国家高技术研究发展计划(2007AA02Z228)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：陈宁徐庆阳谢希贤徐兰兰史建明更多>>
- 相关机构：天津科技大学更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 葡萄糖流加方式对黄色短杆菌生产L-亮氨酸的影响被引量：3
- 2010年
- 利用30 L发酵罐,研究了黄色短杆菌TK0303生产L-亮氨酸的发酵工艺。考察了初始葡萄糖浓度和发酵过程中3种补料策略(分批间歇流加补料、恒葡萄糖浓度流加补料和DO-在线识别流加补料)对菌体生物量、L-亮氨酸产量、副产物含量及糖酸转化率的影响。最终确定:分批补料发酵的初始葡萄糖浓度为60 g/L,葡萄糖补加采用DO-在线识别流加方式。根据溶氧响应信号的特征反馈控制葡萄糖的流加速率,可实现葡萄糖的限制培养,有效减少了发酵副产物的含量,菌体生物量和L-亮氨酸产量得到显著提高,分别为21.8 g/L和41.3 g/L,且糖酸转化率高达22.4%。
- 徐庆阳马雷程立坤陈宁
- 关键词：葡萄糖黄色短杆菌L-亮氨酸
- 谷氨酸棒杆菌YILW苏氨酸脱水酶基因的克隆表达及酶学性质被引量：3
- 2011年
- 将L-异亮氨酸生产菌谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum YILW）苏氨酸脱水酶（threonine de-hydratase,TD）的编码基因ilvA在大肠杆菌中进行异源表达及进行初步的酶学性质研究。分别以C.glutamicum ATCC13032、YILW的基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增出苏氨酸脱水酶的编码基因ilvA,测序获得编码序列。利用质粒PET-His将该基因在大肠杆菌BL21（DE3）中进行重组表达、金属螯合纯化,对其酶学性质进行初步研究。结果显示C.glutamicum YILW编码基因序列与已报道的ilvA序列相差5个碱基,相似度为99.6%,第383位氨基酸由苯丙氨酸突变为缬氨酸。酶学性质研究表明：重组酶YilwTD最适反应温度为32℃,在20~55℃范围内该酶较稳定,最适pH为6.7,该酶底物专一性强,对最适底物苏氨酸的米氏常数Km=8.32 mmol/L,最大反应速度Vmax=3.18×104U/mg,与野生型酶相比,突变（F383V）后可显著降低终产物对酶的反馈抑制作用。为揭示突变对苏氨酸脱水酶活性的影响及进一步利用基因工程技术改造L-异亮氨酸生产菌,提高L-异亮氨酸产量奠定了基础。
- 史建明徐兰兰徐庆阳谢希贤陈宁
- 关键词：谷氨酸棒杆菌酶学性质
