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国家自然科学基金(31170631)

作品数:9 被引量:35H指数:4
相关作者:陈仲安新民王佳李英李昊更多>>
相关机构:北京林业大学中华人民共和国环境保护部教育部更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 6篇农业科学
  • 5篇生物学

主题

  • 7篇毛白杨
  • 7篇白杨
  • 5篇基因
  • 3篇克隆
  • 3篇QRT-PC...
  • 2篇蔗糖
  • 2篇蔗糖合酶
  • 2篇瞬时表达分析
  • 2篇启动子
  • 2篇基因启动子
  • 1篇烟草
  • 1篇杨树
  • 1篇遗传转化技术
  • 1篇实时定量RT...
  • 1篇受体
  • 1篇突变
  • 1篇突变基因
  • 1篇农杆菌
  • 1篇农杆菌介导
  • 1篇子机

机构

  • 9篇北京林业大学
  • 2篇中华人民共和...
  • 1篇教育部

作者

  • 9篇陈仲
  • 8篇安新民
  • 6篇王佳
  • 5篇李英
  • 4篇李昊
  • 3篇叶梅霞
  • 3篇郭斌
  • 2篇王静澄
  • 2篇季乐翔
  • 1篇廖维华
  • 1篇刘军梅
  • 1篇孙吉
  • 1篇高凯

传媒

  • 3篇植物生理学报
  • 2篇中国生物工程...
  • 1篇北京林业大学...
  • 1篇西北植物学报
  • 1篇Journa...
  • 1篇中国细胞生物...

