重庆市自然科学基金(CSTC2005BB5314)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：吴永忠郭启帅李少林黄曦更多>>
- 相关机构：重庆市肿瘤研究所重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向EGFR基因RNA干扰对人卵巢癌SKOV_3细胞增殖的抑制作用被引量：1
- 2009年
- 目的利用RNA干扰技术下调表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的表达,观察其对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。方法构建针对EGFR基因的siRNA真核表达载体,转染入卵巢癌SKOV3细胞中,并筛选稳定表达siRNA的转化克隆,RT-PCR及Western blot分别检测EGFR mRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,克隆形成实验及MTT法检测细胞克隆形成率及细胞体外的增殖情况。结果成功构建表达质粒pGenSil-HK、pGenSil-EGFR1和pGenSil-EGFR2,并转染SKOV3细胞,通过G418筛选后获得稳定转染克隆,RT-PCR及Western blot分析表明转染pGenSil-EGFR1、pGenSil-EGFR2后的细胞EGFR mRNA和蛋白表达均受到了明显抑制,EGFR mRNA抑制率分别为41.87%和68.07%,蛋白表达抑制率分别为45.21%和70.25%。与未转染组和pGenSil-HK组相比,pGenSil-EGFR2组细胞凋亡比例显著增加,G1期细胞增多,而S期细胞减少(P<0.05);转染pGenSil-HK组克隆形成率为(0.82±0.03),转染pGenSil-EGFR2组克隆形成率为(0.61±0.04),二者比较差异显著(P<0.05),MTT显示细胞培养36h后,pGenSil-EGFR2组的细胞生长均显著低于未转染组和转染pGenSil-HK组(P<0.05)。结论靶向EGFR基因RNA干扰能够阻抑卵巢癌SKOV3细胞中的EGFR表达,诱导细胞凋亡、调控细胞周期再分布、抑制细胞增殖。
- 郭启帅黄曦吴永忠李少林
- 关键词：RNA干扰表皮生长因子受体SKOV3细胞细胞周期
