江苏省自然科学基金(BK20131392)
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 相关作者：于金华闫明张光东吴友农郭晓钰更多>>
- 相关机构：南京医科大学南京医科大学附属口腔医院苏州大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雌激素缺乏对大鼠颌骨骨髓间充质干细胞增殖及成骨向分化能力的影响被引量：5
- 2014年
- 目的 探讨雌激素缺乏对大鼠颌骨骨髓间充质干细胞（mandibular bone marrow stem cells,mBMSC）增殖及成骨向分化能力的影响,以期为组织工程颌骨再生及种子细胞选择提供实验室依据.方法 将10只8周龄成年雌性SD大鼠用抽签法随机分为假手术组及卵巢去势组（去势组）,每组5只.全麻下将去势组大鼠双侧卵巢摘除,假手术组行相同切口,保留双侧卵巢.1个月后处死大鼠,分离下颌骨,全骨髓培养法分离培养两组mBMSC.采用甲基噻唑基四唑（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法、碱性磷酸酶（alkaline phosphotase,ALP）活性检测、茜素红染色、实时反转录PCR和蛋白质印迹法检测雌激素缺乏对mBMSC增殖及成骨向分化能力的影响.结果 MTT生长曲线显示去势组mBMSC的增殖能力显著低于假手术组.两组细胞培养3d后去势组ALP活性[（0.710±0.011） Sigma单位/蛋白]显著低于假手术组[（1.512±0.021） Sigma单位/蛋白],差异有统计学意义（P＜0.01）.14d时茜素红染色结果显示去势组mBMSC形成的矿化结节较假手术组少,钙离子浓度定量检测结果显示去势组mBMSC钙结节中的钙离子含量[（0.433±0.045） μg/g]显著低于假手术组[（1.453±0.131） μg/g]（P＜0.01）.实时反转录PCR及蛋白质印迹法检测结果显示,去势组mBMSC在培养7 d后,各项骨向分化相关指标的表达均显著低于假手术组（P＜0.05）.结论 雌激素缺乏显著降低大鼠mBMSC体外增殖及成骨向分化能力.
- 王燕萍宋卫健景双林于金华
- 关键词：雌激素类间充质干细胞细胞分化
- 人源性雌激素受体alpha高表达慢病毒载体的构建与鉴定
- 2015年
- 目的构建人源性雌激素受体alpha(ERα)高表达慢病毒载体,以用于后续雌激素受体对牙源性干细胞分化能力的研究。方法以p EGFP-ERα为模板,RT-PCR方法体外扩增ERα基因,经测序后重组入慢病毒载体PMSCV-GFP,将正确构建的PMSCV-ERα质粒导入293T细胞进行PMSCV-ERα慢病毒制备,Western Blot检测ERα的表达水平。结果体外成功扩增ERα并重组入PMSCV-GFP慢病毒载体,Western Blot结果显示PMSCV-ERα组的ERα水平较对照组(PMSCV-GFP组)表达明显增高。结论成功构建人源性雌激素受体alpha高表达慢病毒载体。
- 刘根霞王子露景双林闫明张光东于金华
- 关键词：慢病毒载体293T细胞
- 雌激素受体α-shRNA慢病毒载体对根尖牙乳头干细胞成牙/成骨向分化的影响被引量：1
- 2015年
- 目的构建雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒表达载体,探讨其对根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAPs)体外成牙/成骨向分化的影响。方法根据shRNA设计原则,合成用于体内干扰ERα的两条shRNA序列,重组入慢病毒载体PLKO.1。将PLKO.1对照组与ERα-shRNA(sh ERα-1和sh ERα-2)实验组分别感染SCAPs,western blot检测ERα的表达及其对SCAPs成牙/成骨向分化的影响。结果测序结果证实重组质粒构建成功;体外实验表明,SCAPs转染ERα-shRNA后ERα蛋白表达水平降低,其中sh ERα-2组对ERα的下调作用更明显,两组ERα-shRNA中核心结合蛋白因子2(runt-related transcription factor-2,RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)、牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的表达均有不同程度下调,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论慢病毒介导的ERα-shRNA成功在体外抑制了目的基因的表达,并显著影响了根尖牙乳头干细胞的成牙/成骨向分化。