年份

  • 1篇2017
  • 2篇2014
  • 3篇2013
  • 3篇2012
  • 1篇2011
9 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
毛果杨PtrAP1-2基因启动子的克隆及其瞬时表达分析被引量:5
2013年
为了研究杨树AP1同源基因的表达规律,利用PCR技术从毛果杨基因组DNA中克隆出PtrAP1-2基因上游一段2103bp序列。联合使用PLACE和PlantCARE在线软件分析序列,结果表明该序列含有TATA-box和CAAT-box启动子基本元件,另外含有MRE、GT1-motif、AE-box、TCT-motif和Box4多种光响应元件,因此,PtrAP1-2可能与植物开花过程紧密相关。在序列分析的基础上,构建了PtrAP1-2基因启动子驱动GUS报告基因的植物表达载体,命名为PtrAP1-2pro::GUS。利用农杆菌介导的瞬时表达法转化烟草,结果表明PtrAP1-2启动子可以驱动GUS基因在烟草萼片和花瓣中特异表达,在根、茎、叶、雄蕊和心皮等其他组织部位里没有GUS表达活性,这表明PtrAP1-2pro为花器官特异表达启动子。
陈仲王佳安新民
关键词:启动子GUS
毛白杨蔗糖合酶基因PtSUS1的克隆及其表达模式分析被引量:1
2012年
蔗糖合酶(sucrose synthase)与植物库强调节、次生壁的形成和纤维素合成等有着密切的联系,其中在纤维素合成过程中的作用尤为显著。本研究根据我们已获得的毛白杨PtSUS1基因片段设计引物,采用RACE技术,获得了毛白杨PtSUS1的基因序列,测序结果显示该基因序列全长为2 669 bp,包括一个完整的阅读框,编码805个氨基酸。通过Blast检索分析表明,PtSUS1与拟南芥、巨桉、陆地棉、温州蜜柑、毛果杨SUS1的核酸和氨基酸序列的同源性分别达到76%~97%和82%~97%。运用生物信息软件对PtSUS1编码的蛋白进行了二级结构预测和功能位点分析,结果显示该蛋白氨基酸序列包括两个功能域,存在可能的磷酸化位点38个,无跨膜结构域存在。系统进化分析表明PtSUS1与PtSUS2关系最为接近。RT-PCR分析结果显示,PtSUS1在被检测的毛白杨根、茎、叶及雌雄花芽组织和器官中均有表达,呈现组成型表达模式。该研究为进一步深入探索毛白杨蔗糖合酶基因PtSUS1的功能奠定了基础。
李英陈仲李昊郭斌王佳安新民
关键词:蔗糖合酶毛白杨克隆
外源突变基因AP1M2转化毛白杨的研究被引量:2
2014年
为探究毛白杨开花调控分子机制并获得不飞絮毛白杨株系,利用农杆菌介导法将显性负突变结构基因AP1M2转入毛白杨中,经PCR检测,共获得阳性转化植株7株。通过RT-qPCR检测转基因植株中外源基因AP1M2表达量,发现各株系间的表达水平差异显著,最高为内参的5.41倍,最低为1.89倍。对转基因毛白杨中内源PtAP1和其他开花关键基因的表达量进行检测,发现内源AP1的表达受到抑制,表达量明显下调;其他开花关键基因LFY、AP3、PI、SEP3和FT1等的表达量也有不同程度的降低,而FT2表达量并没有明显变化。这些研究结果表明转AP1M2毛白杨中AP1、LFY、AP3、PI、SEP3和FT1的表达受到明显抑制,对毛白杨花发育将有一定影响。
陈仲王静澄安新民
关键词:毛白杨开花
Identification and Characterization of the Populus AREB/ABF Subfamily被引量:7
2013年
Abscisic acid (ABA) is a major plant hormone that plays an important role in responses to abiotic stresses. The ABA-responsive element binding protein/ABRE-binding factor (AREB/ABF) gene subfamily contains crucial transcription factors in the ABA-mediated signaling pathway. In this study, a total of 14 putative AREB/ABF members were identified in the Populus trichocarpa Torr. & Gray. genome using five AREB/ABF amino acid sequences from Arabidopsis thaliana L. as probes. The 14 putative Populus subfamily members showed high protein similarities, especially in the basic leucine zipper (bZIP) domain region. A neighbor-joining analysis combined with gene structure data revealed homology among the 14 genes. The expression patterns of the Populus AREB/ABF subfamily suggested that the most abundant transcripts of 11 genes occurred in leaf tissues, while two genes were most transcribed in root tissues. Significantly, eight Populus AREB/ABF gene members were upregulated after treatment with 100 t^M exogenous ABA, while the other six members were downregulated. We identified the expression profiles of the subfamily members in Populus tissues and elucidated different response patterns of Populus AREB/ABF members to ABA stress. This study provided insight into the roles of Populus AREB/ABF homologues in plant response to abiotic stresses.
