公共文化服务平台

SHIP2通过上调Bim表达增强胃癌细胞BGC-823对紫杉醇的敏感性被引量：2: 2014年; 目的探讨SHIP2(SH2 domain containing inositol 5-phosphatase 2)基因转染人胃癌细胞BGC-823后对紫杉醇敏感性的影响。方法流式细胞仪PI单染法检测细胞凋亡率。应用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测各组细胞蛋白表达情况。实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)分析mRNA的变化水平。将pCMV6-SHIP2质粒在脂质体介导下转染人胃癌BGC-823细胞,同时以转染空载体和未转染细胞作为对照组。将GV112-Puromycin空载体和GV112-Puromycin-Bim(Bcl-2 interacting mediator of cell death)慢病毒颗粒分别感染BGC-823细胞,建立稳定细胞株,再将pCMV6-SHIP2质粒分别转染空载体和稳定干扰Bim表达细胞株。结果与SGC-7901细胞相比,BGC-823细胞对紫杉醇诱导的凋亡相对不敏感,0.3μmol·L-1紫杉醇诱导BGC-823 48 h后细胞凋亡率仅为(25.6±1.6)%,在紫杉醇作用不同时间点Bim蛋白和mRNA表达均无明显变化;与对照组相比,转染SHIP2基因能明显增加Bim的表达,紫杉醇作用48 h后,细胞凋亡率上升到(50.8±0.9)%;GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的BGC-823细胞,Bim的表达明显被抑制,在GV112-Puromycin-Bim慢病毒颗粒感染的稳定BGC-823细胞中转入pCMV6-SHIP2,紫杉醇作用48 h后,凋亡率为(27.6±1.6)%。结论转染外源性SHIP2基因能有效提高BGC-823细胞内Bim的表达,诱导BGC-823细胞凋亡,明显增加BGC-823细胞对紫杉醇的敏感性。; 葛燕梅叶艳张林杰; 关键词：胃癌 BIM 紫杉醇 AKT

胃癌组织中GRP78的表达与临床病理特征的相关性分析被引量：4: 2012年; 目的探讨胃癌组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达与临床病理特征的相关性及其与胃癌发生、发展的关系。方法收集临床资料完整的胃癌组织蜡块76例、胃正常组织蜡块(含正常胃黏膜组织及癌旁正常胃组织)20例制成组织芯片,免疫组化SP法检测其GRP78蛋白的表达。结果胃癌组织、胃正常组织中均有GRP78蛋白的表达,胃癌组织表达指数为(5.80±3.45),胃正常组织表达指数为(3.20±1.70),两组比较差异有统计学意义(P=0.002)。胃癌组织中GRP78蛋白的表达随肿瘤分化程度的降低而增强(P=0.001),但与患者的年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结转移、浸润深度等无关。结论胃癌组织中GRP78蛋白的表达增高,并与胃癌的分化程度密切相关。; 余先祥谢本俊张林杰; 关键词：组织芯片胃肿瘤 GRP78 免疫组织化学

Mcl-1在阿霉素诱导骨肉瘤细胞凋亡中的作用被引量：1: 2012年; 目的研究阿霉素诱导骨肉瘤细胞凋亡过程中Mcl-1含量的变化以及Mcl-1对骨肉瘤细胞凋亡的调控作用。方法采用半定量PCR法检测Mcl-1、Bcl-2、β-actin的mRNA水平变化;Western blot法检测Mcl-1、Bcl-2、β-actin蛋白变化;转染pcDNA3-Mcl-1质粒使细胞高表达Mcl-1、Bcl-2;采用Caspase3/7活性试剂盒检测Caspase3/7活性。结果骨肉瘤细胞在阿霉素作用下,Mcl-1和Bcl-2的mRNA水平无变化,而蛋白水平下调;过表达Mcl-1可以明显抑制凋亡标志物PARP的剪切,而Bcl-2不具有抑制效应;同样,过表达Mcl-1可以抑制阿霉素作用下Caspase3/7的活化。结论阿霉素作用下,Mcl-1蛋白水平下降是骨肉瘤细胞发生凋亡的重要原因,并且该凋亡过程与Caspase的活化有关。; 张耘陈刚戴守达李群张旭东张林杰; 关键词：骨肉瘤 MCL-1 阿霉素细胞凋亡 CASPASE

