重庆市教育委员会科学技术研究项目(KJ100620)
- 作品数：10 被引量：43H指数：4
- 相关作者：陈斌何正波郝友进黎万顺余果更多>>
- 相关机构：重庆师范大学更多>>
- 发文基金：重庆市教育委员会科学技术研究项目国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 葱蝇Dorsal基因的克隆·表达及生物信息学分析被引量：1
- 2012年
- [目的]探讨Dorsal与葱蝇滞育发育的关系。[方法]以葱蝇(Delia antiqua)为试虫,采用RACE方法克隆了葱蝇Dorsal的全长cDNA序列;将该序列推导的氨基酸序列在GenBank搜寻同源序列,与搜寻到的14个代表性昆虫Dorsal序列进行相似性比较,并进行系统进化分析;采用半定量RT-PCR方法分析了Dorsal基因在葱蝇非滞育、夏滞育、冬滞育蛹中的表达情况。[结果]克隆了葱蝇Dorsal基因的cDNA序列,全长2 412 bp,开放阅读框1 974 bp,编码657个氨基酸,等电点PI约8.5,分子量72.9 kDa。与GenBank中的其他14个昆虫代表性Dorsal序列相似性比较和进化分析显示葱蝇的Dorsal与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)、拟暗果蝇(Drosophlia pseudoob-scura)的Dorsal序列相似性最大。半定量分析显示葱蝇Dorsal基因在葱蝇冬滞育、夏滞育、非滞育蛹滞育发育关键期的表达量均明显升高,尤其在滞育后期表达量最高,初步判断Dorsal基因与葱蝇滞育发育相关。[结论]为进一步开展Dorsal基因在昆虫滞育发育过程中的功能研究奠定了基础。
- 魏慧敏陈斌任爽
- 关键词：葱蝇RACE系统发育树半定量分析
- 双向电泳技术在昆虫研究中的应用被引量：2
- 2011年
- 随着生命科学进入后基因组学研究时代,蛋白质组学成为其研究热点。双向电泳技术(Two-dimensional electro-phoresis,2-DE)凭借其高灵敏度,高分辨率以及能将数千种蛋白质同时分离等优点,成为蛋白质组学的核心技术之一,在生命科学研究中发挥着不可替代的作用。近年来,随着黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)、家蚕(Bombyx mori)、意大利蜜蜂(Apis mellifera)和冈比亚按蚊(Anopheles gambiae)等昆虫基因组测序的基本完成,昆虫的蛋白质组学研究也迅速展开。本文就双向电泳技术在昆虫遗传学、发育生物学、亚细胞器、免疫学、毒理学、行为学以及媒介学上的研究进展进行了综述。总结前人的研究结果认为,昆虫突变、发育、抗性、行为等变化与蛋白的差异表达或蛋白亚型的变化密切相关,并鉴定了相关的蛋白质。这一研究为全面阐明昆虫的生长发育、生理生化等特性具有重要意义,也对转录水平的研究提供了很好的补充。如何提高双向电泳技术的准确性和重复性,使其在昆虫学上的研究更广泛、更深入是未来研究的重点。
- 胡文霞陈斌王林玲冯国忠
- 关键词：双向电泳昆虫蛋白质组学
- 葱蝇非滞育、冬滞育和夏滞育蛹发育和形态特征比较被引量：6
- 2012年
- 昆虫非滞育、冬滞育和夏滞育蛹具有不同的生理和发育过程。本研究以葱蝇Delia antiqua作为模式种,以黑腹果蝇Drosophila melanogaster蛹的发育形态特征和命名为参照,用解剖、拍照、长度测量和图像处理等方法系统地比较研究了非滞育、冬滞育和夏滞育蛹的发育历期和形态变化,重点在头外翻和滞育相关发育和形态特征,目的在于弄清非滞育、冬滞育和夏滞育蛹发育和形态特征差异,为滞育发育阶段的识别、滞育分子机理研究奠定形态学基础。冬滞育蛹的滞育前期、滞育期和滞育后期分别为4,85和27d,夏滞育蛹的滞育前期、滞育期和滞育后期分别为2,8和22d。从化蛹至头外翻完成为滞育前期,头外翻完成约10h内复眼中央游离脂肪体可见。头外翻的完成是滞育发生的前提,非滞育、夏滞育和冬滞育蛹头外翻发生在化蛹后的48,36和83h,在头外翻过程中发育形态没有差异。