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肝型脂肪酸结合蛋白基因的原核表达、纯化和鉴定被引量：1: 2010年; 目的克隆肝型脂肪酸结合蛋白(LFABP)基因,构建其原核表达载体,并进行表达、纯化及鉴定。方法采用聚合酶链反应(PCR)方法从cDNA中扩增出LFABP基因片段,通过酶切和连接,构建原核表达载体pET-m-LFABP,转化入E.ColiBL21(DE3),经IPTG诱导表达;应用亲和层析、凝胶过滤层析和Lipidex1000凝胶层析分级纯化目的蛋白。圆二色谱分析检测目的蛋白的二级结构和热稳定性。结果 SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量约为15×103,与理论值相一致;应用亲和层析、凝胶过滤层析和Lipidex1000凝胶层析分级纯化目的蛋白,得到纯度较高的蛋白。蛋白的圆二色谱分析表明在大肠杆菌中表达的LFABP蛋白可以形成正确的折叠,热稳定性检测结果表明LFABP蛋白在高温下具有较高的稳定性。结论利用大肠杆菌表达系统,获得了较高纯度的目的蛋白,为进一步研究脂肪酸结合蛋白LFABP的生物学特性、参与脂肪酸代谢调控及其机制研究、与药物的相互作用提供重要基础和研究依据,并将为相关疾病的治疗奠定基础。; 杨海波柳静王莲哲廖春丽陈兰英; 关键词：肝型脂肪酸结合蛋白原核表达纯化

维甲酸对人食管癌细胞核基质蛋白表达的影响: 目的观察分析维甲酸对人食管癌EC9706细胞核基质蛋白表达的影响,以便进一步了解食管癌变与核基质蛋白的关系。方法采用细胞培养与诱导分化处理,核基质蛋白提取,双向电泳技术分析检测维甲酸处理前后人食管癌EC9706细胞核基质...; 杨海波陈兰英孙婕刘俊红谢朝辉佘秋生赵桢; 关键词：生物工程食管癌EC9706细胞维甲酸核基质蛋白; 文献传递

姜黄素对胆管癌MZ-Cha-1细胞的细胞周期和诱导凋亡作用: 应用细胞培养、MTT、流式细胞仪、Giemsa staining、Hoechst33258染色等技术研究姜黄素对人胆管癌MZ-Cha-1细胞凋亡的诱导作用。实验结果显示,姜黄素可明显诱导人胆管癌MZ-Cha-1细胞的凋亡...; 杨海波宋巍陈兰英; 关键词：胆管癌细胞流式细胞术; 文献传递

重组血红蛋白的原核表达、纯化和鉴定: 2010年; 目的利用大肠杆菌表达载体,表达血红蛋白(Hb)基因,并进行纯化及鉴定。方法将原核表达载体pHE 2-Hb转化入E.Coli JM109,经IPTG诱导表达;应用阴离子交换层析、阳离子交换层析分级纯化目的蛋白,用Western blot鉴定纯化出的目的蛋白。结果 SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量约为67 kD,与理论值相一致;应用阴离子交换层析、阳离子交换层析分级纯化目的蛋白,Western blot检测表明得到纯度较高的目的蛋白。结论利用大肠杆菌表达系统,获得了较高纯度的目的蛋白,为进一步研究Hb的生物传氧机制研究和以Hb为基础载氧药物的研究提供重要基础和研究依据,并将为血液替代品和相关疾病的治疗研究奠定研究基础。; 杨海波廖春丽朱涛王莲哲陈兰英; 关键词：血红蛋白原核表达纯化

HMBA对人食管癌细胞核基质蛋白表达的影响: 2011年; 目的进一步探讨食管癌变与核基质蛋白的关系。方法对食管癌EC9706细胞行诱导分化及环六亚甲基双乙酰胺(HMBA)处理,处理前后双向电泳技术分析检测人食管癌EC9706细胞核基质蛋白表达变化。结果 HMBA处理后核基质蛋白15个蛋白点表达发生显著变化。其中表达明显减弱3种,表达明显增强7种,新出现5种。结论人食管癌EC9706细胞诱导分化过程中伴有核基质蛋白表达的差异,与癌细胞分化和逆转密切相关。; 杨海波李昌陈兰英阮鹏飞高升; 关键词：食管癌EC9706细胞核基质蛋白

