全球变化研究国家重大科学研究计划(2006CB910504)
- 作品数：5 被引量：23H指数：4
- 相关作者：周鸣李桂源武明花李小玲范松青更多>>
- 相关机构：中南大学中南大学湘雅二医院更多>>
- 发文基金：全球变化研究国家重大科学研究计划湖南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 全反式维甲酸对C6胶质瘤细胞增殖分化的影响
- 2008年
- 目的:研究全反式维甲酸对C6胶质瘤细胞增殖和分化的影响。方法:用5 mg/L全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)诱导C6胶质瘤细胞,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)实验绘制细胞生长曲线以考察ATRA对细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞仪、光镜、透射电镜和免疫组织化学染色鉴定细胞的分化状况。结果:C6胶质瘤细胞经全反式维甲酸诱导后,细胞增殖受到明显抑制,并且密度明显减少(P<0.01)。细胞周期受阻,G0/G1期延长,S期细胞比例明显减少(P<0.01)。光镜观察到诱导前的C6胶质瘤细胞呈正常的成纤维细胞形态,而诱导后的C6胶质瘤细胞变细长,中间呈圆形或卵圆形,两端形成长尖突起。流式细胞仪的凋亡率检测显示,未见明显的凋亡;透射电镜观察显示,细胞有早期凋亡改变,且胞浆内空泡增多,线粒体和内质网丰富,细胞结构基本趋向正常。C6胶质纤维酸性蛋白表达明显增强。结论:全反式维甲酸能抑制胶质瘤细胞的增殖,并能诱导C6细胞分化。
- 唐珂曹利范松青武明花黄河周艳宏周鸣唐运莲王蓉曾芳廖萍李小玲李桂源
- 关键词：分化全反式维甲酸胶质纤维酸性蛋白胶质瘤
- 启动子区CpG岛高甲基化诱导LRRC4基因在胶质瘤中的表达沉默
- LRRC4(leucine—rich repeat C4)是一个脑组织相对特异性表达基因,也是一个胶质瘤抑制性基因。LRRC4在原发性脑胶质瘤组织中表达下调或缺失,但序列分析表明,LRRC4基因无点突变,重排,以及染色体...
- 武明花张祖平刘恩伊李夏雨李小玲李桂源
- 关键词：LRRC4胶质瘤启动子甲基化
- 文献传递
- 在基于BAC的EB病毒基因组中引入突变被引量：4
- 2008年
- 为了在Epstein-Barr病毒(EBV)172kb的基因组中引入突变以研究基因功能,建立了一种简单有效的基因操作方法。在载体pcDNA3.1(+)上操作,将两端含有重组蛋白FLP识别位点(FRT)的卡那霉素筛选标记基因(kan)与鼻咽癌(NPC)来源的、包含LMP1基因全长ORF的gDNA"无缝"连接(无外源序列插入)。连接后的kan-LMP1线性DNA片段经转化、由λ噬菌体中redαβγ系统介导在E.coli中发生同源重组(ET克隆),用kan-LMP1替代了BAC-EBV(p2089)中相应的LMP1基因区域,然后经过重组蛋白FLP对FRT-kan-FRT特异性的识别,切除了引入的kan基因,留下一个69bp的FRT"疤痕"。通过抗性筛选和对菌液进行PCR扩增可以鉴定突变子。这种经改进并程序化的方法,也适应于引入其它突变或在其它BAC-疱疹病毒基因组中引入突变。
- 卢建红唐运莲周鸣武明花欧阳珏高建明张荔茗李丹陈琼熊炜李小玲唐珂李桂源
- 关键词：EB病毒突变同源重组
- 多基因遗传性肿瘤不同阶段转录组学调控规律及其分子机制被引量：7
- 2011年
