国家自然科学基金(30572030) 作品数:13 被引量:24 H指数:3 相关作者: 谢海龙 李金花 曾龙武 李晓杰 梅徽 更多>> 相关机构: 南华大学 湘南学院 中南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省重点学科建设项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Cortactin的特征、功能及与肿瘤的关系 被引量:1 2009年 细胞皮质区肌动蛋白结合蛋白(cortical actin-binding protein,Cortactin)是一种含有特殊重复序列结构域的微丝肌动蛋白结合蛋白,它直接参与了细胞皮层微丝细胞骨架的组建。它又是细胞内Src类酪氨酸蛋白激酶主要底物之一,代表了一类高度保守的胞内皮层信号蛋白质家族。近几年来,对于Cortactin在细胞中的作用及其在细胞运动中分子机制的研究取得很大进展。 梅徽 谢海龙关键词:CORTACTIN EMS1 肿瘤 EMS1蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义 被引量:4 2008年 背景与目的:研究表明EMS1(chromosome eleven,band q13,mammarytumour and squamous cell carcinoma-associated gene1)与多种恶性肿瘤的发生、发展及转移相关。本研究旨在探讨EMS1蛋白在胃癌、胃上皮内瘤变和正常胃粘膜组织中的表达。方法:采用免疫组化SP法,分别检测20例正常胃粘膜、38例胃上皮内瘤变和146例胃癌组织中EMS1蛋白的表达。结果:EMS1蛋白表达定位于细胞浆;正常胃粘膜EMS1蛋白阳性率20.0%(4/20),胃上皮内瘤变中阳性率68.4%(26/38),胃癌中阳性率89.7%(131/146);EMS1蛋白在胃癌中的表达高于胃上皮内瘤变及正常胃粘膜(P<0.001),胃上皮内瘤变与正常胃粘膜差异亦具有显著性(P<0.001)。早期胃癌阳性率为60.9%(14/23),低于进展期胃癌的95.1%(117/123),差异有统计学意义(P<0.001);伴淋巴结转移组EMS1蛋白阳性率为96.8%(91/94),与无淋巴结转移组的77.0%(40/52)相比差异有显著性(P<0.001);而与患者性别、年龄以及肿瘤大小、分化无关。结论:EMS1蛋白高表达与胃癌发生、淋巴结转移及临床分期有关。 李晓杰 林敏 刘重元 谢海龙关键词:胃肿瘤 免疫组化 LCRG1基因5′端调控区域的克隆及活性测定 2008年 背景与目的:LCRG1基因的调控机制至今不清楚,本研究拟克隆LCRG1基因的转录起始区上游序列,寻找与其表达有关的调控序列。方法:利用生物信息学技术预测LCRG1基因5′端调控区域的启动子活性区域,采用PCR方法从人基因组DNA中扩增LCRG1基因5′端调控区域1.776kb(-1191bp~+585bp)片段,并将其构建到荧光素酶报告基因pGL3basic载体中。与内参照质粒PhRL-SV40共转染COS7细胞,通过双荧光素酶活性检验测定其启动子活性。结果:成功扩增LCRG1基因5′端调控区域1.776kb(-1191bp~+585bp)片段,测序正确;pGL3-1776启动子活性大约为阳性对照组pGL3-control的0.16倍,为阴性组pGL3basic的35倍。结论:成功克隆LCRG1基因5′端调控区域1.776kb(-1191bp~+585bp),该片段具有启动子活性。 谢海龙 李金花关键词:喉癌 启动子 生物信息学技术 PCR LCRG1基因启动子关键顺式调节元件的鉴定 被引量:3 2009年 LCRG1基因(laryngeal carcinoma related gene1,LCRG1)是一个新的喉癌候选抑瘤基因,其转录调控机制一直未被阐明.通过限制性内切酶酶切介导对LCRG1基因(-169~+127)区域进行剪切体分析,将LCRG1基因最小启动子定位于-169~-57.应用连接体扫描突变体分析,将关键顺式作用元件确定在-137~-122.生物信息学提示该区存在SP1、E2F1/DP1、EKLF和ZF9转录因子结合位点.利用已知反式作用因子与报告基因质粒进行共转染,提示Spl为有效的反式作用因子,且能上调LCRG1基因的表达.凝胶迁移阻滞实验确定LCRG1基因关键的顺式作用元件区域具有Spl结合位点.LCRG1基因启动子-137~-122片段在该基因表达过程中可能起重要作用,为LCRG1基因功能研究提供了新的证据. 谢海龙 陈主初 李金花 曾龙武 谭桂煌关键词:喉癌 转录调控 顺式作用元件 转录因子SP1 组织芯片技术及其在胃癌研究中的应用 被引量:5 2007年 胃癌是最常见的恶性肿瘤之一,其死亡率居各种恶性肿瘤前列,但是其分子机制仍知之甚少。组织芯片是一种新型的生物芯片,组织芯片技术自问世以来在肿瘤分子病理研究中得到了广泛应用。