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国家重点基础研究发展计划(2007CB109203): 作品数：14 被引量：85H指数：6; 相关作者：张杰燕永亮陆伟张维陈明更多>>; 相关机构：中国农业科学院生物技术研究所中国农业科学院植物保护研究所中国农业科学院蜜蜂研究所更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

精氨酸激酶蛋白及分子生物学的研究进展被引量：8: 2011年; 在无脊椎动物体内,精氨酸激酶(arginine kinase)在能量代谢过程中发挥着重要的作用。随着研究的深入,越来越多的数据表明,精氨酸激酶的作用不仅限于提供和维持能量的平衡,而且对生命活动的调控起到重要作用。综述无脊椎动物体内精氨酸激酶的进化历程、蛋白特性、特异表达及生物学功能等方面的研究进展,为深入研究无脊椎动物的抗性调控机制提供必要的参考。此外,对无脊椎动物精氨酸激酶的重要性和研究中存在的问题进行讨论。; 苏晓峰陆国清程红梅; 关键词：精氨酸激酶抗性进化特异性表达

成年蜜蜂脑神经细胞的培养和电生理特征被引量：9: 2008年; 为了研究杀虫剂等对蜜蜂毒性作用的神经机制,需在体外建立成年蜜蜂脑神经细胞的分离培养和电生理记录技术并研究其正常电生理特征,而对成年蜜蜂脑神经细胞的分离培养和电生理特性的研究报道甚少。我们采用酶解和机械吹打相结合的方法获得了数量较多且活力较好的成年意大利蜜蜂Apismellifera脑神经细胞,并用全细胞膜片钳技术研究了成年意大利蜜蜂脑神经细胞对电流和电压刺激的反应,获得了成年意蜂脑神经细胞的基本电生理特征以及钠电流和钾电流的特性。全细胞电流钳的记录结果表明,在体外培养条件下,细胞无自发放电发生,注射电流后仅引起细胞单次放电,引起细胞放电的阈电流平均为60.8±6.3pA;细胞动作电位产生的阈电位平均为-27.4±2.3mV。用全细胞电压钳记录了神经细胞的钠电流和钾电流。钠电流的分离是在电压刺激下通过阻断钾通道和钙通道实现。细胞的内向钠电流在指令电压为-40～-30mV左右激活,-10mV达峰值,钠通道的稳态失活电压V1/2为-58.4mV;外向钾电流成份至少包括较小的快速失活钾电流和和较大的缓慢失活钾电流(占总钾电流的80%),其半激活膜电位V1/2为3.86mV,无明显的稳态失活。结果提示缓慢失活钾电流的特征可能是细胞单次放电的机制之一。; 周婷王强代平礼张毅力孙继虎; 关键词：蜜蜂兴奋性钠电流钾电流膜片钳

转Bt-cry1Ah基因玉米花粉对意大利蜜蜂幼虫的影响被引量：2: 2012年; 新型杀虫蛋白基因cry1Ah基因是中国农业科学院植物保护研究所从Bt菌株BT8中鉴定克隆的,其编码蛋白对鳞翅目害虫具有强毒力,尤其对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)的毒力强于目前使用的cry1A类基因。转cry1Ah基因抗虫玉米具有很好的应用前景。花粉是蜜蜂重要的食物来源,蜜蜂是转基因植物安全性评价的关键测试生物。因此,开展转cry1Ah基因玉米对蜜蜂的安全性研究很有必要。给意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica Spinola蜂群中4～6日龄幼虫饲喂转基因玉米花粉、常规玉米花粉、杂花粉,哺育蜂饲喂为对照。转基因玉米花粉对意大利蜜蜂封盖率、出房率和发育历期没有显著影响。表明转cry1Ah基因玉米花粉对意大利蜜蜂幼虫的存活和发育没有不良影响。; 代平礼周玮张杰郎志宏周婷王强崔红娟姜玮瑜吴艳艳; 关键词：蜜蜂幼虫转基因玉米花粉

斯氏假单胞菌NifA蛋白Y370氨基酸突变对固氮基因转录的影响: 2009年; NifA为固氮微生物固氮基因(nif)表达的正调控因子,序列分析显示NifA蛋白C6区的一个酪氨酸残基高度保守(对应于A1501为Y370)。β-半乳糖苷酶活性分析表Y370C突变体不能激活nifH启动子,也不能使NifA缺失突变株A1506恢复固氮酶活,而野生型NifA可以激活PnifH+lacZ的表达,并恢复A1506的固氮酶活。研究证明斯氏假单胞菌A1501 NifA蛋白的C6区的Y370氨基酸是NifA蛋白激活nif基因转录的关键位点之一,其具体作用机制值得进一步深入研究。; 樊慧俐燕永亮李燕平淑珍张维陈明林敏陆伟; 关键词：斯氏假单胞菌A1501 NIFA蛋白定点突变转录激活

转cry1Ah基因玉米对根际土壤微生物群落结构的影响被引量：12: 2011年; 采用传统的平板计数法分析根际土壤可培养细菌、真菌和放线菌数量;同时用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)和BIOLOG方法,对转cry1Ah基因抗虫玉米根部土壤微生物群落结构进行了研究。结果表明,在玉米的整个生长过程中,根部可培养的微生物随时间变化有一定的消长,但同一时间内转基因玉米与非转基因玉米二者根部可培养细菌、真菌和放线菌的数量差异不显著。同时变性梯度凝胶电泳的结果显示,在玉米的整个生长期内,根部土壤细菌群落多样性指数为2.40～2.70,群落分布均匀度指数为0.96～0.99;根部土壤真菌群落多样性指数为2.17～2.48,群落分布均匀度指数为0.95～0.99;转基因玉米和常规玉米根部土壤细菌和真菌的群落结构变化差异并不显著。BIOLOG结果显示,微生物群落的孔平均颜色变化率值、Shannon指数、Simpson指数和McIntosh指数与对照相比无显著差异。以上结果说明cry1Ah基因的导入并没有对玉米根际土壤群落结构产生显著影响。; 崔红娟束长龙宋福平高继国张杰; 关键词：转基因玉米变性梯度凝胶电泳 BIOLOG

