浙江省医药卫生科学研究基金(2007A137)
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 相关作者：江松福俞康庄强朱融和蔡芳芳更多>>
- 相关机构：温州医学院附属第一医院温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金温州市科技局对外合作项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肠三叶因子对氨甲喋呤所致肠黏膜细胞损伤的保护作用被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨肠三叶因子（ITF）保护甲氨喋呤（MTX）所致肠黏膜损伤的可能机制.方法 IEC-6细胞分为仅予培养液的空白对照组、经MTX处理的MTX对照组、仅予ITF预处理的ITF对照组和经不同浓度ITF预处理后再予MTX的ITF实验组.RT-PCR法检测E-cadherinmRNA表达变化.明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9活性.分光光度计法检测Caspase-3活性.细胞计数试剂盒-8法检测细胞增殖情况.改良的Boyden趋化小室法观测细胞迁移情况.结果 0.1 mg/mlITF实验组、1 mg/ml ITF实验组E-cadherin mRNA的相对表达量（分别为0.538±0.109和0.528±0.132）与MTX对照组（0.763±0.139）比较差异有统计学意义（P值分别=0.021和0.025）.各组间MMP-2和MMP-9活性差异均无统计学意义（P值均＞0.05）.0.1 mg/ml ITF实验组和1.0 mg/ml ITF实验组Caspase-3活性分别为0.077±0.009和0.044±0.009,较MTX对照组（0.090±0.011）下降（P值分别=0.032和0.005）.各ITF实验组的细胞增殖情况与MTX对照组比较差异均无统计学意义（P值分别=0.132、0.150、0.114、0.367）.1.0 mg/ml ITF实验组、0.1 mg/mlITF实验组Boyden小室穿膜细胞数[分别为（224.33±34.67）和（143.56±25.23）个]与MTX对照组[（50.11±7.77）个]比较差异均有统计学意义（P值均＜0.05）,两实验组间亦差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 ITF的保护作用与其促细胞迁移和抗细胞凋亡功能有关,且不会导致明显的细胞增殖.其促细胞迁移功能可能与下调E-cadherin基因转录水平有关.
- 苏华芳邹阮敏俞康江松福
- 关键词：氨甲喋呤肠三叶因子细胞迁移E-钙粘蛋白
- 人肠三叶因子重组真核表达载体的构建及在CHO/dhfr-细胞中的稳定表达
- 2016年
- 目的:构建人肠三叶因子(hITF)重组真核表达载体,并检测其在CHO/dhfr-细胞中的表达。方法:通过重叠延伸PCR法获得hITF cDNA片段,将目的基因插入真核表达载体pIRES/dhfr,得到重组真核表达载体pIRES/h ITF/dhfr;经脂质体介导转染CHO/dhfr-细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO/dhfr-细胞系;用RT-PCR及ELISA法检测hITF的表达。结果:成功构建了重组真核表达载体pIRES/hITF/dhfr,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达了目的基因。结论:成功构建了重组真核表达载体pIRES/hITF/dhfr,并在CHO/dhfr-细胞中分泌表达hITF蛋白,为进一步进行重组hITF的临床前研究奠定良好的实验基础。
- 朱融和陈慧瑶庄强江松福
- 关键词：真核表达载体
- 全身照射后肠黏膜通透性与肠三叶因子mRNA表达的关系
- 2011年
- 目的探讨全身照射（TBI）对肠道黏膜通透性和肠三叶因子（ITF）mRNA表达的影响以及二者之间的关系。方法32只BALB／c小鼠随机均分为4组：空白对照组和总剂量8．0Gy全身照射后4、8和12d组。TBI剂量8．0Gy，剂量率1．0Gy／min。高效液相色谱一蒸发光散射检测器分析（HPLC-ELSD）检测尿液标本中乳果糖与甘露醇的排出率比值（L／M），评价各组小鼠的肠道通透性；收集空肠组织标本，实时荧光定量PCR检测肠道ITFmRNA表达水平。结果TBI后4、8和12d组L／M比值分别为0．5092±0．0353，0．7174±0．0116和0．7295±0．0063，均明显高于空白对照组（0．2908±0．0533，F=321．47，P〈0．05）。TBI后4、8和12d组ITFmRNA表达水平分别为0．78612±0．1428，0．2521±0．1223，和0．2306±0．0221，均显著低于空白对照组（1．3498±0．0476，F=235．71，P〈0．05）。各TBI组中L／M与肠道ITFmRNA水平呈显著负相关（r=-0．985，P〈0．01）。结论TBI后随着时间延长ITFmRNA表达逐渐下降而肠黏膜通透性逐渐增加，即TBI后ITFmRNA表达与肠道通透性呈显著负相关。ITF在TBI所致肠道黏膜通透性增加中起着保护作用。
- 朱融和庄强蔡芳芳俞康江松福
- 关键词：肠道通透性
- 肠道急性移植物抗宿主病黏膜通透性与肠黏膜病理改变的相关性研究
- 2012年
- 目的研究肠道急性移植物抗宿主病(aGVHD)黏膜通透性变化与肠黏膜病理改变以及二者之间的关系。方法32只BALB/C小鼠随机分为4组:单纯照射组(对照组)和3个时段aGVHD组(aGVHD后7、11和15天组),各8只。TBI剂量8.0Gy,剂量率1.0Gy/min。高效液相色谱-蒸发光散射检测器分析(HPLC-ELSD)检测尿液标本中乳果糖(lactulose,L)和甘露醇(mannitol,M)的排出率比值(L/M),评价各组小鼠的肠道通透性;收集空肠组织标本做病理评估。结果肠道aGVHD后7、11和15天组L/M比值均明显高于对照组(P<0.05),分别为0.509±0.353,0.717±0.012,0.762±0.014,0.291±0.053。aGVHD后7、11和15天组aGVHD严重程度评分较对照组显著增加(P<0.05),分别为0.810±0.259,1.940±0.176,2.750±0.267,0.000±0.000。各组L/M与肠道aGVHD严重程度水平呈显著相关(r=0.903,P<0.01)。结论 aGVHD后随着时间延长肠黏膜通透性逐渐增加且肠道aGVHD严重程度评分逐渐增高;aGVHD后肠道通透性与肠道aGVHD严重程度呈显著相关,尿液L/M可作为肠道aGVHD严重程度的无创评估方法。
- 蔡芳芳庄强朱融和梁彬俞康江松福
- 关键词：肠道通透性肠黏膜
