国家重点基础研究发展计划(2003CB716401) 作品数:5 被引量:47 H指数:3 相关作者: 于广利 赵峡 管华诗 张真庆 李倩 更多>> 相关机构: 中国海洋大学 青岛大学 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 长江学者和创新团队发展计划 更多>> 相关领域: 理学 生物学 化学工程 更多>>
基于MALDI-TOF质谱技术分析人宫颈癌HeLa细胞N-糖链结构轮廓 被引量:3 2012年 以微量HeLa细胞(107个)为对象,经细胞裂解、还原羧甲基化、胰酶降解和Oasis-HLB柱提取分离得到总糖肽后,用PNGase F酶解释放N-糖链.对所得N-糖链用Sep-Pak C18柱纯化后进行完全甲基化衍生,再采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析HeLa细胞表面N-糖链的结构轮廓.结果表明,在获得的34种N-糖链中,除高甘露糖型、二天线、三天线、四天线和五天线等N-糖链外,还出现了在某种程度上与肿瘤发生转移相关的特殊平分型和Lewis结构.利用MALDI-TOF MS技术可快速分析微量癌细胞表面N-糖链的结构轮廓,为进一步寻找肿瘤糖链标志物及肿瘤的早期预防诊断提供技术支持. 王培培 于广利 焦广玲 赵峡 李静 柴文刚关键词:肿瘤 HELA细胞 N-糖链 一种海洋弧菌(Vibrio sp.WYA)褐藻胶裂合酶降解特性研究 被引量:8 2006年 从海洋弧菌(Vibrio sp.WYA)中得到一种褐藻胶裂合酶,将其分别作用于寡聚甘露糖醛酸和古罗糖醛酸纯品(dp5~7)以及褐藻胶,采用HPTLC和FPLC等技术对产物进行分析,并应用ESI-MS和NMR进行结构分析.结果表明,该酶最小识别片段为六糖,终产物主要为三糖,且识别和切割位点为甘露糖醛酸残基. 张真庆 于广利 赵峡 王远红 吕志华 管华诗关键词:褐藻胶 寡糖 海洋弧菌 几种糖醛酸及其寡糖的薄层层析分析 被引量:29 2005年 以葡萄糖醛酸(G lcA)、半乳糖醛酸(GalA)、甘露糖醛酸(M anA)、古罗糖醛酸(Gu lA)、半乳糖醛酸寡糖(O ligo-GalA)、甘露糖醛酸寡糖(O ligo-M anA)、古罗糖醛酸寡糖(O ligo-Gu lA)和酶解褐藻胶寡糖(O ligo-u-A lg)为研究对象,探讨其薄层色谱(TLC)行为。结果表明,TLC对不同糖醛酸寡糖有良好的分离和分析效果,其中O ligo-GalA与褐藻胶来源的寡糖Rf值不同,而同样来源于褐藻胶的O ligo-M anA与O ligo-Gu lARf值相同;首次发现酸解与酶解褐藻胶寡糖聚合度相同时Rf值不同。此外,4种糖醛酸对不同的显色剂的显色灵敏度也略有不同,其中硫酸铈显色剂的显色效果最灵敏。这些结果为快速有效分析酸性寡糖的纯度及其聚合度,提供了简便有效的方法。 张真庆 于广利 赵峡 李倩 管华诗关键词:葡萄糖醛酸 半乳糖醛酸 寡糖 灰树花β-葡聚糖的高效凝胶渗透色谱行为 被引量:3 2007年 以4种不同蛋白质含量的灰树花β-1,3/1,6-葡聚糖(GF1,GF2,GF3,GF4)和1种α-1,4/1,6-葡聚糖(P100)为研究对象,探讨了它们在不同盐浓度和不同pH下的高效凝胶渗透色谱(HPGPC)行为。结果表明:灰树花口.葡聚糖相对分子质量在低于0.025mol/L的氯化钠溶液中急剧降低,在0.1—0.2mol/L的氯化钠溶液中趋于平稳。在pH3—6时,其相对分子质量随pH增加而急剧增加;在pH6—9范围内变化较小;pH高于9后又稍微增加。在相同条件下,α-1,4/1,6-葡聚糖的相对分子质量不受盐浓度和pH值变化的影响。灰树花β-葡聚糖在水溶液中可形成超螺旋结构,该结构受溶液盐浓度和pH值变化的影响,导致分子聚集状态不同,从而呈现不同的凝胶渗透色谱行为,表现为相对分子质量升高或降低。 宋乐天 于广利 赵峡 高昊东 杨晓华 杨海关键词:相对分子质量 Β-葡聚糖 灰树花 猪肝组织中硫酸乙酰肝素的分离纯化及二糖组成分析 被引量:6 2007年 目的从少量猪肝组织中分离纯化硫酸乙酰肝素(HS)并进行二糖组成分析。方法分别采用胰蛋白酶及中性蛋白酶对猪肝组织进行酶解,再分别采用AG 50W-X2强阳离子交换色谱、Sephadex G-10凝胶过滤色谱、Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换色谱法纯化。将纯化的HS分别采用肝素酶Ⅰ和Ⅲ降解,所得到的二糖经2-氨基苯甲酰胺标记后,采用PA03色谱柱分析其二糖组成。结果经色谱和电泳分析,所得到的HS不含蛋白质及其它糖胺聚糖,其二糖组成以非硫酸化和低硫酸化二糖为主。结论该方法可以有效分离、纯化猪肝组织中的HS,并适用于少量组织中HS二糖组成分析。 吕惠中 于广利 赵峡 张峥关键词:猪肝 硫酸乙酰肝素 纯化