- "多基因遗传性肿瘤不同阶段的转录组学调控规律及其分子机制研究"的国家重大研究计划项目研究团队以肿瘤基因组研究成果为基础,以肿瘤转录组学为主要研究方向,重点对鼻咽癌、乳腺癌、结直肠癌和脑胶质瘤4种多基因遗传性肿瘤的转录组信息及变化规律、抑瘤/易感基因的筛选鉴定、表观遗传学及miRNA调控的作用机制、转录调控相关的特定基因簇/蛋白质群的转录组和蛋白质组的比较和关联4个方面开展深入的研究。分别发现SPLUNC1,LTF,BRD7,NOR1,BRCA1/2,PALB2,AF1Q,SOX17,NGX6,SOX7和LRRC4等基因在肿瘤始动和侵袭阶段发挥的关键转录调控作用。相继阐明了以miR-141为中心的"SPLUNC1-miR-141-靶基因"的鼻咽癌基因信号调控网络;以人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)为靶点的"miR-193b-uPA"的乳腺癌基因交互调控通路;以LRRC4为节点的"miR-381-LRRC4-MEK/ERK/AKT"的胶质瘤基因调控通路以及受结肠癌转移相关基因NGX6调控的miRNA及其靶基因群网络。结果表明多基因遗传性肿瘤发生、发展过程中所涉及的关键信号转导通路中的关键分子的变化将导致信号转导通路和基因调控网络的严重障碍,说明多基因肿瘤在发病学上可能是一类"基因信号转导与基因调控网络障碍性疾病"。这些结果和理论为揭示多基因遗传性肿瘤不同阶段发病过程的转录组学规律及其分子机制提供了实验和理论依据。
- 李夏雨沈守荣武明花李小玲熊炜卢建红周鸣马健向娟娟曾朝阳向波周艳宏肖岚周厚德范松青李桂源
- 关键词：多基因转录组学表观遗传学MIRNA转录调控
- 裂解性复制诱导产生可视化重组Epstein Barr病毒被引量：4
- 2007年
- 为了在病毒的整个基因组中研究基因的功能,分析基因与基因之间的相互作用,含有整个野生型EB病毒(EBV)基因组的BAC-EBV质粒(p2089),首先被转染EBV阴性的HEK293细胞,经潮霉素筛选建立了HEK293/p2089稳定细胞系.再构建pcDNA3.1(+)/BZLF1和pcDNA3.1(+)/BALF4真核表达质粒,共转染至HEK293/p2089细胞内,诱导EBV裂解性复制产生可视化的重组EBV颗粒.重组EBV颗粒感染Raji细胞,在倒置荧光显微镜下和流式细胞仪记数GFP阳性细胞,根据这些'绿色Raji单位'确定病毒的滴度.在国内首次建立这种以细菌人工染色体(BAC)为基础的EBV感染性克隆技术,将允许对EB病毒基因组中任何基因的任何遗传修饰,为在整个基因组中对EB病毒基因功能的研究奠定了基础,也为对EBV与其相关的肿瘤如鼻咽癌发生机理的研究建立了新的技术平台.
- 唐运莲卢建红武明花黄琛曹利彭淑平周艳宏李小玲周鸣唐珂李桂源
- 关键词：可视化基因组
- NGX6基因在多种常见癌组织中的原位表达及其临床意义的研究被引量：9
- 2008年
- 研究新的候选抑瘤基因NGX6在多种常见癌组织中的mRNA原位表达谱,分析NGX6 mRNA阳性率与肿瘤临床病理特征的关系并评估其作为肿瘤转移、预后预测分子标志物的有效性.利用已制作的多肿瘤组织和鼻咽癌组织微阵列,原位杂交检测NGX6 mRNA在多种常见癌组织中的阳性率.结果显示,NGX6 mRNA在鼻咽癌、肺癌、胃癌和结、直肠癌中的阳性率低于其对应的正常组织(P<0.05,P<0.01).淋巴结转移性鼻咽癌、肺癌、结、直肠癌和喉癌组织中的NGX6 mRNA阳性率显著降低(P<0.05,P<0.01).NGX6 mRNA阳性率与鼻咽癌、肺癌和结、直肠癌临床分期有关,临床Ⅱ期、Ⅲ期或Ⅳ期癌组织NGX6 mRNA阳性率明显低于其相应的临床Ⅰ期癌(P<0.05,P<0.01).研究表明,鼻咽癌、肺癌、胃癌和结、直肠癌中存在低水平的NGX6 mRNA,NGX6 mRNA可作为鼻咽癌、肺癌和结、直肠癌侵袭、转移和临床进展预测的分子标志.
- 范松青张文玲周鸣彭淑平李桂源
- 关键词：组织微阵列原位杂交NGX6基因