在胃癌研究中,它为胃癌相关基因的研究提供了一种全新的方法,为寻找胃癌相关基因、进一步筛选和研究胃癌基因芯片的差异表达基因、寻找和检测与胃癌发生、发展及预后相关的生物分子标记,进而阐明其发病分子机制和进行有效预防提供了捷径。 邵志滨 谢海龙关键词:胃癌 组织芯片技术 基因表达 肿瘤相关基因 RNA干扰对膀胱移行细胞癌BIU-87细胞株端粒酶活性及其增殖的影响 被引量:1 2009年 目的探讨针对人端粒酶RNA(hTR)及其催化亚基(hTERT)的小干扰RNA(siRNA)对膀胱移行细胞癌细胞株BIU-87端粒酶活性及其增殖的影响。方法根据人TR mRNA和TERT mRNA的序列,分别设计合成3对不同的且能干扰TR和TERT基因表达的siRNA(TR-siRNA,TERT-siRNA),通过脂质体法将其转染膀胱移行细胞癌BIU-87细胞株,采用荧光定量PCR分析TR、TERT mRNA表达,TRAP-ELISA检测端粒酶活性,MTT法检测细胞增殖。结果3对TERT-siRNA和3对TR-siRNA中,pRNAT-TERT-Ⅲ和pRNAT-TR-Ⅲ可以特异性抑制BIU-87细胞株中TERT和TR表达(分别减少67%和41%,P<0.05),且BIU-87细胞株的生长和端粒酶活性明显受到抑制。结论TR-siRNA和TERT-siRNA能特异且高效阻断各自基因表达,降低端粒酶活性,进而抑制BIU-87细胞的增殖。 谢海龙 谭桂煌 刘重元 程文关键词:小干扰RNA 端粒酶RNA 端粒酶逆转录酶 膀胱移行细胞癌 Sp1和Egr-1对LCRG1基因启动子转录活性的调节研究 被引量:5 2009年 目的:目前LCRG1基因转录调控机制不清,现拟研究Sp1和Egr-1对人LCRG1基因启动子的转录调节。方法:利用MatInspector软件分析LCRG1基因启动子区域内潜在的转录因子结合位点,Sp1、wtEgr-1、mtEgr-1真核表达质粒与LCRG1启动子重组质粒的共转染实验,分析其对LCRG1启动子活性的影响。结果:生物信息学提示LCRG1基因启动子区域存在Sp1和Egr-1等位点,外源性突变型转录因子Egr-1能上调LCRG1基因启动子的活性。结论:突变型转录因子Egr-1可能参与该基因的表达调控。 谢海龙 曾龙武 周晓军关键词:喉癌 启动子 应用cDNA微阵列基因芯片筛选胃低分化腺癌相关基因的研究 2007年 背景与目的:胃低分化腺癌癌变的分子机制至今不清楚,关键是未找到与胃低分化腺癌密切相关的基因。本研究拟建立胃低分化腺癌基因表达谱,筛选差异表达基因,进一步分析差异表达基因与胃癌发生、发展关系。方法:用含10000个已知基因的cDNA微阵列分析胃低分化腺癌和癌旁正常胃黏膜基因表达谱的变化,免疫组化研究差异表达基因与胃癌的关系。结果:二倍以上的差异表达基因212个,其中在胃低分化腺中表达上调169个,表达下调43个。S-P免疫组化结果显示:EMS1蛋白表达定位于胞质,呈黄色至棕黄色;EMS1蛋白在20例正常胃黏膜阳性表达率为20%(4/20),在146例胃癌中阳性表达率为89.72%(131/146);EMS1蛋白在胃癌中的表达高于正常胃黏膜(P<0.001)。结论:发现EMS1与胃癌有关,为进一步寻找胃癌相关基因提供了重要的研究线索。 刘德勇 李晓杰 李金花 谢海龙关键词:CDNA微阵列 胃癌 基因表达 MicroRNA与肿瘤 被引量:2 2007年 Micro RNA(miRNA)是长约20-24nt的单链RNA,它通过与靶mRNA完全或不完全的互补配对,促进目标mRNA降解或抑制蛋白翻译.在细胞增殖、分化、凋亡、基因调控及疾病的发生中扮演重要的角色。miRNA是近几年生命科学研究的热点,已有研究表明miRNA与肿瘤的发生相关。阐明miRNA在癌症发生中的分子机制,对癌症的靶基因治疗策略具有重要意义。 李金花 谢海龙关键词:MICRORNA 非编码RNA 肿瘤 肝细胞癌中EMS1蛋白的表达 被引量:2 2008年 目的探讨EMS1蛋白表达与肝癌发生、发展及临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法,对78例肝癌组织、其中68例附癌旁肝组织和8例正常肝组织中EMS1蛋白表达进行检测。结果EMS1蛋白表达定位于细胞的胞质,着色呈黄色至棕黄色。肝癌中阳性表达率89.69%,高于癌旁及正常肝组织30.26%(P<0.001);无肝硬化肝癌阳性表达率73.91%,低于伴有肝硬化95.56%(P<0.05);伴静脉内癌栓组94.12%与无静脉内癌栓组70.59%差异有显著性(P<0.05);随着组织分级的增高(分化程度的降低),阳性表达率明显增高,其差异有显著性(P<0.05);而与性别、年龄、肿瘤大小无关。结论EMS1蛋白高表达与肝癌发生、肝硬化、静脉内癌栓及组织学分级相关。 李晓杰 胡玉林 谢志斌 谢海龙关键词:肝肿瘤 肝细胞癌 免疫组织化学