教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-10-0175)
- 作品数：30 被引量：143H指数：6
- 相关作者：杨桂连王春凤杨文涛石少华刘玉颖更多>>
- 相关机构：吉林农业大学黑龙江职业学院吉林农业科技学院更多>>
- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- H9N2亚型禽流感病毒M1基因的克隆及其原核表达被引量：2
- 2014年
- 为克隆H9N2亚型禽流感病毒M1基因并研究其原核表达产物的反应原性,从H9N2亚型禽流感病毒中提取病毒基因组RNA,采用RT-PCR方法克隆了M1全长基因。把M1基因克隆至pMD18-T载体中之后进行测序。M1基因亚克隆至pET-28a(+)表达载体中,构建重组表达质粒pET-28a-M1。该重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)并经IPTG诱导表达,对表达产物进行纯化和鉴定。测序分析结果表明,本研究克隆的M1基因与数株甲型流感病毒的M1基因的核苷酸同源性为89.7%~99.1%。SDS-PAGE分析表明,构建的重组蛋白以可溶性形式存在。Western-blot鉴定结果表明,它具有良好的反应原性。M1的成功表达为进一步研制新型流感疫苗奠定了基础。
- 石少华杨文涛胡静涛王倩黄海斌许云飞赵亮石春卫王春凤杨桂连
- 关键词：禽流感病毒克隆原核表达
- TSL-1抗原在旋毛虫感染免疫及诊断中的应用
- 2014年
- 旋毛虫TSL-1抗原具有较强的免疫原性,可以直接激活肥大细胞,诱导Th2型免疫反应,引起宿主的保护性免疫应答。TSL-1抗原是旋毛虫分泌性蛋白,是理想的旋毛虫感染的诊断抗原。现对旋毛虫感染TSL-1抗原参与的免疫学反应概况及其作为诊断抗原的研究进展作一综述。
- 周薇杨文涛王春凤杨桂连
- 关键词：旋毛虫肥大细胞免疫保护
- 甲型流感病毒NP和M2的特性及其在疫苗研制中的应用被引量：3
- 2014年
- 甲型流感病毒核蛋白(NP)为该病毒内部的单体结构蛋白,基质蛋白2(M2)是该病毒囊膜上具有非糖基化跨膜结构的离子通道蛋白,二者均具有高度保守的氨基酸序列并对流感病毒复制及适应宿主起着重要作用。由于传统甲型流感疫苗具有诸多缺点,越来越多的学者选取该病毒的保守序列研制新型通用疫苗。本文主要论述了NP和M2的特性以及相关通用疫苗的研究成果。
- 蔡若鹏杨文涛杨桂连王春凤
- 关键词：甲型流感
- 细胞自噬在机体免疫防御中识别、加工、递呈抗原的作用被引量：8
- 2015年
- 细胞自噬（Autophagy）是通过细胞质中的酸性溶酶体对异常细胞器、蛋白质以及病原体的吞噬、降解,从而形成一种胞内环境分解代谢的平衡机制。细胞自噬对机体的保护与防御尤为重要,特别在免疫系统中发挥重要的生物学作用,是链接先天性免疫与适应性免疫的重要组成部分。
- 崔玉琳齐翀王春凤杨桂连
- 关键词：细胞自噬免疫防御机体抗原递呈生物学作用
- CRISPR/Cas9技术构建小鼠癌症模型的初步研究进展被引量：1
- 2016年
- CRISPR（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats）首次在K12大肠杆菌的碱性磷酸酶基因位点附近发现,后统一称为规律成簇间隔短回文重复序列,是在大多数细菌、古细菌中广泛存在的一类独特的DNA规律性重复序列[1]。Cas（CRISPR-associated）基因是位于CRISPR区域临近处的蛋白质编码基因,而且相对保守。
- 刘玉颖杨文涛杨桂连王春凤
- 关键词：碱性磷酸酶古细菌编码基因核糖核蛋白基因位点基因组分析
- 白细胞介素-2在动物疾病防治中的应用进展被引量：10
- 2013年
