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抗DDA抗体的制备及其特性研究被引量：3: 2008年; 制备抗DDA抗体,建立间接竞争酶联免疫吸附实验(Indrect Competitive Enzyme-linked Immunosorbent Assay,idc-ELISA)方法,以测定海水样品和海洋贝类中的有机氯农药滴滴涕(DDT)代谢产物。采用碳二亚胺法,将半抗原DDA分别与载体蛋白牛血清白蛋白(Bovine serumalbumin,BSA)和卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)偶联,得到完全抗原。以DDA-BSA为抗原,免疫BALB/c小鼠,制备抗DDA抗体。研究表明,5只鼠产生的抗体对DDA都能产生灵敏的特异性免疫反应,以DDA-OVA为包被抗原,用5#抗体建立间接竞争ELISA方法检测海水样品和海洋贝类中的有机氯农药DDT代谢产物DDA,最低检出限为:10.0ng·mL-1,海水加标样平均回收率122%,批间变异系数30%,贝类加标样平均回收率为131%,批间变异系数22%。; 刘仁沿董玉华许道艳梁玉波; 关键词：DDA DDT 酶联免疫吸附实验

胶体金免疫层析方法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的初步研究被引量：12: 2008年; 建立了赤潮毒素腹泻性贝毒软海绵酸的快速胶体金免疫层析检测方法。通过细胞融合,制备抗软海绵酸单克隆抗体,胶体金标记抗体,建立快速检测软海绵酸的免疫层析试纸条方法。检出限500 ng/mL(50 ng/条),探讨了影响测试方法的因素和提高灵敏度的可能手段。; 刘仁沿梁玉波陈冰君许道艳梁斌; 关键词：单克隆抗体胶体金

一种检测麻痹性贝毒的高效液相色谱法被引量：10: 2006年; 提出了一种利用高效液相色谱法同时分析麻痹性贝毒GTX组分和NEO/dc STX/ STX组分的方法.本法仅使用了一种缓冲溶液作为流动相,在Inertsil C8-3色谱柱（250 mm×4.6 mm, 5 μm）上,采用梯度改变乙腈在流动相中的比例和流速,一次进样可同时定性及定量待测试样中的上述全部毒素组分.该缓冲溶液为9.0 mmol/L磷酸铵缓冲溶液（pH=7.2）,含有2.8 mmol/L的庚烷磺酸钠.色谱分离过程首先以纯水相缓冲溶液进行等度洗脱,在16.5～19 min向流动相中梯度加入1.5%的乙腈,加速GTX3和GCX2的洗脱,以避免GTX2的色谱峰与乙腈的溶剂峰重叠,随后从19 min开始加大流动相中乙腈的比例为8.5%,以缩短边缘组分的保留时间.荧光检测器的激发波长和发射波长分别设为330 nm和390 nm.用本方法分析染毒的华贵栉孔扇贝和近江牡蛎,证实了本方法对PSP毒素具有良好的分析测定效果.; 江天久江涛谢丽琪欧阳姗周亚敏; 关键词：高效液相色谱柱后衍生麻痹性贝毒

失去记忆性贝毒ASP酶联免疫检测方法的研究被引量：9: 2007年; 建立了赤潮毒素失去记忆性贝毒中主要成分软骨藻酸(domoic acid,DA)的竞争酶联免疫检测方法。通过将DA偶联到蛋白载体上,免疫BALB/c小鼠,免疫数次后,得到抗DA的多克隆抗血清,以DA-OVA为包被抗原,利用抗原抗体反应,建立间接竞争酶联免疫吸附技术(Enzyme-linked immunosorbant assay,ELISA)分析检测海水样品和海洋贝类中的赤潮毒素失去记忆性贝毒DA的方法。结果表明,该方法最低检出限10μg/L,海水样品平均回收率102.2%,批内变异系数12.0%;贝类样品平均回收率为111.5%,批内变异系数4.28%。; 许道艳刘仁沿董玉华梁玉波; 关键词：DA ELISA

酶联免疫吸附方法分析海水和贝类中的滴滴涕及代谢物被引量：18: 2007年; 采用间接竞争酶联免疫吸附分析（Ind irect Competitive Enzym e-linked Immunosorbent Assay,ELISA）方法测定海水样品和海洋贝类中的有机氯农药滴滴涕及其主要代谢产物的含量。采用碳二亚胺法,将半抗原DDA分别与载体蛋白牛血清白蛋白（Bovine serum album in,BSA）和卵清蛋白（Ovalbu-m in,OVA）偶联,得到包被抗原和免疫抗原。以DDA-OVA作为免疫抗原,免疫雌性BALB/c小鼠,免疫数次后,测定血清中抗体效价。以DDA-BSA为包被抗原,免疫多克隆抗血清为多克隆抗体,建立间接竞争酶联免疫吸附方法分析检测海水样品和海洋贝类中的有机氯农药二氯二苯三氯乙烷（DDT）及其代谢产物2,2-双（4-氯苯基）乙酸（DDA）、2,2-双（4-氯苯基）-1,1-二氯乙烷（DDD）、2,2-双（4-氯苯基）-1,1-二氯乙烯（DDE）的方法。最低检出限分别为DDT：25 ng/m l,DDA：1.56 ng/m l,DDD：25 ng/m l,DDE：25 ng/m l。贝类样品DDA回收率为96.37%~100.88%,批内变异系数为2.28%～5．13％；贝类样品DDT回收率为93．86％～100．08％，批内变异系数为4．71％～7．68％；海水样品DDT回收率88．23％，批内变异系数6．60％。; 董玉华刘仁沿许道艳梁玉波陈冰君赵元凤; 关键词：DDT 代谢物酶联免疫吸附分析

酶联免疫吸附法分析失去记忆性贝毒ASP: 建立了赤潮毒素失去记忆性贝毒中主要成分软骨藻酸(Domoic Acid,DA)的竞争酶联免疫检测方法。通过将DA偶联到蛋白载体上,免疫BALB/c小鼠,免疫数次后,得到抗DA的多克隆抗血清,以DA-OVA为包被抗原,利用...; 许道艳刘仁沿李伟梁玉波; 关键词：DA ELISA; 文献传递

赤潮甲藻毒素麻痹性贝毒的生物合成研究进展被引量：5: 2004年; 简要介绍了赤潮甲藻毒素麻痹性贝毒的生物合成过程及毒素结构的化学转换和生物转换方面的研究进展。包括利用放射性标记物质喂养产毒甲藻Gonyaulax tamarensis的研究实验,提出了该甲藻是通过一个乙酸单元或者它的衍生物与精氨酸或其等价物在α碳上的胺基的克莱森聚合(CLAISEN),随后失去羰基碳,并在相邻的羰基碳上形成咪唑环而合成麻痹性贝毒的理论过程。还介绍了N-磺酰基耦联的麻痹性毒素被弱酸和生物系统中的N-磺酰酶水解时结构转换方面的研究进展。也介绍了我国的研究进展和该领域今后的研究方向。; 刘仁沿马德毅梁玉波; 关键词：麻痹性贝毒生物合成

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国家高技术研究发展计划(2002AA635150)