国家高技术研究发展计划(2007AA021806)
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 相关作者：袁玫卢世璧郭全义崔雪梅眭翔更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院中国科学院解放军第251医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 四种热休克蛋白／肽混合物预防小鼠肉瘤发生、发展的作用研究
- 2009年
- 目的探讨四种热休克蛋白（heat shock protein，HSP）／肽混合物防治小鼠肉瘤的作用及其机制。方法小鼠S180肉瘤及MCA．207肉瘤组织，分别剪碎，裂解，离心，取上清上Sephacryl S-200HR层析柱，截取相对分子质量相当于50×10^3-200×10^3段，再经Con A、ADP亲和层析，SDS—PAGE电泳及Western—blot鉴定。分别用HSP-70、HSP-60及热休克蛋白／肽混合物（HSP-70、HSP-60、HSP-110、Gp-96）免疫小鼠，观察无瘤生存率、抑瘤生长率及存活期。用流氏细胞仪检测“T”细胞亚群，ELISPOT检测IFN-1，乳酸脱氢酶检测混合淋巴细胞杀伤作用等方法观察免疫功能的变化。结果HSP-70、HSP-60及热休克蛋白／肽混合物均有预防性免疫治疗效果，热休克蛋白／肽混合物防治S180肉瘤达到41.2％的无瘤长期生存，抑瘤生长率为83．3％，优于单一的HSP亚型。热休克蛋白／肽混合物防治MCA肉瘤达到50．0％的无瘤长期生存，抑瘤生长率为79．0％；多种方法检测表明热休克蛋白／肽混合物疫苗可诱发小鼠的细胞免疫功能。结论热休克蛋白／肽混合物可诱发机体细胞的免疫功能，其抑制肉瘤生长效果优于单一的HSP-70或HSP-60，具有临床应用前景。
- 彭江郭全义袁玫崔雪梅汤宇眭翔陈继营许文静卢世璧
- 关键词：肉瘤免疫疗法疫苗热休克蛋白质类
- 人骨肉瘤OS-732单克隆抗体的制备及纯化
- 2010年
- 目的制备、纯化抗人骨肉瘤OS-732单克隆抗体。方法通过杂交瘤细胞腹腔注射BALB/c小鼠制备腹水,ProteinA-Sepharose CL-4B亲和层析法纯化单抗,SDS-PAGE、免疫组化及ELISA检测该单抗的性质。结果SDS-PAGE鉴定单抗纯度达到93%,ELISA检测抗体免疫活性效价为1×10-7。结论制备、纯化了具有较高纯度及生物活性的的抗骨肉瘤OS-732单克隆抗体,为下一步骨肉瘤靶向治疗打下了基础。
- 贾艳辉陈继营崔雪梅眭翔郭全义张罕许文静张莉袁玫卢世璧
- 关键词：骨肉瘤杂交瘤
- 载多柔比星磁性纳米颗粒逆转人骨肉瘤细胞多药耐药性的实验研究被引量：3
- 2015年
- 目的 探讨载多柔比星磁性纳米颗粒（DOX-MNP）逆转人骨肉瘤细胞多药耐药性的可行性.方法 以人骨肉瘤多药耐药细胞株R-OS-732为实验对象,应用荧光显微镜观察DOX-MNP进入肿瘤细胞及其在细胞内分布的情况,采用四甲基偶氮唑蓝比色（MTT）法检测DOX-MNP对肿瘤细胞的增殖活性的影响,采用Annexin V-FITC/PI染色,流式细胞术检测DOX-MNP对肿瘤细胞凋亡的影响.结果 荧光显微镜观察发现与游离DOX相比,DOX-MNP在肿瘤细胞内尤其在细胞核内积聚更多;MTT实验表明DOX-MNP抑制肿瘤细胞增殖的效应较游离DOX更强;流式细胞术结果表明DOX-MNP促进肿瘤细胞坏死,而游离DOX促进细胞凋亡.结论 DOX-MNP对人骨肉瘤多药耐药细胞株R-OS-732的体外杀伤效应较游离DOX更强,能够逆转其多药耐药性.
- 郑铁钢郭全义陈继营贾艳辉张罕崔雪梅袁玫卢世璧
- 关键词：骨肉瘤多柔比星细胞毒性
- Fe_3O_4空心磁纳米微球制备工艺条件的影响因素被引量：2
- 2010年
- 背景:空心微球材料具有很好的生物相容性,在生物医学和化学等许多领域得到广泛的应用。目的:分析Fe3O4空心磁性纳米微球制备流程中反应温度、反应时间、洗涤次数、超声时间工艺条件对粒径的影响。方法:以聚氧乙烯-聚氧丙烯-聚氧乙烯-嵌段共聚物F127为原料,用共沉淀法制备空心超顺磁性纳米微球。运用正交试验的数学方法设计一个4×3的正交实验模型,从反应温度、反应时间、洗涤次数、超声时间4个方面考察不同制备条件对空心磁性纳米微球粒径大小的影响。结果与结论:得到的最佳实验制备条件:在75℃下,充分反应6h,用甲醇/去离子水反复洗涤3次之后,用功率为30%的超声处理20min。样品通过0.22μm滤嘴过滤后,用粒径分布仪、X射线衍射和透射电子显微镜对产物进行表征观察,证实用最优的实验条件制备的空心Fe3O4磁性纳米微球粒径为37.5nm,外壳厚度10nm左右,颗粒大小均匀,分布较好。
- 彭健唐琦潘一峰唐静波李波陈伟崔健张阳德
- 关键词：FE3O4正交实验
- 纳米铁与多柔比星加体外磁场靶向杀伤肿瘤细胞的动物实验被引量：5
- 2016年
- 目的 观察研制的一种由纳米铁颗粒制备的药物在体外磁场作用下对荷瘤小鼠肿瘤的治疗作用.方法 应用自组装、超声乳化法将纳米铁及多柔比星（DOX）包裹于聚乳酸/乙醇酸共聚物（PLGA）（Fe3O4-PLGA-DOX）中3将其注射入Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤内,加体外磁场,观察其对小鼠肿瘤的杀伤作用.小鼠死亡后观察主要脏器的病理组织学,通过铁染色观察纳米铁在各脏器中的存留.结果 成功制成Fe3O4-PLGA-DOX,其具有磁性,可以缓释药物.在体外磁场作用下Fe3O4-PLGA-DOX对肿瘤细胞的杀伤作用较单用DOX更强,Fe3O4-PLGA-DOX加体外磁场组肿瘤平均体积（1.027±0.606）cm3,单用DOX组肿瘤平均体积（1.698±0.971）cm3,Fe3O4-PLGA-DOX未加磁场组肿瘤平均体积（1.911±1.003）cm3.Fe3O4-PLGA-DOX加用磁场治疗的小鼠转移率降低,纳米铁大量存留于肿瘤细胞中,未被各主要脏器摄取.结论 Fe3O4-PLGA-DOX是一种新型药物,加用外磁场后,具有增强杀伤肿瘤细胞的作用,实现了物理靶向治疗肿瘤.