TRAIL联合紫杉醇诱导胃腺癌SGC-7901细胞凋亡作用研究被引量：4: 2012年; 目的:观察紫杉醇联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡的作用及其协同作用机制。方法:将TRAIL、紫杉醇及TRAIL联合紫杉醇诱导SGC-7901细胞48小时,用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率和线粒体跨膜电位的改变;用MTT法检测SGC-7901细胞增殖反应;用免疫印迹(Westernblot)法检测TRAIL死亡受体DR4(TRAIL-R1)、DR5(TRAIL-R2)的表达变化。结果:TRAIL和/或紫杉醇对SGC-7901细胞增殖有抑制作用,两者联合用药组对细胞增殖的抑制率较单独用药明显增加(P<0.01);联合用药组细胞凋亡率较单独用药组明显增加(P<0.01);0.3μmol/L紫杉醇作用48小时后,DR4表达明显升高(P<0.05),而DR5表达没有明显改变(P>0.05)。结论:紫杉醇可协同TRAIL诱导SGC-7901细胞凋亡,DR4表达增加可能是其协同作用的机制。; 涂龙霞吴亚欧张林杰; 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体紫杉醇 SGC-7901细胞凋亡

RIP1增强顺铂诱导食管癌细胞的凋亡被引量：4: 2015年; 目的探讨受体相互作用蛋白1(RIP1)增强顺铂(DDP)诱导食管癌细胞凋亡的敏感性。方法单溶液细胞增殖分析(MTS)法检测不同浓度DDP对食管癌细胞株KYSE510、KYSE410的增殖抑制作用;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测RIP1、半胱天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、PARP的蛋白表达。结果 DDP诱导食管癌细胞凋亡具有剂量和时间相关性。凋亡率随剂量增加和时间延长升高,RIP1蛋白的表达升高,DDP联合RIP1特异性抑制剂处理食管癌细胞后,较敏感的KYSE510凋亡率明显减少。结论 RIP1可能参与了DDP诱导食管癌细胞凋亡的作用。; 章余妹吴萍张林杰吕磊杨守梅; 关键词：食管癌顺铂凋亡

Noxa在胃腺癌细胞耐受内质网应激诱导凋亡中的作用被引量：1: 2013年; 目的研究胃腺癌细胞对内质网应激诱导细胞凋亡耐受中BH3-only家族蛋白Noxa的表达、作用以及相关机制。方法衣霉素(TM)处理SGC-7901中分化胃腺癌细胞株及BGC-823低分化胃腺癌细胞株;采用PI单染法测定细胞凋亡率;Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、半胱天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)、成人T细胞白血病诱导的PMA反应蛋白(Noxa)和髓样细胞白血病-1(Mcl-1)蛋白变化;小干扰RNA(siRNA)技术特异"沉默"Mcl-1和Noxa基因;实时荧光定量PCR检测Noxa mRNA水平变化。结果 TM处理胃腺癌细胞后,GRP78表达升高;胃腺癌细胞对TM诱导的内质网应激性凋亡耐受,Caspase-3和Caspase-9活化较弱;Noxa在蛋白水平和mRNA水平表达均升高;Mcl-1在蛋白水平表达升高;在SGC-7901细胞中,"沉默"Mcl-1基因会使细胞凋亡率升高,而双"沉默"Mcl-1和Noxa基因则细胞凋亡率明显下降。结论胃腺癌SGC-7901细胞在内质网应激状态下,Noxa的促凋亡作用被同样上调的Mcl-1抗凋亡作用拮抗,是胃腺癌细胞耐受内质网应激诱导凋亡的重要机制。; 王家钰张丽吴萍朱孝峰张旭东张林杰; 关键词：内质网应激 NOXA MCL-1

牛蒡子苷元对小鼠脾细胞增殖的影响及相关机制: 2014年; 目的研究牛蒡子苷元(ATG)对刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾细胞增殖和相关细胞因子分泌的影响及其可能的分子机制。方法 MTT法检测ATG对小鼠脾细胞的毒性;H3-胸腺嘧啶核苷掺入法检测ATG对小鼠脾细胞的增殖抑制水平;ELISA法检测细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和白介素2(IL-2)的分泌水平;Western blot法检测mTOR通路相关蛋白(mTOR、P70S6K、Akt、AMPK、Raptor)的表达及磷酸化水平。结果 ATG对小鼠脾细胞无显著毒性;ATG显著抑制了ConA诱导的小鼠脾细胞增殖;ATG显著减少了小鼠脾细胞上清液中淋巴因子IFN-γ和IL-2的含量,且具有浓度依赖性;ATG显著降低了mTOR和P70S6K的磷酸化水平,增加了上游AMPK和Raptor的磷酸化,而Akt的磷酸化水平没有明显变化。结论 ATG可显著抑制ConA诱导的小鼠脾细胞增殖并减少IFN-γ、IL-2的分泌,该作用可能与其增强AMPK、Raptor的磷酸化,抑制mTOR、P70S6K的磷酸化有关。; 陆明姬飞虹张林杰; 关键词：牛蒡子苷元细胞增殖 IL-2 IFN-Γ MTOR