头外翻的过程为:首先,头囊和胸部附肢从胸腔外翻,头部形态出现;然后,腹部肌肉继续收缩,将血淋巴和脂肪体推进头部及胸部附肢。葱蝇蛹在完成蛹期有效积温约15%时进入冬滞育或夏滞育。在滞育期,蛹的形态一直停留在复眼中央游离脂肪体可见这一形态时期,且冬滞育和夏滞育的蛹在形态上没有区别。在体长、体宽和体重上,冬滞育蛹最大,夏滞育蛹次之,非滞育蛹最小。在滞育后期,在黄色体出现期间,非滞育蛹的马氏管清楚可见,呈绿色,而滞育蛹的马氏管几乎不可见。本研究为认知昆虫滞育生理、从发育历期和形态上推断滞育发育进程提供了依据。
- 黎万顺陈斌何正波
- 关键词：葱蝇滞育比较形态学发育历期有效积温
- 葱蝇ADH基因的克隆及序列分析
- 2012年
- [目的]对葱蝇(Delia antiqua)ADH基因进行克隆,并对其进行序列分析。[方法]通过RACE的方法克隆葱蝇ADH基因的cDNA序列,同时对该序列进行同源性分析、氨基酸序列比对和系统发育分析。[结果]试验获得的cDNA全长1 088 bp,其中ORF 771 bp,编码256个氨基酸,推测其相对分子质量为30.80 kDa,等电点为8.22;通过该基因推导的氨基酸序列与其他物种的ADH进行相似性比较和系统发育分析,发现葱蝇与刺舌蝇(Glossina morsitans)氨基酸序列的同源性最高。[结论]该研究为ADH基因的进一步研究提供了基础。
- 陈春露陈斌司风玲何正波
- 关键词：葱蝇乙醇脱氢酶系统发育
- 葱蝇实验种群生命表及矩阵模型的组建与分析被引量：4
- 2011年
- 本研究对实验室内饲养的葱蝇种群数量进行了动态预测,旨在为自然种群的研究提供参考。在实验室饲养从日本引进的葱蝇,建立了稳定的实验室种群,编制和分析了该种群的生命表。结果表明,葱蝇实验种群的存活曲线为Ⅱ型曲线,说明葱蝇的卵、幼虫、蛹以及成虫的存活率都比较稳定;种群趋势指数(I)为9.81,世代总存活率为12%。同时,用组分分析的方法分析了各虫态对种群趋势指数贡献的大小。结果表明,对种群趋势指数起主要作用的虫期为蛹期,而成虫产卵前期作用最小。此外,利用不等期年龄组的种群矩阵模型组建方法,并参考所编制的实验种群生命表,组建了葱蝇实验种群矩阵模型。本研究认为,利用该矩阵模型可对实验室里饲养的葱蝇种群动态进行简单预测。
- 周鑫陈斌杜相东何正波李廷景
- 关键词：葱蝇实验种群生命表矩阵模型
- 葱蝇谷胱甘肽S-转移酶基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2012年
- 谷胱苷肽S-转移酶(GST)是昆虫体内广泛存在的一类解毒酶,可以保护机体免受内源性或氧化物的损害。昆虫对一些杀虫剂的抗性与GST表达水平增高有关。GST的研究主要集中在杀虫剂抗性上,可将其作为昆虫的药物靶标,设计和开发新型的杀虫剂。采用RACE的方法,克隆了葱蝇(Delia antiqua)GST基因cDNA的全长序列(GenBank登录号:JQ625502),获得的cDNA全长874bp,其中阅读框ORF 627bp,编码208个氨基酸,推测其相对分子质量为23.9kD,等电点为5.83。通过该基因推导的氨基酸序列与其它物种的GST蛋白进行相似性比较和系统发育分析,发现葱蝇与丝光绿蝇(Lucilia cuprina)的谷胱甘肽转移酶氨基酸序列同源性最高。该结果进一步丰富了GST基因的基础数据,有助于葱蝇的杀虫剂抗性机理和发育机理的相关研究。
- 夏洁陈斌郝友进司风铃
- 关键词：葱蝇谷胱甘肽S-转移酶GST基因系统发育树
- 昆虫滞育相关激素调节的研究进展被引量：9
- 2012年
- 昆虫的生长发育离不开激素的调节。滞育作为昆虫特殊的发育状态,其特征是代谢活动显著降低,发育停滞。在滞育发育过程中,各类激素通常相互协调形成网络,发挥着重要的调节作用。在神经内分泌系统中,由神经细胞分泌的神经肽类激素通常作为上游调控激素,通过调节下游激素的合成和分泌从而影响昆虫的滞育发育;蜕皮激素和保幼激素作为下游激素参与到神经肽类激素的调控网络中。目前已克隆得到滞育激素-性信息素合成激活肽和促前胸腺激素的基因,并对二者在不同滞育型昆虫中的调节作用进行了深入研究。此外,激素受体的研究将为解释激素之间的相互作用提供重要依据;而通过滞育昆虫体内激素水平的调节将为有害昆虫生物防治提供新的方法。
