国家高技术研究发展计划(2002AA2170312)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 相关作者：刘景晶胡卓逸吴洁陆毅金亮更多>>
- 相关机构：中国药科大学上海水产大学广东药学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 两种生长激素类似肽对大鼠和人流产胎儿垂体激素分泌的影响研究
- 2005年
- 目的研究ProProhGHRH(144)OH和ProProhGHRH(144)GlyGlyCys两种神经肽对大鼠垂体或人流产胎儿垂体激素分泌的影响。方法将神经肽加入KrebsRinger缓冲液内,在不同保温时间内测定大鼠垂体GH或人流产胎儿垂体的hGH、hTSH、hFSH、hLH和hPRL在体外的释放值。GH浓度用人GH放射免疫多抗试剂盒测定,其他垂体激素浓度用顺磁性粒子化学发光免疫测试试剂盒确定。结果鼠垂体活性结果显示,ProProhGHRH(144)OH组(0.1～10μg/mL)和ProProhGHRH(140)GlyGlyCys组(0.01～1μg/mL)的GH刺激值,与刺激前的空白对照值相比有明显的提高,而且随肽浓度的增加,GH的释放量明显提高。在相同浓度下,ProProhGHRH(144)GlyGlyCys肽释放的GH值远大于ProProhGHRH(144)OH肽释放的GH值,即使ProProhGHRH(144)GlyGlyCys的剂量0.01μg/mL,仍有较好的活性。流产胎儿垂体的体外测试结果显示,在5μg/mL剂量下,3种多肽都产生很好的活性,ProProhGHRH(144)GlyGlyCys的平均活性是ProProhGHRH(144)OH的1.71倍,但3种活性多肽间差异没有显著性(P>0.05)。对hTSH、hFSH、hLH和hPRL垂体激素的测试结果显示,这两种神经肽对它们没有刺激作用。结论ProProhGHRH(144)GlyGlyCys和ProProhGHRH(144)OH有很好的GH释放活性和功能特异性。测试结果表明,GHRH的C端改构可调节垂体释放生长激素的活性。
- 唐松山张娟辉刘景晶
- 关键词：神经肽垂体垂体激素
- 人甲状旁腺素活性片段前体物Pro-Pro-hPTH(1-34)的制备及活性研究
- 2006年
- 目的制备出具有生物活性的人甲状旁腺素活性片段类似物,并对其活性进行考察。方法采用基因工程方法:大肠杆菌BL 21为宿主菌,pET 28a为表达载体,天门冬酰胺酶Ⅱ切除信号肽的C末端片段为融合伙伴,在融合伙伴和目的肽结合处引入Asp Pro酸敏感位点及二肽酶Ⅳ识别的N端Pro Pro位点,之后经诱导表达,酸水解使融合伙伴和目的肽分离。结果成功构建了hPTH(1 34)的融合表达体系,它能高效表达含hPTH(1 34)的融合蛋白,经纯化,得到多肽纯品,经鉴定,该多肽的分子量、氨基酸组成均与设计的分子相符,工程菌中用于编码该多肽的DNA片段其测序结果也与原设计相符,是表达该多肽的正确模板。该多肽在Parsons雏鸡分析及卵巢摘除大鼠模型试验中均显示显著活性。结论用基因工程方法成功地制备出人甲状旁腺素活性片段类似物,该产物具有显著生物活性及潜在的药用价值。
- 王春晓金亮陆毅康永锋刘景晶
- 关键词：活性片段
- mal-sac-mPEG的制备及对溶菌酶的初步修饰研究被引量：3
- 2005年
- 由马来酸酐、6-氨基正己酸及单甲氧基聚乙二醇为原料合成马来酸酐-6-氨基己酸-mPEG酯,用于蛋白质巯基的修饰.对原料的反应比例、柱层析洗脱剂等进行了研究.通过熔点测试、红外光谱分析、1H-NMR鉴定和紫外扫描等对中间产物及终产物进行了初步结构鉴定,并以SDS-PAGE分析活化mPEG修饰溶菌酶的情况.结果:建立了较简便的合成及分离纯化马来酸酐-6-氨基己酸-mPEG酯的方法.mal-sac-mPEG的熔点为55～56℃,紫外吸收光谱在320 m出现特征吸收峰,红外光谱有典型的特征吸收峰.活化mPEG可修饰溶菌酶.
- 吴洁胡卓逸刘景晶
- 关键词：聚乙二醇化学修饰溶菌酶
- 重组水蛭素相关肽Hi-lys的表达与纯化(英文)被引量：4
- 2005年
- 为开发一种新的有临床应用价值的抗血栓药物,根据水蛭素保持抗凝活性的2 0肽片段,设计并构建了水蛭素相关肽(Hi lys)与天冬酰胺酶C端的融合表达系统.为方便目的肽与融合伙伴的分离,增加了富含带电序列的8肽(KRKRKKSR)及酸敏感的天冬氨酰 脯氨酸(Asp Pro)位点,获得了表达质粒pED P8 Hi lys.将其转化E .coliBL 2 1,玉米浆培养基(kanr)培养,乳糖诱导获得融合蛋白(AnsB C P8 Hi lys)的高效表达.通过细菌裂解、包涵体洗涤、尿素溶解、乙醇沉淀、酸水解和DEAE 纤维素5 2柱层析纯化获得目的肽Hi lys ,用凝血酶测定法测得其抗凝活性为5 0ATU mg .
- 吴洁胡卓逸刘景晶