衣霉素通过上调TRAIL-R2增加胃癌细胞对TRAIL的敏感性被引量：1: 2013年; 目的:研究衣霉素(tunicamycin,TM)上调胃癌细胞对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)诱导凋亡敏感性的作用机制。方法:采用碘化丙啶染色的FCM法检测TM(1μmol/L)与TRAIL(100μg/L)单独或联合作用3、6、16、24和36h时对SGC-7901细胞凋亡率的影响;FCM法检测TM处理前后细胞表面TRAIL受体1(TRAIL receptor1,TRAIL-R1)、-R2、-R3和-R4的表达情况;实时荧光定量-PCR法检测TRAIL-R2mRNA的表达情况;蛋白质印迹法检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78kDa,GRP78)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)的表达水平;RT-PCR检测X盒结合蛋白(X-box binding protein1,XBP1)mRNA的剪接情况。结果:TM单独作用引起的SGC-7901细胞的凋亡率低,TM和TRAIL联合作用能有效提高SGC-7901细胞的凋亡率;TM能明显上调SGC-7901细胞表面TRAIL-R2的表达水平,而对TRAIL-R1、-R3和-R4却无明显影响;TRAIL-R2mRNA的表达水平随TM作用时间延长而相应升高;GRP78蛋白的上调和XBP-1mRNA的剪接活化证实了TM可诱导未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)的发生;CHOP蛋白的表达水平也在TM作用后上调。结论:TM通过诱导UPR上调TRAIL-R2的表达,从而增加胃癌细胞对TRAIL的敏感性,CHOP介导了TRAIL-R2的上调作用。; 吴萍王家钰张旭东朱孝峰张林杰; 关键词：TNF相关凋亡诱导配体衣霉素

组织蛋白酶B与紫杉醇诱导胃癌BGC-823细胞凋亡的体外实验研究被引量：1: 2011年; 目的通过体外实验研究半胱氨酸蛋白酶B(Cathepsin B)与紫杉醇诱导胃癌BGC-823细胞凋亡的关系。方法将BGC-823细胞(密度为1×105/孔)分别暴露于紫杉醇溶液(终浓度为0～0.5μmol/L)及紫杉醇(终浓度为0.3μmol/L)+Cathepsin B特异性抑制剂[CA-074(Me),终浓度为1.0μmol/L]48 h,并观察紫杉醇单独染毒组和紫杉醇+CA-074(Me)联合染毒组暴露6～48 h的细胞凋亡率和Cathepsin B的表达水平。结果随着紫杉醇染毒浓度的升高和染毒时间的延长,紫杉醇组和紫杉醇+CA-074(Me)组BGC-823细胞凋亡率和Cathepsin B表达水平呈上升趋势。与相同浓度、相同染毒时间紫杉醇组比较,紫杉醇+CA-074(Me)组BGC-823细胞凋亡率和Cathepsin B表达水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Cathepsin B在紫杉醇诱导的细胞凋亡中发挥着一定的促进作用。; 涂龙霞张林杰吴亚欧张梦西; 关键词：组织蛋白酶B 细胞凋亡紫杉醇胃癌BGC-823细胞

RIP1在细胞程序性死亡中作用的研究进展被引量：2: 2013年; 近期研究发现受体相互作用蛋白(receptor-interacting protein,RIP)是细胞生存和死亡的重要交叉点,在细胞的凋亡与存活、程序性坏死等过程中发挥着关键性的作用。RIP1为RIP家族中的第一个成员,是一种重要的细胞信号转导调控分子。RIP1的结构与生物学功能及在细胞程序性死亡中的作用具有重要意义。; 章余妹张林杰; 关键词：凋亡程序性坏死

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2011A167)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2011A167)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