正义转染各组(S1、S2、S3)细胞增殖速度及克隆形成数与未转染组及转染空载体组相比均明显减低(P<0.05);Matrigel 穿膜实验显示,正义转染各组的穿膜细胞数[(72.3±8.1)个、(85.0±4.2)个、(73.5±7.8)个]与未转染组[(187.5±2.1)个]和转染空载体组[(162.3±6.8)个]相比均明显减少(P<0.01)。TMSG-1瞬时转染 MDA-MB-231细胞,转染24和48 h 均可引起细胞凋亡率的增加(P<0.05)。结论 TMSG-1表达上调可使人乳腺癌细胞 MDA-MB-231体外生长速度、锚着不依赖性生长能力及侵袭能力明显降低,细胞凋亡增加。该实验为 TMSG-1是一个新发现的肿瘤转移抑制基因提供了证据。
苏静
由江峰
王洁良
崔湘琳
方伟岗
郑杰
关键词:
乳腺肿瘤
肿瘤转移
转染
基因
中国早发性乳腺癌患者中BRCA1基因突变分析
被引量:1
2007年
目的研究中国早发性乳腺癌患者中BRCAl基因致病性突变的发生情况以及家族史在突变携带者识别中的作用。方法研究对象为来自中国4个乳腺癌临床医疗中心的188例早发性乳腺癌病例(发病年龄≤40岁),其中39例(20.1%)有乳腺/卵巢癌家族史。从外周静脉血提取基因组DNA,对BRCAl基因的全部编码区和外显子/内含子拼接区进行PER扩增。其中22例通过单链构象多态方法进行突变初筛,166例用变性高效液相色谱分析进行初筛;对发现的异常片段通过DNA直接测序的方法进行确认。对发现重复出现突变的样本,选取5个与BRCAl基因连锁的标记(D17S855、D17S1322、D17S1323、D17S1326和D17S1327)进行等位基因型分析。结果在15例(8.0%)患者中发现有12个BRCAl基因的致病性突变,其中BRCAl1100delAT和5589del8突变分别在3个和2个患者中发现。在39例同时伴有乳腺/卵巢癌家族史的病例中共发现有9例(23.1%)携带突变。有(无)乳腺癌家族史的早发性乳腺癌病例间BRCAl基因的突变率的差异有统计学意义(P:0.001)。重复出现的突变在所有检测病例中出现的频率为2.7%,在所有检测到的突变中占33.3%。两个来自中国北方的BRCAl1100delAT突变携带病例有相同的等位基因型,而与来自上海地区的此突变携带者的等位基因型在D17S1322位点上有所差异。两例5589del8突变携带者在所检测的5个Silt位点上有完全相同的等位基因型。结论这是到目前为止较大规模的关于中国早发性乳腺癌人群的BRCAl基因突变的研究,有助于增加对中国早发性乳腺癌人群中BRCAl基因致病性突变分布的全面认识。在中国早发性乳腺癌人群中,BRCAl基因致病性突变在肿瘤的发生中有比较重要的意义,尤其在伴有乳腺/卵巢癌家族史病例中该基因突变的意义尤为突出。两个重复出现的突变可能在中�
李文凤
胡震
柳晓义
张斌
曹明智
王永胜
赵林
刘雁冰
袁文涛
沈镇宙
黄薇
邵志敏
关键词:
早发性乳腺癌
突变
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