Lexiang JiJia WangMeixia YeYing LiBin GuoZhong ChenHao LiXinmin An
关键词:POPULUS
毛白杨蔗糖合酶基因PtSS2克隆与表达分析被引量:1
2013年
为了解毛白杨蔗糖合酶(sucrose synthase,SS)基因功能和表达模式,以毛白杨茎段来源的cDNA为模板,根据毛果杨PtrSS2 CDS 序列信息设计特异引物,采用RT-PCR技术分离克隆了PtSS2基因。测序分析表明,PtSS2基因序列全长为2 412 bp,编码803个氨基酸,蛋白大小为92.14 kD,理论等电点6.00,属于酸性蛋白;氨基酸序列同源性分析表明,PtSS2与毛果杨PtrSS2和PtrSS1一致性分别高达100%和98.63%;结构域分析表明,PtSS2含有2个高度保守的功能域,即蔗糖合酶(5~552)和糖基化转移酶(554~744)功能域。qRT-PCR 检测表明,PtSS2在毛白杨根、茎、叶、营养芽、雄雌花芽等各个组织中均有表达,但在营养芽和花芽中表达量较高,根部相对较低,总体呈组成型表达模式;在干旱胁迫下,PtSS2表达水平提升。研究结果推测,蔗糖合酶基因PtSS2在毛白杨各组织器官发育过程及干旱胁迫响应过程中具有重要功能。
王佳季乐翔陈仲叶梅霞李英安新民
关键词:毛白杨蔗糖合酶实时定量RT-PCR
毛白杨PtLFY基因启动子的克隆及其瞬时表达分析被引量:7
2012年
为了研究毛白杨LEAFY同源基因PtLFY的表达调控规律,利用PCR技术从毛白杨基因组DNA中克隆出PtLFY基因上游一段1575 bp的序列。经PLACE、PlantCARE在线软件分析表明,该序列含有TATA-BOX、CAAT-BOX等启动子基本元件,另外,还包含干旱诱导的MYB结合位点、脱落酸(ABA)响应元件、光响应元件等其他一些调控序列。因此,PtLFY的表达可能受干旱、ABA、光照等因子的调控。利用FootPrinter在线软件对毛白杨等6个物种的LFY同源基因启动子进行比对,发现不同物种的启动子相对保守,但也存在差异,说明LFY基因在功能上具有相似性,但存在一定差异。在序列分析的基础上,构建由PtLFY启动子驱动GUS报告基因的植物表达载体,命名为PtLFYp1304。通过农杆菌介导的方法转化烟草,对该启动子进行瞬时表达研究,结果表明PtLFY启动子可以驱动GUS基因在烟草根、茎、叶和花器官中表达,但在根、茎、叶中仅微弱表达,表达强度明显低于CaMV35S启动子,而在花萼和雄蕊中表达强烈。
李昊陈仲李英王佳安新民
关键词:毛白杨LEAFY启动子
毛白杨PtPCP-like基因的克隆及其遗传转化初报
2012年
利用滤纸吸附噬菌体-PCR法,从毛白杨花芽cDNA文库中分离克隆了PtPCP-like基因cDNA全长序列,测序表明克隆得到的该序列全长595bp,包含一个完整的开放阅读框,编码91个氨基酸;经BLAST分析发现,该基因包含与拟南芥花粉外被蛋白基因相似的序列,命名为PtPCP-like。采用RT-PCR技术检测PtPCP-like基因在各个组织部位的表达模式,结果显示在毛白杨的根和雄花芽中表达丰度最高,而在雌花芽部位表达丰度最低。并且构建35S∶∶PtPCP-like植物表达载体,采用农杆菌介导法将PtPCP-like基因导入烟草中,获得了一批阳性转化植株。采用qRT-PCR技术检测PtPCP-like基因在各个转基因烟草中的表达模式,结果显示在转基因烟草中各个株系均比野生型表达量高,且不同株系间相对表达量差异显著。
郭斌刘军梅李英陈仲李昊叶梅霞王佳安新民
关键词:毛白杨烟草QRT-PCR
毛白杨开花调控的分子机制研究
毛白杨是我国重要的白杨派乡土树种,广泛应用于我国的城乡绿化、用材林建设以及纸浆造纸。对毛白杨开展开花调控的分子机制研究具有以下意义:为促进毛白杨提早开花,缩短育种周期,加速遗传改良具有推动作用;为解决春季飞絮散粉问题奠定...
陈仲
关键词:毛白杨花发育基因家族
文献传递
毛白杨PtFT1和PtFT2基因编码区克隆与表达模式分析被引量:2
2011年
以毛白杨为材料,采用同源基因克隆法从毛白杨中分离了FT(FLOWERING LOCUS T)同源基因PtFT1和PtFT2编码区序列。测序结果表明PtFT1和PtFT2编码区长度均为525bp,可编码174个氨基酸。蛋白序列比对发现这两个基因与拟南芥、葡萄等物种中FT同源基因所编码的氨基酸同源性达到75%以上,PtFT1和PtFT2所推测的氨基酸序列包含FT类蛋白保守基序(LGRQTVYAPGWRQN)和两个关键性氨基酸残基Tyr84(Y),Gln139(Q)。系统进化分析进一步表明PtFT1和PtFT2属于FT亚家族成员。采用Real-time qRT-PCR技术检测PtFT1和PtFT2在各个组织部位中的表达模式,结果表明PtFT1和PtFT2在各个组织部位均有表达,但这两个基因的表达水平存在差异;两个基因在早期雌雄花芽(7月5日)表达量明显高于成熟雌雄花芽(翌年3月10日)表达量,进而推测在毛白杨中PtFT1和PtFT2的表达响应日照长短,长日照条件促进这两个基因的表达,它们可能在光周期调控的开花途径中促进花芽分化和开花发挥特定作用。这些研究对于阐明PtFT1和PtFT2在光周期开花调控途径中的作用机制具有重要意义,为进一步开展毛白杨开花调控基因工程研究奠定了工作基础。
陈仲李昊李英王佳叶梅霞郭斌季乐翔安新民
关键词:毛白杨FTQRT-PCR
影响农杆菌介导的杨树遗传转化技术的因素被引量:11
2014年
杨属树种是农杆菌的天然寄主之一,但木本植物一般再生能力较差,如何提高杨树的遗传转化频率就成为目前研究者最为关心的问题。本文结合农杆菌介导杨树遗传转化研究的最新进展和我们的实际工作对农杆菌的遗传转化原理、转移方法、以及影响农杆菌转化的因素进行了全新而深入的论述,并针对如何提高木本植物的转化频率,提出了一些改良的措施和方法。
陈仲廖维华王静澄高凯孙吉安新民
关键词:农杆菌杨树受体
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