国家自然科学基金(30572100)
- 作品数：6 被引量：26H指数：3
- 相关作者：刘文超张宁宁薛妍陈衍韩骅更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人脂肪酸合成酶启动子在乳腺癌细胞中的转录活性分析被引量：3
- 2007年
- 目的分析人脂肪酸合成酶(FAS)启动子在乳腺癌细胞中的转录活性,并与cerbB2启动子、midkine启动子相比较,为其乳腺癌靶向基因治疗提供依据。方法Western blot和间接免疫荧光法检测FAS蛋白在3种人乳腺癌细胞系SKBR3、MCF-7、MDA-MB-231以及正常成纤维细胞系NIH3T3中的表达。构建pGL3-FAS、pGL3-cerbB2和pGL3-midkine荧光素酶表达载体,并分析其在SKBR3、MCF-7、MDA-MB-231和NIH3T3细胞系中的相对转录活性。结果FAS蛋白在3种乳腺癌细胞系中均有表达,其中在SKBR3细胞中表达量最高,在MDA-MB-231细胞中表达量最低,而在正常成纤维细胞系NIH3T3中不表达。FAS蛋白主要定位于细胞质。FAS启动子在3种乳腺癌细胞系中均具有较强的转录活性,转录活性明显高于强启动子SV40和肿瘤特异性启动子midkine;而在正常成纤维细胞中,转录活性很低。FAS启动子在cerbB2高表达的SKBR3细胞中转录活性最高,与cerbB2启动子相当;在cerbB2表达较弱的MCF-7和MDA-MB-231细胞中的转录活性则明显高于cerbB2启动子。结论FAS启动子在乳腺癌细胞中具有强转录活性,较cerbB2启动子作用范围更广,较midkine启动子转录活性更高,而在正常细胞中转录活性很低,具有良好的乳腺癌靶向性,可作为乳腺癌广谱基因治疗的靶向工具。
- 陈衍刘文超秦鸿雁韩骅
- 关键词：乳腺癌脂肪酸合成酶启动子转录活性靶向治疗
- 抗肿瘤血管生成治疗相关性研究被引量：1
- 2007年
- 血管生成是肿瘤生长、侵袭、转移、和复发的基础。肿瘤血管生成是诸多因素共同作用的结果,其中血管生长刺激因子和血管生长抑制因子作用平衡与否,决定了血管生成是促进还是抑制。抗血管生成作为肿瘤治疗新方法,已成为重要的抗肿瘤策略。基因治疗则使抗血管生成治疗更具有靶向性。本文就该领域研究情况作一综述。
- 张宁宁刘文超薛妍
- 关键词：肿瘤血管生成基因治疗
- 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂与肿瘤相关性的研究进展被引量：11
- 2009年
- 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂相关基因的突变和表达失调可直接或间接影响细胞的周期、增殖以及凋亡等功能,与肿瘤的发生发展密切相关。p16能够抑制CDK4/CDK6介导的Rb蛋白产物的磷酸化,其CpG岛异常甲基化参与宫颈癌的发生发展;p21作为p53的下游调节因子,与肿瘤血管的生成、淋巴转移及预后相关;p27作用机制复杂,与乳腺癌预后关系密切,并可恢复耐药乳腺癌细胞对他莫昔芬的敏感性;p57在细胞周期G1到S期的转变中至关重要,其表达程度与部分肿瘤的恶性程度相关,它还参与了肿瘤细胞的凋亡过程。了解这些基因的结构和作用机制,探究其在肿瘤发生、发展中所产生的作用,进而寻找有效治疗靶点,已成为肿瘤分子生物学关注的热点。
- 马骥刘文超
- 关键词：细胞周期细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂肿瘤
- 肿瘤血管生成与抗血管生成基因治疗被引量：6
- 2007年
- 肿瘤血管生成是肿瘤生长浸润转移的关键步骤,其形成主要是促血管生成因子和抑制因子作用失衡的结果。以肿瘤血管生成为靶点的抗血管生成治疗作为肿瘤治疗新视野,已发展为重要的抗肿瘤策略。基因治疗则使抗血管生成治疗更具有靶向性,使这一治疗策略产生新的飞跃。本文就该领域研究情况作一综述。
- 张宁宁薛妍刘文超
- 关键词：肿瘤血管生成抗血管生成基因治疗
- 腺病毒介导的HBsAg基因修饰树突状细胞瘤苗对HepG2．2．15肝癌细胞的免疫效应被引量：3
- 2007年
- 目的研究腺病毒介导的HBsAg基因修饰树突状细胞(DC)体外诱导对HepG2.2.15肝癌细胞特异性的细胞毒效应。方法将HBsAg基因亚克隆到pIND和pShuttle载体中,构建重组载体pShuttle-S。将用PI-SceⅠ和Ⅰ-CeuⅠ双酶切后所获得的HBsAg基因片段与线性化的腺病毒载体pAdeno-X连接,构成腺病毒表达载体AdVHBsAg。经HEK293细胞包装腺病毒后,收获病毒并做滴度测定,再将AdVHBsAg转染人单核细胞来源的DC构建AdVHBsAg-DC肝癌瘤苗。采用Western blot法鉴定转染基因表达;流式细胞仪检测表面分子;3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)法检测T细胞增殖反应的能力;乳酸脱氢酶(LDH)法检测CTL活性。结果穿梭质粒插入片段为HBsAg基因;包装的腺病毒载体具有良好的感染性,可在HEK293细胞中形成病毒颗粒;HBsAg基因表达于AdVHBsAg- DC中,表明腺病毒介导的HBsAg基因转染的有效性;AdVHBsAg-DC可高表达CD1a、CD11c、CD80、CD86和HLA-DR;AdVHBsAg-DC刺激自体T细胞增殖功能明显高于AdVLacZ-DC组和未转染的DC组(P<0.05);AdVHBsAg-DC体外诱导CTL能够对表达HBsAg肝癌细胞起到特异性杀伤作用。结论AdVHBsAg可在DC中表达HBsAg肝癌相关抗原;AdVHBsAg-DC瘤苗可诱导T细胞产生高效的针对HepG2.2.15肝癌细胞的细胞毒效应。
- 杨静悦刘文超曹大勇斯小明腾增辉
- 关键词：树突状细胞
- 人FAS启动子驱动的HSV-TK重组腺病毒靶向杀伤SKBR3乳腺癌细胞的研究被引量：2
- 2007年
- 目的:构建脂肪酸合成酶(FAS)启动子驱动下的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)重组腺病毒,研究其对乳腺癌细胞SKBR3的靶向杀伤作用。方法:以AdEasyTM腺病毒系统为载体,构建FAS启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒载体Ad-FAS-TK,将线性化的Ad-FAS-TK在AD-293细胞中包装,经过大量扩增和纯化,得到重组腺病毒。MTT法检测重组腺病毒Ad-FAS-TK与前体药物更昔洛韦(GCV)对SKBR3细胞的靶向杀伤作用。TUNEL法检测细胞凋亡。结果:成功构建FAS启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒载体Ad-FAS-TK,经包装、扩增和纯化得到约1010pfu/ml的重组腺病毒。MTT法和TUNEL检测结果显示,FAS启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒与GCV能够诱导SKBR3细胞凋亡,产生靶向细胞毒作用。结论:FAS启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒联合GCV对SKBR3细胞具有靶向杀伤作用,FAS启动子可以作为肿瘤靶向基因治疗的工具。
- 陈衍刘文超秦鸿雁张瑞韩骅
- 关键词：脂肪酸合成酶启动子转录活性
