湖南省教育厅优秀青年基金(03B034)
- 作品数:3 被引量:14H指数:3
- 相关作者:廖端芳朱炳阳雷小勇唐圣松黄泽香更多>>
- 相关机构:南华大学更多>>
- 发文基金:湖南省教育厅优秀青年基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 二烯丙基二硫诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及机制的研究被引量:7
- 2007年
- 目的:研究二烯丙基二硫(DADS)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其分子机制。方法:AO/EB荧光染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测DADS对caspase-3剪切片断的影响,及对MAPKs通路相关蛋白,包括p-JNK、JNK表达的影响。结果:DADS对乳腺癌细胞株MCF-7生长具有明显的抑制作用,经AO/EB形态变化分析,可见明显的细胞凋亡特征;DADS处理MCF-7细胞6、12、24、48 h,流式细胞仪检测细胞的凋亡率分别为3.74%、9.22%、20.2%、42%,而对照组细胞的凋亡率仅为3.03%(P<0.05);不同浓度的DADS作用于MCF-7细胞24 h后,Western blot法检测发现caspase-3出现断裂片断,并随着浓度的增加断裂更明显。进一步研究发现,DADS处理MCF-7细胞后,JNK磷酸化水平明显升高。结论:DADS能诱导乳腺癌细胞株MCF-7细胞凋亡,JNK信号通路抑制可能是DADS诱导其调亡的分子机制之一。
- 姚淑琼刘丽娟黄泽香雷小勇朱炳阳唐圣松廖端芳
- 关键词:DADSMCF-7细胞细胞凋亡JNK
- Bcl-XL siRNA对人胃腺癌MGC-803细胞药物敏感性的影响被引量:3
- 2006年
- 目的:研究靶向Bcl-XL基因的小干扰RNA对胃腺癌MGC-803细胞Bcl-XL基因表达的作用及对药物敏感性的影响。方法:构建的Bcl-XLsiRNA载体或阴性siRNA并稳定转染到胃癌MGC-803细胞,G418抗生素筛选阳性克隆,克隆扩大培养,免疫荧光观察细胞蛋白表达。用不同浓度的5-FU或DADS处理稳定转染细胞,MTT观察细胞增殖的变化。用一种浓度的5-FU或DADS处理稳定转染细胞,流式细胞术观察亚G1细胞的比例。结果:免疫荧光结果表明,Bcl-XLsiRNA稳定转染组细胞中Bcl-XL蛋白的表达比阴性siRNA稳定转染组细胞Bcl-XL基因的表达均有明显的降低。当不同浓度的5-FU(13、130、1 300、13 000 mg.L-1)或DADS(20、35、50mg.L-1)处理细胞24 h后,MTT结果表明Bcl-XLsiR-NA细胞组A570吸光度值较阴性siRNA细胞组和未转染对照明显降低,细胞生长抑制率明显增高。5-FU或DADS药物的IC50值在Bcl-XLsiRNA细胞组有明显降低。使用5-FU(130 mg.L-1)或DADS(50mg.L-1)处理细胞24 h后,流式结果表明,Bcl-XL-siRNA细胞组较阴性siRNA和正常对照细胞组亚G1细胞比例有明显增高。结论:Bcl-XL siRNA下调了MGC-803细胞Bcl-XL基因的表达;Bcl-XLsiRNA能够促进MGC-803细胞凋亡,增强细胞对化疗药物的敏感性。
- 钟苗雷小勇冯兰芳朱炳阳唐圣松廖端芳
- 关键词:MGC-803细胞DADS
- Bcl-XL siRNA对肺腺癌细胞A549/DDP药物敏感性及凋亡的影响被引量:4
- 2007年
- 目的:探讨小干扰RNA沉默Bcl-XL对肺腺癌耐药细胞株A549/DDP药物敏感性的影响及其凋亡机制。方法:将Bcl-XLsiRNA质粒载体转染至A549/DDP细胞,MTT、流式细胞仪检测细胞药物敏感性的改变;丫啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bcl-XLmRNA水平;Western-Blot检测Bcl-XL、caspase-3蛋白表达的变化。结果:分别用0.2、2、20、200μg/mL顺铂处理细胞48 h,MTT显示转染Bcl-XLsiRNA细胞组A570吸光度值较阴性siRNA细胞组和未转染对照组明显降低,细胞生长抑制率明显增高;用20μg/mL顺铂处理细胞48 h,流式细胞仪检测,转染Bcl-XLsiRNA组凋亡率较转染阴性siRNA组和未转染组增加;AO/EB染色显示转染Bcl-XLsiRNA的细胞较转染阴性siRNA及未转染者凋亡率增加;转染Bcl-XLsiRNA降低了Bcl-XLmRNA和蛋白水平,升高了caspase-3活性形式蛋白表达。结论:Bcl-XLsiRNA特异性下调A549/DDP细胞Bcl-XL的表达,活化caspase-3蛋白,促进A549/DDP细胞凋亡,增强该肺腺瘤细胞对顺铂的敏感性。
- 黄泽香刘丽娟姚淑琼雷小勇朱炳阳唐圣松廖端芳
- 关键词:小干扰RNABCL-XLA549/DDP细胞凋亡