- 徐晶晶陈斌郝友进司凤玲何正波
- 关键词：昆虫滞育激素调节保幼激素蜕皮激素
- 黑腹果蝇热激蛋白基因家族的生物信息学分析被引量：5
- 2011年
- 热激蛋白是细胞或生物体受到热激后新合成的一类遗传上高度保守的蛋白,在生物体中普遍存在,在细胞生长、发育、分化、基因转录等功能方面发挥重要的作用。本研究利用生物信息学方法首次对黑腹果蝇(Drosophila mel-anogaster)全部热激蛋白进行分析。结果表明,黑腹果蝇热激蛋白共有HSPC(HSP90)、HSPA(HSP70)、DNAJ(HSP40)、HSPB(小分子HSP)、HSPD(HSP60)、CCT(TRiC)等6个基因家族,不存在HSPE(HSP10)和HSPH(HSP110)家族,共有35个基因,新发现7个基因,命名为HSPBA5、HSPBB2、HSPBB3、DNAJA7、DNAJA8、HSPD5和HSPCB1。染色体定位表明,黑腹果蝇热激蛋白主要分布在2L、3L、2R、3R和X上。序列比对分析发现,黑腹果蝇热激蛋白家族序列高度保守。进化分析表明,他们有共同的祖先,可分为6个基因家族。
- 牟国鹏陈斌何正波
- 关键词：黑腹果蝇热激蛋白生物信息学系统发育
- 葱蝇非滞育蛹期的发育形态学研究被引量：3
- 2012年
- 葱蝇是昆虫蛹滞育研究的理想模式种,其发育形态学特征对推断滞育发育过程至关重要,目前还没有花蝇科蛹期发育形态学的相关报道.本研究通过解剖和拍照观察,系统地研究了葱蝇老熟幼虫期到羽化的发育形态学特征,特别注重头外翻前后的形态变化.研究结果将老熟幼虫期划分为5个发育阶段;将预蛹期分为白色围蛹期和棕色围蛹期2个亚时期,13个发育阶段;将蛹期分为隐头蛹期和显头蛹期2个亚时期,30个发育阶段.其中,显头蛹期又可细分为显头蛹初期、发育形态停滞期、半透明眼期、浅黄色到琥珀色眼期、红褐色眼期、鬃毛蛹期和预成熟期.本研究还详细地描述了各时期及发育阶段的发育过程、历期和形态特征,并详细地观察和描述了头外翻的发育过程,把蛹壳外可见幼虫口钩确定为头外翻发生的外部标志特征.同时,还描述了蛹主要发育阶段的长宽比例,成熟雌、雄蛹间的形态差异,结果表明雌虫体型(体长和体宽)比雄虫略大,雄虫的复眼比雌虫大,雌虫两复眼间的距离超过雄虫的2倍.本文是花蝇科昆虫蛹期发育形态学的首次报道,对认知蝇类昆虫蛹期发育形态,了解葱蝇滞育与非滞育蛹发育过程、历期和形态变化有重要的意义,为葱蝇滞育的分子机理研究奠定了形态学基础.
- 陈斌黎万顺何正波
- 关键词：葱蝇发育形态学发育历期
- 双翅目昆虫线粒体基因组结构特点及其测序通用引物的设计和应用被引量：13
- 2013年
- 研究双翅目昆虫线粒体基因组的结构特点,并设计其测序的通用引物,为今后双翅目昆虫线粒体基因组的研究提供参考和依据。利用比较基因组学和生物信息学方法,分析了已经完全测序的26个双翅目昆虫线粒体基因组的结构特点、碱基组成和保守区,并据此设计了双翅目昆虫基因组测序的通用引物。结果表明:双翅目昆虫线粒体基因组长14503～19517bp,其结构保守,含有37个编码基因,包括13个蛋白质编码基因,22个tRNA编码基因和2个rRNA编码基因,此外还包含一段长度差异很大的非编码区(AT富含区)。基因组内基因排列次序稳定,除个别基因外,其余都与黑腹果蝇Drosophila melanogaster基因排列次序一致。基因组的碱基组成不均衡,AT含量在72.59%～85.15%之间,碱基使用存在偏向性,偏好使用AC碱基。全基因组的核苷酸和氨基酸序列保守,共鉴定了11个保守区。在保守区内共设计了26对双翅目线粒体基因组测序通用引物,扩增的目标片段都在1200bp以内。将该套通用引物用于葱蝇Delia antiqua线粒体全基因组测序,结果证明其高效、合用。
- 张乃心张玉娟余果陈斌
- 关键词：双翅目葱蝇线粒体基因组基因结构通用引物