- 白细胞介素-2(IL-2)是免疫学研究的重要细胞因子之一,在动物疾病防治中发挥重要作用,显示了良好的应用前景。就IL-2作为免疫佐剂增强疫苗免疫效果和提高动物抗感染性疾病能力等方面进行了综述,并对应用中存在的问题进行了探讨。
- 沙万里杨桂连王春凤
- 关键词：白细胞介素-2细胞因子免疫增强
- 猪白细胞介素18成熟蛋白基因的克隆与表达被引量：1
- 2012年
- 目的克隆猪白细胞介素18(pIL-18)成熟蛋白基因,并在植物乳杆菌(Lb.plantarum)NC8中进行表达。方法通过RT-PCR方法从猪脾脏细胞中扩增出pIL-18成熟蛋白基因,克隆到T载体pMD18-T后测序;将阳性基因片段克隆至大肠埃希菌-乳酸菌穿梭表达载体pSIP-409构建重组表达载体pSIP-409-IL-18,进行酶切和PCR鉴定;应用电穿孔技术将其转化至Lb.plantarum NC8中,经SppIP诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western-blot分析。结果经测序,pIL-18成熟蛋白基因核苷酸长度为579 bp,编码193个核苷酸;酶切和PCR鉴定证明成功构建了重组表达载体pSIP-409-IL-18;SDS-PAGE及Western-blot分析表明重组菌表达了18 kD的融合蛋白,该重组蛋白可以与鼠抗猪IL-18多克隆抗体反应。结论成功克隆了pIL-18成熟蛋白基因,并获得有生物活性的pIL-18重组乳酸菌,为研制开发IL-18重组乳酸菌制剂奠定基础。
- 王春岩刘莉杨文涛王美芳石春卫杨桂连王春凤
- 关键词：白细胞介素18乳酸菌克隆基因表达
- H9N2亚型禽流感病毒HA-DCpep融合基因重组乳杆菌的构建及免疫原性分析被引量：3
- 2014年
- 为了构建HA-DCpep融合基因重组乳杆菌并检测其表达产物的免疫原性,以pSIP409-HA质粒为模板,采用PCR方法将HA基因和DCpep基因融合。将目的基因克隆至pGEM-T载体中,进行测序。再将阳性基因亚克隆至大肠杆菌-乳杆菌穿梭表达载体pSIP409中,电转化入植物乳杆菌NC8中,经SppIP诱导后对表达产物进行Western-blot分析。结果显示,重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep的裂解物中出现大小约为64ku的反应条带,大小与预期结果相符,表明重组融合蛋白具有良好的反应原性。重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep口服免疫SPF雏鸡后,在免疫后第14天可被检出特异性HI抗体,28d后达到高峰。结果表明,应用重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep免疫雏鸡能刺激机体产生特异性体液免疫应答反应,这为研制预防禽流感的重组乳杆菌口服制剂奠定了基础。
- 石少华杨文涛叶丽萍黄海斌蔡若鹏李雨宸闫晓月王春凤杨桂连
- 关键词：禽流感病毒免疫原性
- 树突状细胞在病毒感染动物免疫应答中的作用被引量：4
- 2014年
- 树突状细胞被认为是功能最强的专职抗原提呈细胞。当病毒感染动物体,激活天然免疫信号通路,进而活化树突状细胞。树突状细胞摄取和加工抗原,活化T、B细胞,诱导免疫应答,在调节动物免疫应答中起着重要作用。
- 朱诗语王春凤杨桂连
- 关键词：树突状细胞病毒免疫应答
- Toll样配体的免疫作用及在免疫佐剂中的应用
- 2014年
- 有效的新型疫苗的研究，不仅依赖于新的疫苗种类和设计策略，还要求疫苗制品中不可缺少的组分--佐剂的发展和创新。从最初的传统佐剂铝盐佐剂到弗氏佐剂再到目前多种类型的佐剂，佐剂类型正在不断发展。佐剂能通过一系列机制加强抗原提呈能力和疫苗的免疫效果，所以成功的疫苗必须要联合佐剂的使用。
- 杨文涛石少华王春凤杨桂连
- 关键词：免疫佐剂免疫作用TOLL配体抗原提呈能力