- 马姝闫明吴锦涛王子露张光东于金华
- 关键词：短发夹RNA慢病毒载体雌激素受体Α
- MTA对牙周膜干细胞RANKL/OPG表达水平的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨MTA对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达的影响。方法通过酶消化法分离培养PDLSCs,依据碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性筛选最佳MTA刺激浓度,将PDLSCs分别于对照组(普通培养基)和2 mg/m L MTA条件培养液培养3 d和7 d后,蛋白免疫印迹法分别检测RANKL、OPG蛋白表达。结果 MTA刺激3 d和7 d组,OPG蛋白表达较对照组升高,RANKL蛋白表达较对照组降低。结论 MTA可通过调节RANKL/OPG系统,参与调节PDLSCs成牙/骨及破牙/骨活性。
- 周益翔刘根霞马姝卢亚蝶张光东于金华
- 关键词：MTA人牙周膜干细胞核因子-ΚB受体活化因子配体骨保护素
- 雌激素受体α高表达慢病毒载体对根尖牙乳头干细胞成牙/成骨分化的影响被引量：2
- 2016年
- 目的雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)高表达慢病毒载体感染根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAPs),探讨其在SCAPs体外成牙/成骨分化中的作用。方法 ERα高表达慢病毒载体感染SCAPs,Western blot检测ERα的表达,茜素红染色和Western blot检测其对SCAPs成牙/成骨分化的影响。结果体外实验表明,实验组(ERα)ERα的蛋白表达水平较对照组(GFP)明显升高,实验组成牙/成骨向分化标志蛋白(碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、成骨细胞特异性转录因子(osterix,OSX)、牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)和骨钙素(osteocalcin,OCN))表达水平在3d或7d的表达均有不同程度上调,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。在成骨诱导条件下,实验组(ERα)的矿化结节形成量较对照组(GFP)多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论慢病毒介导的ERα高表达载体成功在体外上调了目的基因的表达,并促进根尖牙乳头干细胞的成牙/成骨分化。
- 卢亚蝶闫明于金华
- 关键词：慢病毒载体过表达雌激素受体Α
- 根管器械分离的研究进展被引量：10
- 2015年
- 根管器械分离主要是指根管治疗过程中所使用的器械意外折断于根管内或超出根尖孔,它阻碍了根管治疗的顺利进行,并可能影响根管治疗的效果。本文对1995年以来的相关文献进行回顾,对器械分离发生率研究中存在的问题进行了分析,对发生器械分离后取出、旁路通过和根尖外科手术等处理方案进行了详细阐述,并初步总结了预防器械分离的要点。
- 陈慧芬司海燕郭晓钰吴友农于金华
- 关键词：器械分离镍钛器械根管预备
- Runx2在牙齿发育过程中的表达研究进展被引量：5
- 2014年
- Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)是一种在成骨细胞分化及牙齿的发育过程中起着重要作用的转录因子,牙齿以及骨组织中的特异性基质蛋白在转录水平均受其调控。本文结合Runx2的转录因子特性以及在牙齿发育过程中的表达特征,认为Runx2可能是牙齿发育和矿化的重要转录调控因子。
- 李瑶周益翔于金华
- 婴幼儿龋与父母的养育行为被引量：1
- 2014年
- 婴幼儿龋病因复杂,其发生与父母的养育行为如:喂养、饮食、口腔清洁、就医行为等密切相关。本文就近10年来有关婴幼儿龋与父母养育行为的相关研究及其防治作一综述。
- 郭晓钰吴友农
- 关键词：婴幼儿龋