离子环境对Acinetobacter sp. ADP1的salR基因活性的影响: 2009年; 革兰氏阴性菌Acinetobacter sp. ADP1可以利用水杨酸作为惟一的碳源和能源生长,与这一代谢过程相关的基因为sal基因。利用sal基因启动子与细菌荧光素酶基因(lux)编码区融合而构建的工程菌Acinetobacter ADPWH_lux,通过定量测定活细胞发光度可以检测出salR基因在不同离子环境中的活性。本试验测定了不同浓度梯度的10种金属离子对处于指数期和稳定期的细菌的salR基因活性的影响。发光度检测表明重金属离子均会抑制指数期和稳定期的细菌的发光能力。RT-PCR试验也证明,凡能够抑制细菌发光能力的离子,均会抑制细菌的salA基因的转录。; 李超周琳张永军宋福平张杰; 关键词：ACINETOBACTER 生物发光

苏云金芽胞杆菌及其在蜂病防治中的应用被引量：1: 2008年; 本文阐述了有关苏云金芽胞杆菌(Bacillusthuringiensis,简称Bt)在传统农业害虫防治中的应用以及对大蜡螟的毒杀作用,为蜜蜂病虫害防治领域带来了新的曙光。; 吴艳艳周婷王强代平礼刘锋; 关键词：苏云金芽胞杆菌 BT制剂大蜡螟

氨肽酶N(APN)与鳞翅目昆虫对Bt抗性的关系被引量：4: 2008年; 使用Bt Cry毒素防治农业害虫是作物生产上的一个革命性的进步,受体与Bt杀虫蛋白结合能力的改变可能是昆虫对Bt产生抗性的主要原因。氨肽酶N(aminopeptidase N,APN)是一类存在于昆虫中肠内的Bt毒素受体蛋白,通过讨论APN与Bt毒素的结合作用,综述了APN基因变异与鳞翅目昆虫Bt抗性相关的分子机理,并介绍了(Bt)Cry毒素与APN相关的作用方式新模型。; 苗素丽张少平程红梅; 关键词：抗性

转cry1Ac/cpti基因水稻对土壤酶活性和养分有效性的影响被引量：7: 2011年; 【背景】转基因作物可能通过根系分泌物和植株残体组成的改变对土壤酶活性和养分转化产生影响,转基因作物对土壤质量的影响是其环境安全性评价的重要方面。【方法】本研究通过田间定位试验分析了连续3a种植2种转cry1Ac/cpti双价抗虫基因水稻后,土壤酶活性和养分有效性等土壤质量性状的变化。【结果】在水稻各生育期内,除齐穗期转基因稻科丰8号(GM1)田的土壤酸性磷酸酶活性显著(P<0.05)高于其受体非转基因稻明恢86(CK1)外,转基因稻GM1、GM2(Ⅱ优科丰8号)的土壤酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和脲酶活性与对应非转基因稻CK1、CK2(Ⅱ优明恢86)间均无显著差异。同时,在水稻生长过程中,土壤pH、有机质、有效氮、有效磷和速效钾等土壤理化指标在GM1和CK1或GM2和CK2间也均无显著差异。【结论与意义】连续3a种植转cry1Ac/cpti双价抗虫基因水稻并未改变稻田土壤中主要营养元素的有效性及其相关土壤酶活性,即短期内种植转cry1Ac/cpti双价抗虫基因水稻不会影响土壤酶活性和养分状况。该结果为进一步评价转基因水稻的生态风险提供了一定的依据。; 宋亚娜苏军陈睿林智敏林艳王锋; 关键词：土壤酶活性土壤养分生态风险

The Influence of Bt-Transgenic Maize Pollen on the Bacterial Diversity in the Midgut of Chinese Honeybees, Apis cerana cerana被引量：5: 2013年; Using culture-independent technique polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis （PCR-DGGE） and conventional culture techniques, ecological risk of transgenic maize pollen on gut bacteria of the Chinese honeybee, Apis cerana cerana, was assessed. Honeybees were fed with Bt-transgenic maize pollen, non-transgenic near isoline pollen, linear crylAh gene （800 ng mL^-1） and supercoiled plasmid DNA （800 ng mL^-1） under laboratory conditions. The DGGE profile showed that the number of DGGE bands varied from 10.7 to 14.7 per sample, and the Shannon＇s index ranged from 0.85 to 1.00. The similarity calculated by PAST was mostly above 92%, indicating no obvious changes among treatments or within replicates. 14 bacterial strains affiliated with Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Firmicutes, and Actinobacteria were isolated and characterized on media under aerobic and anaerobic conditions. These results demonstrated that transgenic crylAh maize pollen did not induce significant changes of the honeybee gut bacterial community composition under laboratory conditions.; JIANG Wei-yuGENG Li-liDAI Ping-liLANG Zhi-hongSHU Chang-longLIN YiZHOU TingSONG Fu-pingZHANG Jie; 关键词：BIOSAFETY

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