江西省科技支撑计划项目(2009BNB05703)
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 相关作者：黄冬艳王萍黄建珍更多>>
- 相关机构：江西农业大学更多>>
- 发文基金：江西省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 副猪嗜血杆菌OMP5的克隆表达及其对豚鼠免疫保护作用被引量：5
- 2012年
- 根据GenBank中登录的副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5(outer membrane protein P5,OMP5)基因序列设计1对特异性引物,以江西分离株NC0807基因组DNA为模板,扩增出OMP5基因。将其克隆到pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-OMP5,质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),通过SDS-PAGE和Western blotting分析重组蛋白的表达情况和反应原性。重组蛋白经镍柱亲和层析纯化后免疫豚鼠,测定其免疫原性和保护效率。结果表明,重组蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达。表达的蛋白分子质量约为43 ku,能被副猪嗜血杆菌阳性血清识别。动物试验结果表明,重组蛋白免疫后能诱导产生高水平的OMP5特异性抗体,并可显著保护豚鼠抵抗副猪嗜血杆菌强毒菌株的攻击,提示OMP5是副猪嗜血杆菌的保护性抗原。
- 王海峰王萍黄建珍黄冬艳
- 关键词：副猪嗜血杆菌原核表达亚单位疫苗
