江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(2008095)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：鞠少卿申娴娟吴信华王旭东浦江更多>>
- 相关机构：南通大学太仓市第一人民医院南通市老年康复医院更多>>
- 发文基金：江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省自然科学基金南通市科技局社会发展科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 实时荧光定量PCR方法检测非霍奇金淋巴瘤患者B淋巴细胞刺激因子表达水平被引量：3
- 2012年
- 目的:建立实时荧光定量PCR方法(RFQ-PCR)检测非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者B淋巴细胞刺激因子(BAFF)表达水平。方法:47例NHL患者及20例健康对照,采用实时荧光定量PCR方法检测其外周血单个核细胞中的B淋巴细胞刺激因子表达水平。结果:RFQ-PCR检测BAFF含量的示灵敏度为10 pg/ml,低浓度样本批内和批间变异系数(CV)分别为8.56%和11.32%,高浓度样本批内和批间CV分别为0.76%和4.58%。NHL患者和健康对照者BAFF mRNA表达量分别为(0.48±0.023,0.25±0.023),两者具有显著性差异(P=0.0001)。结论:RFQ-PCR检测BAFF mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性。NHL患者BAFF mRNA高表达,提示BAFF可能在NHL发生发展中发挥重要作用。
- 王金湖王梅杨剑虹王旭东申娴娟浦江鞠少卿
- 关键词：非霍奇金淋巴瘤B淋巴细胞刺激因子
- 多发性骨髓瘤患者外周血单个核细胞微小RNA-202的表达及意义被引量：2
- 2011年
- 目的 建立SYBR Green Ⅰ FQ-PCR检测人外周血单个核细胞（PBMC）中miR-202表达的方法,并初步探讨其检测MM的意义.方法 采用特异miR-202茎环引物逆转录后,用FQ-PCR对21例MM患者及20名健康人PBMC中miR-202表达水平做相对定量分析；结果用Mann-Whitney法进行两组间miR-202表达差异比较.此外,用1份1∶125稀释标本重复检测5次；及同一标本连续检测3d,每天检测1次,每次重复5管,根据循环阈值（Ct）计算标准差和变异系数（CV）,以评价所建方法的重复性.结果 FQ-PCR检测PBMC中miR-202的扩增曲线呈标准的S型,熔解曲线峰值单一,未见杂峰,显示其特异性较好.批内CV为1.2％,批间CV为3.2％,当标本miR-202浓度被稀释为12.8 pmol/μl时,仍可稳定地得到扩增曲线.FQ-PCR检测MM组中miR-202表达量为1.844（0.162 ～3.966）,健康对照组表达量为0.014（0.007～0.221）,MM组中miR-202表达明显高于健康对照组（U=48.000,P＜0.01）.结论 FQ-PCR是一种快速简便、特异性和重复性较好的检测miR-202的方法,MM患者PBMC中miR-202表达升高,其可能参与MM的发生过程,并有可能成为MM诊断和治疗的新指标.
- 张霞王旭东申娴娟吴信华施维祝文彩刘振宗鞠少卿
- 关键词：聚合酶链反应微小RNAS多发性骨髓瘤
- IFN-γ对多发性骨髓瘤细胞上B细胞活化因子受体表达的影响及相关机制研究被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨IFN-γ对多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）细胞上B细胞活化因子受体（BAFF-R）的表达变化影响及相关机制.方法 应用RT-PCR和ELISA法检测IFN-γ诱导多发性骨髓瘤细胞BAFF-R的表达水平,观察NF-κB特异性抑制剂BAY11-7082对其mRNA和蛋白表达水平的影响;应用Western blot检测NF-κB在IFN-γ诱导的多发性骨髓瘤细胞反应中的活化程度.结果 IFN-γ以时间和剂量依赖方式上调多发性骨髓瘤细胞BAFF-R表达.BAY11-7082以剂量依赖方式在基因转录和翻译水平显著抑制IFN-γ诱导的BAFF-R表达.结论 NF-κB信号通路参与了多发性骨髓瘤细胞BAFF-R的表达,如何参与有待进一步研究.
- 申娴娟王跃国吴信华袁宏香祝文彩丛辉王惠民鞠少卿
- 关键词：多发性骨髓瘤IFN-ΓNF-ΚB信号通路
- 人BAFF-R基因启动子活性的初步研究
- 2010年
- 目的以B淋巴细胞刺激因子受体BAFF-R基因5'上游区序列为研究对象,初步鉴定、分析该基因的启动子所在区域。方法克隆BAFF-R基因5'侧翼区1823 bp序列,构建8个含有不同长度启动子序列的荧光素酶报告基因表达质粒pGL3-B1～B8,将这8个序列缺失重组质粒与psv-β-gal质粒共转染细胞,检测荧光素酶的相对活性,确定启动子所在区域。结果8个重组质粒中pGL3-B2、pGL3-B3、pGL3-B5、pGL3-B6启动子的活性较低;pGL3-B7启动子的活性最强,pGL3-B8启动子活性最低。结论BAFF-R基因5'端-288～-430、-712～-868和-1420～-1562三个区段可能存在转录沉默子元件,-617～-712和-1277～-1420区段存在转录增强子元件,BAFF-R基因的核心启动子可能位于-1420～+261区域。
- 袁宏香钱晶晶王惠民王跃国吴信华祝文彩浦江申娴娟鞠少卿
- 关键词：启动子报告基因
- 多发性骨髓瘤中MAPK信号通路对BLyS表达的调控研究被引量：4
- 2011年
- 目的 研究多发性骨髓瘤（MM）细胞中丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的表达及活化情况,探讨MAPK信号通路对MM细胞B淋巴细胞刺激因子（BLyS）表达变化的影响及对MM细胞增殖与存活的影响,并初步探讨MAPK信号通路在IFN-γ（MM重要的促生长因子）上调MM细胞BLyS表达过程中的作用.方法 应用Western blot方法检测MM细胞中蛋白ERK、p-ERK、JNK、p-JNK、p38及p-p38的表达情况；应用RT-PCR及Western blot检测MAPK信号通路对BLyS表达的影响；应用WST-1法检测靶向JNK的MAPK信号通路抑制剂SP600125对MM细胞增殖与存活的影响.结果 MM细胞株中,除了ERK、JNK及p38的表达外,还有活化蛋白p-JNK的表达；靶向JNK的MAPK信号通路抑制剂SP600125可下调MM细胞BLyS的表达,其激动剂茴香霉素（anisomycin）可上调BLyS的表达；IFN-γ可上调MM细胞BLyS的表达,SP600125可部分抵消IFN-γ对BLyS的上调作用；SP600125可抑制MM细胞的增殖与存活.结论 MM细胞中有JNK/SAPK信号通路的活化；JNK/SAPK信号通路的活化程度与BLyS的表达高低呈正相关；JNK/SAPK信号通路在IFN-γ上调MM细胞BLyS表达过程中发挥重要作用.
- 徐光浦江褚少朋王旭东申娴娟吴信华张霞孙长江鞠少卿
- 关键词：MAPK信号通路
