国家自然科学基金(30860224) 作品数:5 被引量:10 H指数:2 相关作者: 文晓鹏 乔光 赵庆鹤 崔博文 洪怡 更多>> 相关机构: 贵州大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省科学技术基金 贵州省农业攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
木豆高频不定芽再生及体细胞遗传变异的分子检测 被引量:1 2010年 以木豆子叶节为外植体,建立高频不定芽再生体系,并对继代丛芽的遗传变异进行分子检测。结果表明:子叶节不定芽再生的最佳培养基为EC6附加4.0mg/LBA和0.1mg/LIBA;丛芽增殖培养以EC6附加4.5mg/LBA、0.1mg/LIBA和0.4mg/LKT效果最佳。同时,随机挑选继代第5代的20个丛芽提取基因组DNA,采用45个ISSR引物对基因组DNA进行分子检测,结果显示,在所用引物范围内均未检测到变异。 赵庆鹤 崔博文 乔光 文晓鹏关键词:木豆 体细胞变异 分子标记 木豆不定芽再生途径的高效快繁体系 2010年 以木豆成熟胚为外植体,通过探讨不同培养条件对不定芽的诱导、增殖及生根等能力的影响,以建立高效的快繁体系。结果表明:适合胚生长的培养基为MS附加0.5 mg/L BA和0.1 mg/L IBA;不定芽增殖培养基以EC6附加0.4 mg/LBA与0.2 mg/L IBA效果最佳;生根培养基以MS附加0.1 mg/L IBA效果最好,生根率为82.4%,移栽成活率为85%。 赵庆鹤 崔博文 文晓鹏关键词:木豆 不定芽 离体快繁 木豆Actin基因片段的克隆及序列分析 被引量:2 2010年 根据大豆Actin基因的保守序列设计一对引物Primer 1和Pri mer 2,以木豆叶片总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增出Actin基因片段并克隆到PMD-18T载体。阳性克隆经PCR检测后测序,序列分析结果表明,该片段长302bp,编码100个氨基酸;所得序列与GenBank中注册的其他植物Actin基因核苷酸序列的同源性均在89%以上,其中与大豆的同源性达94%;与氨基酸序列的同源性均在90%以上。 乔光 文晓鹏关键词:木豆 ACTIN基因 克隆 木豆抗旱相关基因CcGST1克隆与表达分析 被引量:5 2017年 为探讨谷胱甘肽转移酶(GST)的抗逆机理,克隆木豆中的抗旱谷胱甘肽转移酶基因,基于木豆干旱胁迫c DNA文库中1个GST基因相关的EST片段,利用RACE技术从木豆幼苗中克隆了该基因,命名为CcGST1,研究其在不同组织及不同干旱时期的表达特性。结果表明:该基因含1个669 bp的开放阅读框,编码223个氨基酸残基,含有保守的谷胱甘肽-S-转移酶的N端和C端结构域;系统进化树分析结果表明木豆CcGST1与大豆、宽叶菜豆等豆科植物的GST亲缘关系较近;亚细胞定位预测CcGST1蛋白可能定位于叶绿体;荧光定量PCR分析表明,CcGST1在木豆幼苗根、茎和叶中均有表达,但根中的表达水平最高,同时该基因受干旱胁迫诱导表达。据此推测木豆CcGST1基因可能与木豆应激干旱胁迫相关。 乔光 文晓鹏 洪怡关键词:木豆 谷胱甘肽转移酶 克隆 基因 生物信息学 木豆GDSL脂肪酶基因的克隆及表达分析 被引量:4 2017年 【目的】为探明GDSL家族脂肪酶的抗逆机理,【方法】在前期研究基础上,利用RACE技术克隆木豆GDSL脂肪酶基因,并通过荧光定量PCR技术检测其表达特性。【结果】获得1条木豆GDSL脂肪酶基因,命名为Cc GDSL1,该基因含开放阅读框全长1107 bp,编码369个氨基酸;经同源性分析,Cc GDSL1编码的氨基酸序列与豆科植物中GDSL脂肪酶具有较高的相似性。该基因在叶、茎和根中均表达,且叶和茎中表达量显著高于根;干旱胁迫能提高Cc GDSL1的表达量,随干旱的持续表现出先降后升随后趋于稳定的表达模式。【结论】推测Cc GDSL1基因参与木豆应激干旱胁迫。 乔光 文晓鹏 丁贵杰关键词:木豆 克隆