- 刘舒云原辉东袁玫崔雪梅眭翔高学云许文静卢世璧郭全义
- 关键词：肿瘤纳米铁外磁场多柔比星
- 混合热休克蛋白/肽疫苗与IL-2联合免疫治疗肉瘤的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的观察混合热休克蛋白/肽(mHSP/P)疫苗、环磷酰胺(Cy)及重组人IL-2(rhIL-2)联合免疫治疗小鼠肉瘤的效果。方法取小鼠S180细胞肉瘤组织,经层析分离获得混合mHSP/P疫苗,进行常规蛋白质印迹鉴定。S180细胞接种至小鼠皮下后第2天开始实验,将小鼠按mHSP/P、Cy、rhIL-2药物组合、疗程和剂量的不同依次分为B～I组,以及给予生理盐水的A组(对照组)。自肿瘤移植后至第45天,观察计算肿瘤体积;以肿瘤移植后3个月仍无瘤生长或肿瘤逐渐缩小至消失为标准,观察各组小鼠的无瘤生存情况,并进行平均生存期比较;以对照组的肿瘤体积为参照,计算第35天各组小鼠肿瘤的生长抑制率。结果蛋白质印迹分析结果显示所获目的蛋白为含有HSP110、HSP70、HSP60、Gp96的混合mHSP疫苗。3种药物联合应用的治疗效果明显优于单用mHSP/P疫苗,且多疗程较单一疗程疗效好,其中rhIL-2的最佳治疗剂量为5×104～1×105IU/只,并可使30%的小鼠肿瘤消退而长期生存(治愈),平均生存期延长22～26d,肿瘤生长抑制率为65%～76%。结论mHSP疫苗与适量rhIL-2以及小剂量Cy联合应用为临床肉瘤治疗新的免疫治疗方案提供了实验基础。
- 眭翔郭全义袁玫崔雪梅卢世璧
- 关键词：癌症疫苗热休克蛋白类白细胞介素2肉瘤
- 载IL-2磁性纳米粒的制备及其联合体外磁场在肿瘤组织中的靶向富集作用被引量：1
- 2013年
- 目的:以Fe3O4磁性纳米粒(Fe3O4magnetic nanoparticle,Fe3O4-MNP)和聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(poly lactide-co-glycolide,PLGA)为材料,制备载IL-2磁性纳米颗粒(IL-2-loaded magnetic nanoparticle,IL-2-Fe3O4-PLGA),观察其在肿瘤免疫治疗中的靶向富集作用。方法:采用复乳法制备IL-2-Fe3O4-PLGA,激光粒度分析仪和扫描电镜观察其大小和形态。ELISA检测IL-2-Fe3O4-PLGA的包封率、体外释药特性;MTT法检测其释放IL-2的生物学活性。构建S180肉瘤细胞小鼠肿瘤模型,研究其瘤体内注射联合体外磁场对S180细胞移植瘤生长的影响,普鲁士蓝染色观察IL-2-Fe3O4-PLGA在肿瘤组织以及肝脏和肾脏组织中的富集和分布。结果:成功制备了IL-2-Fe3O4-PLGA,IL-2-Fe3O4-PLGA呈圆球形,平均粒径为(697±0.51)nm,包封率为(83.76±1.24)%。IL-2-Fe3O4-PLGA突释期释放的IL-2质量浓度为100 ng/ml,第15 d后质量浓度为180 ng/ml,并且保持原有生物学活性的85%～55%。在肿瘤组织中,IL-2-Fe3O4-PLGA联合体外磁场组可见大量的普鲁士蓝染色阳性IL-2-Fe3O4-PLGA颗粒沉积,IL-2-Fe3O4-PLGA组只有少量的IL-2-Fe3O4-PLGA阳性颗粒沉积;两组肝脏中均可偶见少量阳性颗粒沉积,而肾脏几乎未见IL-2-Fe3O4-PLGA颗粒沉积。结论:载IL-2磁性纳米颗粒IL-2-Fe3O4-PLGA具有缓释IL-2的功能,联合体外磁场可有效富集于肿瘤组织中。
- 沈爱蓉郭全义袁玫王桂琴卢世璧
- 关键词：IL-2聚乳酸-聚乙醇酸共聚物S180肉瘤