HMBA对人肝癌SMMC-7721细胞形态与超微结构的影响: 应用环六亚甲基双乙酰胺处理人肝癌SMMC-7721细胞,观察处理前后细胞周期、细胞形态与超微结构的变化。实验结果显示,经5mmol/L环六亚甲基双乙酰胺处理后,抑制了人肝癌SMMC-7721细胞的生长和增殖活动,阻滞了细...; 陈兰英杨海波李祺福; 关键词：SMMC-7721细胞; 文献传递

维甲酸对人食管癌细胞核基质蛋白表达的影响: 2011年; 目的:探讨维甲酸对人食管癌EC9706细胞核基质蛋白表达的影响,了解食管癌变与核基质蛋白的关系。方法:人食管癌EC9706细胞采用维甲酸诱导分化处理48h后,进行核基质蛋白提取,采用双向电泳技术检测维甲酸处理前后核基质蛋白表达的变化。结果:维甲酸处理前后的EC9706细胞中多种核基质蛋白的表达发生了变化,其中处理后表达下调的有4个核基质蛋白,表达上调的11个,新出现的有3个蛋白质点。结论:维甲酸对体外培养的人食管癌EC9706细胞核基质蛋白的表达种类及水平有显著影响,核基质蛋白表达的变化可能与食管的癌变有关。; 杨海波陈兰英孙婕谢朝晖; 关键词：食管癌 EC9706细胞维甲酸核基质蛋白

细胞骨架研究进展被引量：12: 2011年; 细胞骨架是纤维状聚合物和各种调控蛋白交错连接的网络结构,在真核细胞内对维持细胞形态、胞内运输、变形运动等方面发挥作用,本文就细胞骨架的组分、细胞骨架网络、细胞机械感受与细胞微环境的研究进展作一综述。; 谢朝晖陈兰英; 关键词：细胞骨架微环境细胞力学

环六亚甲基双乙酰胺诱导EC9706细胞分化中细胞增殖与形态结构的变化: 2011年; 目的:观察环六亚甲基双乙酰胺(hexamethylene bisacetamide,HMBA)对人食管癌EC9706细胞的增殖以及形态结构的影响。方法:采用不同浓度的HMBA(3、5、8、10mmol/L)处理人食管癌EC9706细胞,实验同时设立对照组(未加HMBA)。测定各组细胞的生长曲线、分裂指数,并在光镜下观察HMBA诱导前后细胞增殖以及形态结构的变化。结果:与对照组比较,经3、5、8、10mmol/L的HMBA处理后,EC9706细胞的生长和增殖受到抑制,其抑制率依次分别为52.875%、80.579%、83.617%、90.272%,差异均具有统计学意久(P<0.05或P<0.01),且呈浓度-效应关系。光镜下观察HMBA处理组的EC9706细胞较对照组细胞的体积增大,且趋于扁平铺展状态,细胞大小较为一致,排列较为规则。结论:经HMBA诱导处理后的人食管癌EC9706细胞出现了与同组织来源的正常上皮细胞相似的形态与结构特征,表现出肿瘤细胞恶性表型逆转的特征。; 高升杨海波王一雯刘亚军余淮斌孙婕谢朝晖陈兰英; 关键词：细胞增殖食管癌 EC9706细胞

肝脏型脂肪酸结合蛋白的重组表达及其单克隆抗体的制备和鉴定: 目的:制备抗肝脏型脂肪酸结合蛋白(LFABP)的单克隆抗体(mAb)并进行亚型和特异性鉴定。方法:以重组的LFABP蛋白为免疫原,免疫Balb/c小鼠,获得分泌鼠抗人LFABP蛋白mAb的杂交瘤细胞株,通过ELISA、W...; 宋巍杨海波陈兰英; 关键词：原核表达单克隆抗体; 文献传递

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