广西壮族自治区科技攻关计划(0815009-3-7)
- 作品数：17 被引量：74H指数：5
- 相关作者：熊毅冯淑萍付薇覃芳芸马琳更多>>
- 相关机构：广西动物疫病预防控制中心广西大学广西壮族自治区动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲株与NSP2变异株二重PCR诊断方法的建立及应用被引量：5
- 2009年
- 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株VR2332保守序列与近年PRRSV自然变异株序列分析研究,设计合成了2对特异引物,分别扩增出225、427bp两条特异型基因片段,通过优化RT-PCR条件,建立了可同时检测PRRSV标准株和NSP2变异株的二重PCR诊断方法。应用该方法分别对广西不同地区的16份病、死猪的血液、肺等组织进行检测,结果15份PRRSV阳性,其中1份为标准株,14份为变异株。试验结果表明,PRRSV标准株与变异株二重PCR诊断方法具有高度特异性、敏感性和实用性,可用于临床诊断,为目前流行的猪高热病病原研究及广西PRRS的防制提供了一定科学依据。
- 何丹龙剑明傅薇冯淑萍胡晓静付建刘棋
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株二重PCR
- 广西猪伪狂犬病毒感染状况调查报告被引量：8
- 2008年
- 为了解广西猪伪狂犬病毒的感染状况,应用PCR技术对来自广西46个种猪场的1940份公猪精液进行了猪伪狂犬病毒(PRV)的检测,阳性率为0;同时对广西25个已使用猪伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗猪场的1455份送检血清,采用了猪伪狂犬病基因缺失鉴别ELISA方法进行了血清学抗体监测,结果检出猪伪狂犬gE抗体阳性11份,阳性率为0.76%。结果表明,广西猪群中存在猪伪狂犬病野毒感染,但感染率较低。
- 付薇胡晓静朱伟潘杰龙剑明王常伟刘棋
- 关键词：PCR
- 2012—2013年广西部分规模猪场猪瘟群体免疫合格率与抗体离散度监测及免疫效果分析被引量：5
- 2014年
- 为了解近两年来广西部分规模猪场的猪瘟免疫抗体水平,采用阻断ELISA的方法对广西20个不同规模的猪场共计3 010份血清进行了猪瘟抗体检测,猪瘟抗体阳性2 577份,免疫合格率为85.61%,抗体离散度为34.87%。存栏数超过万头的大型规模猪场猪瘟群体合格率为92.36%(2 164/2 343),抗体离散度为27.80%;中小型规模猪场的猪瘟群体合格率为61.92%(413/667),抗体离散度为54.11%。表明大型规模猪场的猪瘟抗体水平明显好于中小型规模猪场。
- 马琳郭建刚覃芳芸胡巧云黄胜斌胡丽萍杨荣熊毅冯淑萍
- 关键词：规模猪场猪瘟抗体
- 猪瘟病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立被引量：4
- 2010年
- 根据GenBank中5′端非编码区的靶序列设计了用于TaqMan荧光定量PCR的1对引物及TaqMan探针,以猪瘟活疫苗病毒为模板,在常规PCR的基础上优化了TaqMan荧光定量PCR反应条件,建立了猪瘟病毒(CSFV)TaqMan荧光定量PCR检测方法。其敏感性和特异性试验结果表明,所建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法对CSFV具有很高的特异性,其检测灵敏度可达5.03×10-2μg/μL。说明TaqMan荧光定量PCR适用于CSFV的快速检测。
- 马琳付薇何奇松徐贤坤易春华孙翔翔蒋家霞黄胜斌熊毅
- 关键词：猪瘟病毒TAQMAN探针
- 广西猪链球菌2型毒力因子CPS基因的克隆测序与同源性分析
- 2014年
