湖南省自然科学基金(99JJY20033)
- 作品数：7 被引量：74H指数：6
- 相关作者：戴爱国谭双香胡瑞成严鹏科李炽观更多>>
- 相关机构：南华大学郴州市第一人民医院中南大学更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金湖南省医药卫生科研计划课题国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢性阻塞性肺疾病患者肺部缺氧诱导因子1α表达研究被引量：28
- 2002年
- 胡瑞成戴爱国谭双香
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病肺部缺氧诱导因子1Α免疫组织化学INOS肺血管重构
- 肾上腺髓质素调节诱导型一氧化氮合酶对缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响被引量：8
- 2005年
- 目的:探讨缺氧对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖和凋亡的影响以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的蛋白表达变化及肾上腺髓质素(ADM)在缺氧影响PASMC增殖和凋亡中的作用与意义。方法:离体缺氧培养大鼠PASMC,采用MTT比色法和PCNA的免疫组化法测定细胞增殖反应,采用流式细胞仪法检测细胞凋亡情况,采用Westenblot蛋白印迹法检测iNOS的蛋白表达。结果:①MTT法发现,缺氧24h组的A值明显高于常氧组(P<0.01),而缺氧+ADM组明显低于缺氧组(P<0.01),与常氧组比较差别无显著性(P>0.05),缺氧+L NAME组A值明显高于缺氧组和常氧组(P<0.01)。②免疫组化法发现,常氧组PCNA呈弱阳性表达,而缺氧24h组PCNA呈阳性表达(P<0.01)。ADM明显抑制了缺氧24h组PCNA的表达(P<0.01);而L NAME则促进了缺氧24h组PCNA的表达(P<0.01)。③流式细胞仪分析发现,常氧组、缺氧组、缺氧+ADM组、缺氧+L NAME组,在缺氧培养24h后,其凋亡指数比较差别无显著性(P均>0.05)。④Westenblot发现常氧组大鼠PASMC见少量iNOS表达,缺氧4h后,表达明显增多(P<0.01),8h,24h持续高表达(P<0.01);L NAME对iNOS蛋白的表达没有影响。ADM促进iNOS蛋白的表达。结论:①缺氧能促进肺动脉平滑肌细胞低氧性增殖,对肺动脉平滑肌细胞的凋亡无影响。
- 李炽观戴爱国黄翠萍
- 关键词：肺动脉增殖凋亡肾上腺髓质素缺氧
- 缺氧诱导因子1α、诱导型一氧化氮合酶在缺氧性肺动脉高压大鼠肺动脉的表达被引量：15
- 2002年
- 目的 观察缺氧诱导因子 1α (HIF 1α)与诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)基因在缺氧性肺动脉高压大鼠肺动脉的表达情况。方法常压间断缺氧法复制缺氧性肺动脉高压大鼠模型 ;右心导管测定平均肺动脉压 (mPAP) ;H·E染色观察肺血管重塑情况 ;原位杂交和免疫组织化学方法分别检测HIF 1α和iNOSmRNA及蛋白质。结果 缺氧 7天后大鼠mPAP升高 ,出现缺氧性肺血管重塑 (HPSR) ,缺氧 14天后出现右心室肥大。对照组大鼠肺动脉壁iNOS、iNOSmRNA、HIF 1αmRNA弱阳性 ,HIF 1α蛋白质在肺动脉内膜和中膜分别呈阴性和弱阳性 ;肺动脉壁iNOS蛋白质和mRNA表达水平于缺氧 3天增高 ,缺氧 7天上升达高峰 ,以后维持于高峰水平 ;HIF 1αmRNA表达水平于缺氧 14天以后显著升高 ;全部缺氧大鼠肺动脉内膜HIF 1α蛋白质强阳性 ,肺动脉中膜HIF 1α蛋白质表达水平于缺氧 3天上升达高峰 ,缺氧 14天以后逐渐向基线回降。缺氧条件下iNOS蛋白质水平与mPAP (r =0 74 ,P <0 0 1)和HPSR (r =0 78,P <0 0 1)呈正相关 ,与HIF 1α蛋白质水平呈负相关 (r =- 0 5 2 ,P <0 0 1)。结论 HIF 1α和iNOS均参与缺氧性肺动脉高压的发病 ,HIF 1α对iNOS可能具有转录激活作用 ,iNOS对HIF
- 胡瑞成戴爱国谭双香