- 本试验通过PCR方法对17株广西猪源猪链球菌2型（SS2）荚膜多糖（CPS）基因cps2J片段进行了扩增、克隆测序，同源性分析结果表明，17株广西SS2的cps2J基因核苷酸和氨基酸的同源性分别在91.9%～99.8%和89.1%～99.7%；菌株可以分为Ⅰ群和Ⅱ群，包括5株发病猪源菌株的16株菌均分在Ⅰ群，Ⅱ群只有GXWX193株。Ⅰ群菌株的CPS基因核苷酸和氨基酸的同源性分别在96.8%～99.8%和94.6%～99.7%，与参考菌（荷兰Netherland、猪源菌株江苏ZYS8和四川SC17、人源菌株江苏98015）的核苷酸和氨基酸的同源性分别在96.4%～99.9%和94.1%～100%。Ⅱ群菌株与参考菌株的核苷酸和氨基酸同源性分别在91.3%～92.4%和89.1%～91.0%。17株广西猪源SS2菌株的cps2J基因序列变异程度小。
- 覃芳芸白昀冯淑萍胡丽萍马琳杨荣熊毅
- 关键词：猪链球菌2型克隆测序同源性分析
- 一例猪伪狂犬病和高致病性猪蓝耳病混合感染的诊断被引量：5
- 2014年
- 根据流行病学、临床症状、病理变化及实验室检测,对2013年12月玉林某猪场发生的一起动物疫病进行诊断,确诊为猪伪狂犬病和高致病性猪蓝耳病混合感染。并分析广西猪伪狂犬病和高致病性猪蓝耳病发病情况、发病特点及提出预防治疗建议。
- 文崇利冯淑萍胡巧云黄胜斌马琳
- 关键词：流行病学临床症状病理变化
- 广西部分地市高致病性猪繁殖与呼吸综合征的流行病学研究被引量：8
- 2009年
- 参照GenBank中已发表的PRRSV的序列设计了1对特异性引物,从广西部分地市发病猪场送检的65份病料中,检出14株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。对14个出现阳性的扩增产物进行克隆、序列测定,基因序列全长均为427bp,与国内部分流行毒株核衣壳蛋白基因的同源性均为96.2%以上,14份阳性样品之间同源性为97.2%以上,证实扩增的产物为高致病性猪繁殖与呼吸综合征。遗传进化分析表明,广西流行毒株均属于一个亚群,与江西、广州流行毒株高度同源。
- 冯淑萍何丹易春华熊毅付薇刘棋
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒流行毒株遗传进化分析
- 猪链球菌9型钦州分离株cps9H基因序列分析被引量：2
- 2010年
- 根据已发表的猪链球菌9型（SS9）荷兰5218分离株的基因核苷酸序列保守区域，设计一对特异性引物，以SS9钦州分离株抽提的DNA为模板，通过PCR方法扩增eps9H基因片段，并对其进行克隆、测序和分析。结果表明，4株SS9钦州分离株的cps9H目的基因长为389bp，与已知的7个国内外SS9毒株cps9H基因片段的核苷酸及推导的氨基酸序列比较，同源性分别为96．7％-100％和91．5％～100％。
- 陈进喜付薇覃芳芸何丹易春华刘棋熊毅
- 关键词：猪链球菌9型克隆
- 猪链球菌9型cps9G基因的克隆与序列分析被引量：11
- 2009年
- 根据GenBank中猪链球菌9型（SS9）基因的核酸序列，设计一对引物，采用PCR方法从确诊为猪链球菌的阳性样品中扩增cps9G基因片段，将其克隆到pMD18-T载体上，转化DH5a感受态细胞，提取重组质粒pMD18T-cps9G，经PCR和酶切鉴定后测序，并与GenBank上SS9相应序列进行同源性分析。结果表明，经PCR扩增，鉴定为SS9的有8株。序列分析发现，8株SS9的cps9G片段的核苷酸序列较稳定，该基因片段长度均为562bp，彼此间的核苷酸同源性达96．8％～99．8％，亲缘关系密切；与GenBank上已发表的SS9参考毒株的同源性介于96．0％～98．6％。
- 付薇陈进喜覃芳芸王常伟熊毅陈汉忠刘棋
- 关键词：猪链球菌9型克隆
- 表观健康猪群携带猪链球菌2型毒力因子的分布特征
- 2012年
- 为了研究钦州市猪链球菌2型(SS2)的毒力因子分布特征,采用多重PCR方法对从我市健康猪扁桃体分离的11株SS2相关毒力基因——荚膜多糖(Cps2J),溶菌酶释放蛋白(Mrp),胞外蛋白因子(EF),溶血素(Sly),进行毒力基因检测。检测结果显示:毒力基因型为Mrp+epf+Sly+共有8株,毒力基因型为Mrp+epf+Sly-共有1株,这两种毒力基因型可归为强毒力基因型,占此次健康猪源毒株的81.8%;另外Mrp-epf-Sly-共有2株,属于弱毒和无毒基因型,占健康猪源毒株的18.2%。通过结果分析,预示我市目前SS2的主要流行菌株是同时具有4种毒力因子的高致病性菌株。
- 陈进喜覃芳芸熊毅翟成兵郑彦梓黄梅
- 关键词：猪链球菌2型毒力因子