- 关键词：缺氧诱导因子1Α诱导型一氧化氮合酶缺氧性肺动脉高压
- 转化生长因子β_1与诱导型一氧化氮合酶相互调控对大鼠低氧性肺动脉高压的作用被引量：7
- 2005年
- 目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因在低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺动脉的动态表达变化.方法 40只成年雄性Wistar大鼠随机分成对照组(C组)、缺氧3、7、14和21 d组(H3、H7、H14和H21组),每组8只,测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、血管形态学指标、右室肥大指数(RVHI);原位杂交和免疫组化检测TGF-β1、iNOS基因表达.结果 H7组大鼠mPAP[(18.41±0.37)mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa]显著高于C组(P<0.05),H14组达高峰[(21.17±0.23)mm Hg]并维持于高水平.肺血管重塑、右心室肥大缺氧14 d后出现.C组大鼠肺动脉中膜iNOS蛋白弱阳性(0.109±0.021),H3组增高(0.225±0.030,P<0.01),H7组(0.312±0.036)稳定于高水平.C组大鼠肺动脉壁iNOS mRNA弱阳性(0.112±0.030),H3组表达增强(0.245±0.036),H7组达高峰(0.318±0.034,P<0.01)并维持于高水平.TGF-β1蛋白在C组呈弱阳性(0.042±0.012),H3组表达增强(0.198±0.031),H7组达高峰(0.267±0.035,P<0.01),随着缺氧时间延长,TGF-β1逐渐向基线水平回降;C组TGF-β1 mRNA呈弱阳性表达(0.145±0.018),H3、H7组表达增高不明显(0.163±0.021、0.176±0.026),H14组增高(0.385±0.028,P<0.01),并维持于高水平,TGF-β1 mRNA、蛋白于肺动脉中膜和外膜表达.相关分析表明,TGF-β1、iNOS均与mPAP和血管重塑呈正相关(r=0.843～0.937,P均＜0.01);TGF-β1蛋白(外膜)与iNOS mRNA、蛋白均呈负相关(r分别为-0.856、-0.835,P均＜0.01).结论 TGF-β1和iNOS均参与大鼠HPH的发病,iNOS可能通过NO上调TGF-β1表达,TGF-β1可能通过降低mRNA的稳定性、减慢翻译速率和加快酶蛋白降解抑制iNOS表达.
- 蒋永亮戴爱国李启芳胡瑞成
- 关键词：低氧性肺动脉高压TGF-Β1MRNATGF-Β1蛋白INOS蛋白动脉中膜
- 肾上腺髓质素对大鼠低氧性肺动脉高压的急性降压作用及机理探讨被引量：12
- 2003年
- 目的 :观察肾上腺髓质素 (ADM)对低氧性肺动脉高压的急性降压作用及其对体循环的影响及机理。方法 :雄性Wistar大鼠分成常氧和低氧两大组 ,每大组分为 3个剂量组。经常氧或低氧 2 1d处理后分别经股静脉给予ADM1 - 52 0 1nmol/kg、0 3nmol/kg、1nmol/kg,观察用药前后体循环和肺循环血流动力学的变化情况。雄性Wistar大鼠分成常氧和低氧两组 ,经股静脉给予ADM1 - 52 0 3nmol/kg ,观察用药前后肺循环压、体循环压变化 ,放免法测定血浆环磷酸腺苷 (cAMP)的动态变化。结果 :低氧与常氧大鼠经ADM注射后除常氧ADM1 - 52 0 1nmol/kg注射组外肺动脉平均压 (mPAP)均有不同程度的降低 ,低氧性肺动脉高压大鼠组更为明显 (P <0 0 5) ,持续时间更长 ;两组大鼠mPAP对不同剂量ADM呈不同降压效应 ,低氧组在 0 1 - 0 3nmol/kg间mPAP下降与剂量成正比 (P <0 0 5) ,剂量递增至 0 3nmol/kg后 ,mPAP下降趋势减弱 ,ADM1 - 52 0 1nmol/kg注射下常氧组mPAP无明显降低 ,在 0 3 - 1 0nmol/kgmPAP显著降低 ,并随ADM剂量增加进一步降低 ;两组大鼠体循环平均压 (mSBP)均下降 (P <0 0 1 ) ,且与剂量成依赖关系 ,其中常氧组更显著。静脉注射ADM1 - 52 0 3nmol/kg后血浆cAMP显著增高。结论 :ADM对大鼠低氧性肺动脉高压有急?
- 徐平戴爱国黄志壮周厚德
- 关键词：肺性高血压肾上腺髓质素
- 低氧诱导因子1在低氧致肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用被引量：14
- 2007年
- 目的:探讨低氧对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖和凋亡的影响,以及HIF-1α、P-ERK1/2、iN-OS蛋白表达变化在其中的作用与意义。方法:体外培养大鼠PASMC,设计常氧组、低氧组及ADM、L-NAME、PD98059干预组,用MTT比色法和PCNA的免疫组化法测定细胞增殖反应,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用West-ern blotting法检测HIF-1α、P-ERK1/2、iNOS的蛋白表达。结果:(1)低氧24h组的A值明显高于常氧组(P<0.01),而PD98059及ADM干预组明显低于低氧组(P<0.01),L-NAME干预组明显高于低氧组和常氧组(P<0.01)。(2)免疫组化表明,低氧24h组呈阳性表达(P<0.01)。PD98059、ADM抑制了PCNA的表达(P<0.01),L-NAME促进了PCNA的表达(P<0.01)。(3)各组在低氧培养24h后,凋亡指数差异无显著(均P>0.05)。(4)Western blotting表明常氧组少量HIF-1α、iNOS、P-ERK1/2表达,低氧4h后均表达增高(P<0.01),8h仍维持在高峰(P<0.01),而HIF-1α、P-ERK1/2在低氧24h后表达下调。L-NAME促进了HIF-1α表达(P<0.01),PD98059部分抑制了HIF-1α、iNOS及P-ERK1/2表达(P<0.01);ADM部分抑制了HIF-1α表达,促进iNOS表达(P<0.01)。结论:低氧能促进肺动脉平滑肌细胞增殖,对细胞的凋亡无影响;HIF-1在低氧诱导肺动脉平滑肌细胞增殖中起重要作用。
- 李炽观戴爱国严鹏科
- 关键词：缺氧诱导因子1平滑肌细胞肺动脉一氧化氮合酶缺氧
- 转化生长因子β_1与一氧化氮合酶及成肌纤维细胞参与大鼠缺氧性肺血管重塑被引量：3
- 2005年
- 目的观察转化生长因子β1(TGFβ1)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因动态表达变化及成肌纤维细胞形成在大鼠缺氧性肺血管重塑中的作用。方法40只成年雄性Wistar大鼠分成常氧组、缺氧3、7、14d和21d组,每组8只,测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、血管形态学指标、右室肥大指数(RVHI);原位杂交和免疫组化检测TGFβ1、iNOS基因表达,透射电镜观察腺泡内血管壁细胞表型。结果缺氧7d后大鼠mPAP升高〔(18.41±0.37)mmHg,P<0.05〕。缺氧性肺血管重塑、右心室肥大于缺氧14d后出现。透射电镜证实成肌纤维细胞含有特异性的微丝和丰富的粗面内质网。TGFβ1mRNA于缺氧3d、7d表达增高不明显,缺氧14d增高(0.385±0.028,P<0.01);TGFβ1蛋白在常氧组呈弱阳性,缺氧3d表达增强(0.198±0.031,P<0.01),缺氧7d组达高峰(0.267±0.035,P<0.01)。对照组大鼠肺动脉壁iNOSmRNA弱阳性,缺氧3d后表达增强(0.245±0.036,P<0.01),缺氧7d达高峰水平(0.318±0.034,P<0.01),以后维持于高峰水平;iNOS蛋白在常氧组大鼠肺动脉中膜iNOS弱阳性,缺氧3d始增高(0.225±0.030,P<0.01),缺氧7d起稳定于高水平。结论缺氧诱导TGFβ1和iNOS动态表达变化及肺血管成肌纤维细胞的形成参与大鼠缺氧性肺血管重塑。
- 蒋永亮戴爱国李启芳胡瑞成
- 关键词：转化生长因子Β一氧化氮合酶肌肉发育缺氧
